PLOS ONE: Expression de la famille EGF dans le cancer gastrique: La régulation négative de HER4 et son activation Ligand NRG4

Résumé

Le cancer gastrique est une cause majeure de décès liés au cancer chez les hommes et les femmes. Les récepteurs du facteur de croissance épidermique sont EGFR, HER2, HER3 et HER4. Parmi les quatre récepteurs du facteur de croissance épidermique EGFR et HER2 sont oncogènes bien connus impliqués dans le cancer gastrique. Peu, cependant, est connu sur le rôle joué par HER3 et HER4 dans cette maladie. Nous avons obtenu des échantillons appariés de la tumeur et le tissu normal adjacent à la même opération pour le patient subissant un cancer gastrique. En utilisant la RT-PCR quantitative, nous avons mesuré l'expression de l'ARNm des quatre récepteurs, y compris les isoformes d'épissage HER4 et tous les ligands d'activation de ces récepteurs. Par immunohistochimie, l'expression de la protéine de HER4 a également été quantifié. Nous avons découvert que l'expression de l'ARNm de HER2 était régulée positivement dans le tissu tumoral par rapport au tissu normal apparié (p = 0,0520). Tous les ligands ayant une affinité pour l'EGFR ont été surexprimés, alors que l'expression de l'EGFR est resté inchangé. Chose intéressante, nous avons trouvé que l'expression de l'ARNm de HER4 (p = 0,0002) et de son NRG4 ligand (p = 0,0009) qui doit être régulée à la baisse dans le tissu tumoral par rapport au tissu normal correspondant. HER4 downregulation a été démontrée pour tous les isoformes d'épissage alternatif de ce récepteur. Ces résultats confirment l'implication de l'EGFR et HER2 dans le cancer gastrique et suggèrent une association intéressante d'expression de HER4 réduit avec le développement du cancer gastrique

Citation:. Nielsen, Friis-Hansen L, Poulsen SS, Federspiel B, Sorensen BS (2014) expression de la famille EGF dans le cancer gastrique: la régulation négative de HER4 et son activation ligand NRG4. PLoS ONE 9 (4): e94606. doi: 10.1371 /journal.pone.0094606

Editeur: Rupesh Chaturvedi, École de médecine de l'Université Vanderbilt, États-Unis d'Amérique

Reçu 8 Juillet, 2013; Accepté le 19 Mars 2014; Publié le 11 Avril, 2014

Droit d'auteur: © 2014 Nielsen et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Cancer danois Société # R2-A247-09-S2, MRC danoise #FSS 09072153. les bailleurs de fonds n'a joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

intérêts concurrents:. le les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent.

introduction

le cancer gastrique est la troisième principale cause de décès liés au cancer chez les hommes et la cinquième cause chez les femmes. Le cancer gastrique représentait environ 990.000 nouveaux cas enregistrés et 738.000 décès dans le monde en 2008 [1]. L'infection par le Helicobacter pylori
, l'alimentation, le tabagisme et la consommation d'alcool sont des déterminants majeurs qui influent sur le risque de cancer gastrique [2], [3].

Le facteur de croissance épidermique (EGF) de la famille est un réseau complexe de récepteurs à tyrosine kinase et les ligands qui interagissent pour induire diverses cascades de signalisation. La famille comprend les quatre récepteurs EGFR (HER1), HER2 (ErbB2), HER3 (ErbB3) et HER4 (ErbB4) [4]. Par épissage alternatif, HER4 est exprimé dans un certain nombre d'isoformes. Dans le domaine juxtamembraneous de HER4, l'inclusion de l'exon soit 15b ou exon 16 résultats dans les isoformes jma ou Jmb, respectivement [5] - [7]. L'isoforme jma et non pas le isoforme Jmb peuvent être traités pour libérer un domaine soluble HER4 intracellulaire (ICD) qui localise dans le cytoplasme, le noyau et les mitochondries [8], [9]. L'épissage alternatif dans la région cytoplasmique de HER4 donne lieu à des isoformes CYT1 et CYT2. Saut de l'exon 26 résultats dans un récepteur (CYT2) manquant 16 des acides aminés du récepteur de pleine longueur (CYT1) [10].

Les ligands de la famille EGF sont un facteur de croissance épidermique (EGF), le facteur transformant de croissance-α (TGF-α) et l'amphiréguline (AR), qui sont spécifiques pour l'EGFR; liaison à l'héparine EGF-like growth factor (HB-EGF), bêtacelluline (BTC), et épiréguline (EPR) qui se lient à la fois EGFR et HER4; neuréguline 1 (NRG1) et NRG2 qui se lient à la fois HER3 et HER4; et enfin NRG3 et NRG4 qui sont spécifiques pour HER4 [11]. Lors de la liaison d'un ligand d'activation, les récepteurs font homo- et hétéro-dimères. La composition des partenaires de dimérisation et les ligands d'activation détermine le signal qui doit être transduit dans la cellule [12], [13]. La famille EGFR joue différents rôles dans la croissance et le maintien de nombreux tissus, entre autres, par la régulation de la division cellulaire, l'apoptose, la différenciation et la migration. La dérégulation de la signalisation de ce système est relié au développement et à la croissance des cancers [14] - [17]

EGFR et HER2 sont oncogènes bien connus dans le cancer gastrique [18], [19].. Le HER2 inhibant trastuzumab d'anticorps améliore le pronostic avec succès lorsqu'il est ajouté à la chimiothérapie chez les patients atteints de cancers gastriques avancés HER2-positifs [20]. Un certain nombre d'essais cliniques ont également été menées pour tester l'utilisation d'inhibiteurs de l'EGFR dans le cancer gastrique [21], [22]. HER3 et HER4 pourraient également être important dans l'étiologie du cancer de l'estomac; cependant, des informations sur leur rôle dans cette maladie est rare. En effet, on sait peu sur le modèle d'expression du système de EGF complet. En raison de la nature interactive des récepteurs et des ligands EGF, la clarification des mécanismes de régulation des EGF membres de la famille des demandes tenant compte de tous les récepteurs et leurs ligands ensemble.

Pour étudier le profil d'expression des récepteurs de l'EGF et les ligands dans le cancer gastrique, on a obtenu du tissu de la tumeur et le tissu normal adjacent à la même opération pour le patient subissant un cancer gastrique. Nous avons utilisé jumelé des échantillons de tissus pour assurer contre la variation inter-individuelle qui existe dans l'expression de base du système EGF. Utilisation de RT-qPCR, nous avons quantifié l'expression de l'ARNm des quatre EGF récepteurs, y compris les isoformes d'épissage HER4 et les ligands activant ces récepteurs.

Matériel et méthodes

La sélection des patients et la collecte des biopsies

Dans cette étude de cohorte, 38 patients subissant une chirurgie pour adénocarcinome de l'estomac, de l'oesophage ou gastro-jonction ont été consécutivement inclus de Juillet 2008 à Novembre 2009. Tous les individus ont fourni un consentement éclairé par écrit. Collection de biopsies a été approuvée par les comités d'éthique scientifiques régionaux de Zélande, le Danemark (numéro de la revue H-B-2008-049), et la création d'une biobanque a été approuvé par l'Agence de protection des données danoise (numéro de la revue 2008-41-2138). Les biopsies ont été prises à la fois le tissu tumoral et le tissu normal adjacent. Tous les échantillons de biopsie ont été examinés par un pathologiste expérimenté pour valider le diagnostic. Prédéfinis données cliniques ont été extraites des dossiers médicaux et des rapports de pathologie. Les caractéristiques cliniques des patients sont donnés dans le tableau 1.

ARN extraction

Les biopsies ont été placés dans l'ARN plus tard
(Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) immédiatement après suppression. ARN plus tard
a été retirée avant l'isolement de l'ARN, et Trizol (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) a été ajouté. Les échantillons de tissus ont été homogénéisés sur une Tissuelyser (Qiagen, Chatsworth, CA, USA). ARN à partir de tissu a été isolé selon le protocole de la fabrication pour Trizol ARN isolement (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA). Les concentrations d'ARN ont été mesurés sur un NanoDrop ND-1000 spectrophotomètre. la qualité de l'ARN a été testé sur un Bioanalyseur 2100 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) selon le protocole de la fabrication.

transcription inverse réaction en chaîne par polymérase quantitative (RT-q-PCR)

L'ADNc a été synthétisé à partir de 1 ug d'ARN total en utilisant le kit de haute Capacité ADNc transcription inverse (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA). La réaction finale a été diluée à un volume total de 200 uL

1 pi d'ADNc a été utilisé pour qPCR utilisant SYBR vert Master Mix (Roche, Bâle, Suisse) sur lightcycler Roche 480 à:. 95 ° C, 10 minutes; 50 cycles de 95 ° C pendant 10 sec, température d'hybridation spécifique pendant 10 s, 72 ° C pendant 5 s; 99 ° C pendant 1 s; 59 ° C pendant 15 secondes; 95 ° C pendant 1 s; refroidissement à 40 ° C. séquences et des températures de recuit Primer sont donnés dans le tableau 2.

Le gène le mieux adapté pour la normalisation a été déterminée en appliquant l'algorithme Normfinder [23] pour les concentrations quantifiées de GAPDH, β-actine, YWHAZ, SDHA et HMBS . SDHA avéré être le meilleur des cinq. Deux échantillons ont été exclus des analyses grâce à l'absence de détection de l'ARNm de l'un des gènes de référence.

immunocoloration

paraffine tissus fixés dans 4% de paraformaldehyde tamponnée à partir de 13 patients représentatifs ont été étudiés par immunohistochimie utilisant c-erbB-4 /HER-4, un anticorps polyclonal de lapin dilué 1/50 comme anticorps primaire (RB-9045-P1, Thermo Scientific, Wilmington, dE, USA). Pour les sections de récupération de l'antigène ont été bouillis dans les micro-ondes dans 10 mM de tampon citrate, pH 6,0. Le immunoréaction a été visualisé par chèvre biotinylé anticorps anti-lapin dilué 1/200 (BA-1000, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA), suivie d'une avidine préformé et la peroxydase de raifort biotinylé complexe macromoléculaire (ABC) dilué 1/100 (Code nr. PK-4000, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). La réaction a été développée par l'utilisation de 3,3 -diaminobenzidine et contre-coloration a été réalisée avec hémalun de Mayer. En tant que contrôle négatif, la même procédure a été effectuée sans anticorps primaire.

Utilisation de l'image Pro Plus (MediaCybernetics) l'intensité de la coloration des images représentatives de la tumeur par rapport au tissu muqueux environnant a été estimée. Deux images d'un échantillon de tumeur et de deux images de la muqueuse environnante ont été prélevés dans chaque échantillon de tissu et la moyenne des deux valeurs ont été calculées et utilisées pour l'analyse statistique et de traçage. Pour quelques échantillons, seulement le tissu tumoral ou seulement muqueuse normale était présent et aucune comparaison de l'expression HER4 était possible pour ces tissus. Le test t apparié a été utilisé pour déterminer si l'intensité des tissus tumoraux était différente de l'intensité des tissus de la muqueuse.

Résultats

expression de l'ARNm des récepteurs de l'EGF dans le cancer gastrique

ARN extrait de 38 tumeurs et appariés échantillons du tissu normal adjacent de patients ayant subi une chirurgie pour le cancer gastrique a été utilisé pour quantifications RT-qPCR. L'expression de l'ARNm de la famille EGF quatre récepteurs EGFR, HER2, HER3 et HER4 est représenté sur la figure 1. Il est intéressant, le HER4 a été soumis à une régulation négative dans le tissu cancéreux par rapport au tissu normal (p = 0,0004). Pour HER2, nous avons vu une surexpression de ce récepteur dans le tissu cancéreux qui était très près d'être significative (p = 0,0520). EGFR et d'expression HER3 ARNm était non changé dans les tumeurs par rapport au tissu normal.

HER4 existe sous différentes isoformes d'épissage alternatif. La région juxtamembranous peut consister soit jma ou Jmb, et la région cytoplasmique peut consister soit en CYT1 ou CYT2. La régulation négative de l'expression observée pour l'ensemble HER4 ARNm dans un tissu cancéreux appliqué à toutes les quatre variantes du récepteur (figure 2).

Pour mieux illustrer l'ampleur de HER4 régulation négative dans les tissus de la tumeur, nous avons tracé la HER4 ou descendante surexpression pour chaque patient. L'expression HER4 ARNm dans le tissu tumoral moins l'expression de HER4 ARNm dans les tissus normaux appariés (ΔHER4) est représentée sur la figure 3. Une valeur inférieure à 0 représente une régulation négative. Cette figure illustre clairement que HER4 downregulation est un mécanisme très général qui a lieu dans la majorité des patients et quelle que soit la localisation de la tumeur.

expression de l'ARNm des ligands de la famille EGF dans le cancer gastrique

TGF -α, l'amphiréguline, l'EGF et se lient spécifiquement à l'EGFR. Un niveau d'expression de l'ARNm négligeable a été détectée pour l'EGF à la fois dans la tumeur et le tissu normal, et donc ce ligand n'a pas été pris en considération pour une analyse ultérieure. Le TGF-α et de l'amphiréguline sont tous deux régulés positivement dans le tissu cancéreux par rapport au tissu normal (figures 4a et b). HB-EGF, la bêtacelluline et épiréguline ont une affinité pour les récepteurs EGFR et HER4, et tous ces ligands sont également régulés positivement dans le tissu cancéreux (figures 4 c, d et e). Pris ensemble, cela montre que tous les ligands de l'EGFR activation sont surexprimés dans les tumeurs.

Parmi les neurégulines, NRG1 et NRG2 se lient à la fois HER3 et HER4. Nous avons observé aucun changement dans l'expression de l'une ou l'autre des variantes α ou ß de NRG1 et NRG2 (figures 4f, g, h et i). NRG3 et NRG4 ne lient que HER4. NRG3 n'a subi aucun changement dans l'expression de la normale à un tissu cancéreux (Figure 4j). Cependant, NRG4 a été régulée négativement dans le tissu cancéreux par rapport au tissu normal (p = 0,0009) (figure 4K). Cela démontre que les deux HER4 et son ligand NRG4 spécifique sont régulés à la baisse dans le cancer gastrique.

Pour mieux illustrer l'ampleur de NRG4 downregulation dans le tissu tumoral, nous avons tracé l'aval de NRG4 ou surexpression pour chaque patient. L'expression NRG4 ARNm dans le tissu tumoral moins l'expression NRG4 ARNm dans les tissus normaux appariés (ΔNRG4) est représenté sur la figure 5.

Compte tenu de tous les patients présentant une régulation négative du total HER4 dans leur tissu tumoral, chez 82% de ceux-ci NRG4 est également une régulation négative et 86% d'un ou plusieurs des ligands de l'EGFR partagés (HB-EGF, le épiréguline, bêtacelluline) a été régulée à la hausse. Dans 36% des patients atteints de la régulation négative de HER4 totale, tous les trois des ligands de l'EGFR partagée ont été régulée à la hausse.

expression protéique de HER par immunohistochimie

En raison de la réglementation post-transcriptionnel, les profils d'expression de l'ARNm déterminée par RT-qPCR pourrait ne pas représenter le modèle d'expression de la protéine. Faire en sorte que la diminution observée de l'expression HER4 ARNm dans le tissu cancéreux de patients atteints d'un cancer gastrique se retrouve également au niveau de la protéine, nous avons effectué une coloration immunohistochimique sur des tissus inclus dans la paraffine fixés au formol chez tous les patients inclus dans l'étude.

Par une quantification de l'intensité de la coloration HER4 dans les zones représentatives de l'une tumeur et les tissus environnants, nous avons trouvé le tissu tumoral d'avoir beaucoup moins d'intensité HER4 de coloration par rapport à la muqueuse normale environnante (p = 0,0029) (figure 6) .

photomicrographies représentatives des colorations sont présentés sur la figure 7. dans la muqueuse gastrique normale il y avait une forte réaction immunologique de HER4 (figure 7a). En particulier, la portion basale du cytoplasme et la membrane cellulaire latérale des cellules épithéliales de surface sont fortement immunoréactives pour HER4 (figure 5 b). De plus, les cellules pariétales ont montré une immunoréactivité de HER4 très forte (figure 7 c et d). Les couches de sous-muqueuse et les muscles ont été négatifs. Dans les structures glandulaires en particulier les cellules pariétales ont montré une très forte immunoréactivité de HER4 (figures 7 c et d). Des témoins négatifs effectués sans anticorps primaire ont donné lieu à aucune coloration.

Dans les cancers gastriques seulement dans des zones mineures avec les cellules tumorales ont une réaction immunologique positive HER4 et le tissu tumoral négatif contraste fortement avec la muqueuse normale colorée adjacente à la la tumeur (figure 7). Dans les parties centrales du tissu tumoral presque toutes les cellules étaient complètement négatives en dehors des petits amas de cellules qui auraient pu avoir une coloration de la membrane distincte.

Discussion

La famille EGF est composé d'une interagissant réseau de récepteurs et ligands qui doivent être considérés dans leur ensemble pour comprendre la régulation de la signalisation dans la famille EGF. Nous avons déterminé le modèle de régulation de la famille EGF dans le tissu tumoral de patients atteints de cancer de l'estomac ainsi que le tissu normal adjacent appariés des mêmes patients.

Nous avons trouvé le potentiel de signalisation de l'EGFR à être régulée positivement dans le tissu tumoral grâce à une régulation positive de tous les ligands activant l'EGFR, et nous avons également trouvé surexpression de HER2 dans le tissu tumoral qui était très près d'être significative (p = 0,0520). Ceci est en bon accord avec les données existantes montrent que les deux EGFR et HER2 sont associées à un mauvais pronostic dans le cancer gastrique [19]. L'importance de HER2 dans le cancer gastrique est démontré par le fait que l'anticorps inhibant HER2 Herceptin est le seul agent approuvé pour le traitement ciblé du cancer gastrique [24].

Pour HER3, on n'a pas observé de règlement expressional sur le niveau de l'ARNm. Cependant, quelques études sur HER3 dans le cancer gastrique ont attribué un rôle pour HER3 dans le cancer gastrique. HER3 a été associée à une faible survie et l'expression de la protéine HER3 positive a été détectée par immunohistochimie dans 18,6% des échantillons de cancer de l'estomac, comparativement à seulement 2,0% des échantillons non tumoral [25] - [27]. Nous ne avons trouvé une expression de HER3 plus élevé dans le cancer gastrique par rapport au tissu normal dans notre étude. Cependant, une différence dans les méthodes utilisées dans les études (immunohistochimie vs RT-qPCR) pourrait expliquer certains des écarts dans les résultats. En outre, nous avons été en mesure de décrire le modèle de régulation dans chaque patient plutôt que dans une mare de patients atteints de cancer et d'un bassin de personnes de contrôle, et cela pourrait aussi expliquer une différence dans les résultats obtenus dans les deux études.

Nous avons trouvé une régulation négative marquée à la fois HER4 et son ligand activant NRG4 dans le tissu tumoral. Nos résultats sont renforcés par le fait que nous avons également constaté une régulation négative lorsque nous avons utilisé des tests supplémentaires pour quantifier les isoformes spécifiques de HER4. Par immunohistochimie, on a confirmé que le tissu gastrique normale est positif pour HER4, alors que le tissu cancéreux a très peu ou pas de coloration à l'HER4.

La diminution de l'expression d'expression HER4 ARNm dans le tissu tumoral peut être attribuée à une diminution de la nombre de cellules exprimant HER4 ou une diminution de l'expression de HER4 dans toutes les cellules exprimant HER4. De nos colorations immunohistochimiques, on constate que dans les cancers gastriques seulement grappes mineures avec des cellules tumorales ont une immunoréaction positive à HER4, alors que la grande majorité des cellules tumorales ont été complètement négative. Cela indique qu'il est le nombre de cellules qui exprime HER4 qui est diminué dans les tumeurs. Par contraste avec le tissu tumoral, le tissu normal a eu de très fortes réactions immunitaires à HER4. Fait intéressant, il est en particulier des cellules productrices de mucus et cellules pariétales produisant de l'acide chlorhydrique qui expriment la protéine HER4.

Le rôle de HER4 dans la maladie cancéreuse est controversée. Dans le cancer de la vessie, la RT-qPCR quantification de HER4 et ses ligands montrent que HER4 est associée à une meilleure survie. En particulier, la co-expression de HER4 avec son ligand spécifique, NRG4, est fortement corrélée à une meilleure survie [28]. De même, HER4 est associé à une meilleure survie globale et sans maladie dans le cancer du col utérin [29]. Dans le carcinome épidermoïde laryngé, HER4 est perdu dans les tumeurs à un stade avancé [30], et HER4 se trouve principalement en basse-scène et non-métastatique des tumeurs de xénogreffes dans le cancer du pancréas [31].

D'autre part, HER4 expression de la protéine, tel que déterminé par immunohistochimie a été associée à des métastases distale et un taux de survie a diminué dans les carcinomes épidermoïdes par voie orale [32]. Dans une étude du cancer colorectal dans lequel le motif d'expression de la protéine a également été déterminée par immunohistochimie, les patients à un stade précoce ont un faible pourcentage de patients HER4 surexpression de stade tardif [33]. Dans les tumeurs malignes du système nerveux central, HER4 possède également un rôle de promotion tumorale [34], [35].

Pas beaucoup est connu sur le rôle de HER4 dans le cancer gastrique. Aucune expression n'a été détectée HER4 ARNm dans deux lignées cellulaires de cancer gastrique [36]. HER4 expression de la protéine telle qu'elle est détectée par immunohistochimie a été trouvé une corrélation avec stade précoce, de qualité inférieure, et en l'absence de métastases des ganglions lymphatiques dans le cancer gastrique [25]. Ceci est en très bon accord avec une autre étude qui a enquêté sur les profils d'expression des gènes chez les survivants à long terme du cancer gastrique métastatique traités avec une chimiothérapie dans laquelle les auteurs ont indiqué un rôle possible de HER4 surexpression chez ces patients [37]. Ensemble avec nos résultats actuels, ces données indiquent en outre que la signalisation HER4 a une fonction de protection contre la cancérogenèse dans la région gastrique. Une étude a révélé le gène HER4 à fréquemment amplifié dans le cancer gastrique [38]. Cependant, les résultats de nos études indiquent que cela ne se traduit pas au niveau d'expression de HER4 depuis que nous avons trouvé une régulation négative de HER4 ARNm et l'expression des protéines plutôt que d'une régulation positive.

Même si nous ne trouvons l'expression de l'EGFR à réguler, le potentiel de signalisation par l'intermédiaire de ce récepteur est augmentée par la régulation positive de l'ensemble de ses ligands. Cela comprend les ligands partagés avec HER4: HB-EGF, bêtacelluline et épiréguline. En plus de l'activation de l'EGFR autocrine, surexpression de ces ligands potentiellement résultats de l'activité accrue de HER4. L'activation de la voie EGFR est en effet un moyen pour que les cellules deviennent de plus en plus cancérigènes. Toutefois, compte tenu HER4 d'avoir des fonctions anti-cancérigènes, une activation concomitante de ce récepteur pourrait arrêter l'avantage prolifératif de l'activation de l'EGFR. On peut supposer que cette activation potentielle de HER4 est évité par la régulation à la baisse concomitante du récepteur et son ligand NRG4 spécifique.

Chez les patients atteints d'un cancer de la vessie, l'unité de signalisation HER4 /NRG4 combinée peut être inhibition de la croissance et de la co-expression de HER4 ainsi NRG4 est fortement corrélée à une meilleure survie si les deux protéines agissent ensemble plutôt que séparément [28].

Nous avons également procédé à une analyse pour comparer l'expression de HER4 à la survie des patients. Nous avons fait observer une tendance à la forte expression de HER4 étant corrélée à une meilleure survie (résultats non montrés), cependant, en raison d'une limitation dans le nombre de patients inclus dans l'étude, ce résultat n'a pas été jugée significative et d'autres études devront pour élucider si une corrélation entre l'expression de HER4 et la survie peut être trouvé dans le cancer gastrique. Une corrélation entre le niveau des récepteurs de l'EGF à la présence de métastases ganglionnaires et l'invasivité tumorale expression a montré que HER2 corréler l'inverse de ces paramètres alors qu'aucune corrélation n'a été trouvé pour la famille EGF restante (résultats non montrés).

en conclusion, nos résultats suggèrent un nouveau rôle pour HER4 dans le cancer gastrique. Fait intéressant, nous avons trouvé deux HER4 et son ligand NRG4 spécifique à downregulated dans les tissus cancéreux. Ceci est accompagné par un potentiel accru de signalisation de l'EGFR par la régulation positive de tous ses ligands et une régulation positive de HER2.

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