PLoS One: Fas jelzés Elősegíti gyomorkarcinóma tastasis keresztül STAT3-függő felülszabályozása a Fascin

absztrakt katalógusa

Háttér katalógusa

Fas jelző-aktivált jelátviteli és aktivátorok transzkripció 3 (STAT3) szükséges fascin upreguláció. Mint egy aktin-kötegelésére fehérje, fascin közvetíthet gyomorrák (GC) sejtek migrációját.

Módszerek

Gyomorrák AGS sejteket kezeltünk anti-Fas (5 ug /ml) 2 órán át annak érdekében, hogy ösztönözze az aktiválás a Fas jelző. A in vitro katalógusa migrációját Fas jelző-aktivált AGS sejtek alkalmazásával vizsgáltuk Transwell kamrák. A szintek fascin és foszforilált STAT3 detektáltuk Western-blottal elemzések. Csupasz egereket intravénásán AGS kezelt sejtek anti-Fas vagy kezelt STAT3 inhibitor nélkül anti-Fas; tumor tüdő metasztázisok mértük. Fascin fehérje expresszió a tumor szövetekben kimutatható volt immunhisztokémiai. A Fas és fascin mRNS szintek a daganatos szöveteket a betegek GC mértük real-time PCR és azok viszonyát elemeztük.

Eredmények

Az aktiválás a Fas jelátviteli mozdítani a sejtmigrációt és eredményezett STAT3 függő fascin upreguláció AGS sejtekben. STAT3 fokozott fascin szint in vivo katalógusa. Fascin volt a közvetítő a Fas indukált jelátviteli AGS sejt migrációt in vitro katalógusa és in vivo katalógusa. Továbbá volt egy pozitív korreláció Fas és fascin mRNS szinteket daganatszöveteken GC betegeknél. Katalógusa

Következtetések katalógusa

Fas jelátviteli elősegíti GC áttét a STAT3 /fascin útvonal, amely előírhatja új cél a GC terápia.

bevezető hivatkozás: Yang Y, Zhao Q, Cai Z, Cheng G, Chen M, Wang J. et al. (2015) Fas-jelzés Elősegíti gyomorkarcinóma tastasis keresztül STAT3-függő felülszabályozása a fascin. PLoS ONE 10 (5): e0125132. doi: 10,1371 /journal.pone.0125132 katalógusa

Akadémiai Kiadó: Jin Q. Cheng, H.Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: január 6, 2015; Elfogadva: március 11, 2015; Megjelent: május 18, 2015 katalógusa

Copyright: © 2015 Yang et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra katalógusa

Az adatok elérhetősége: Minden lényeges adatot belül a papír. katalógusa

Forrás: Ezt a munkát támogatta a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína No. 81200014 a JLW (http://www.nsfc.gov.cn/); A Természettudományi Alapítvány Zhejiang tartomány számú LY14H160011 a YSY; Nem LY12C08002 a ZJC és No. LY12H13003 MC (http://www.zjnsf.gov.cn/). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a gyomorrák (GC) a negyedik leggyakoribb daganat a második vezető oka a rák összefüggő halálesetek világszerte. Mint a legtöbb rák, metasztázis a vezető oka a hiba a klinikai terápia a GC. Diagnosztizáltak korai szakaszában nélkül metasztázis, GC lehet irtani a műtét. Miután metasztázis történik, a prognózisa GC sokkal rosszabb. Azoknál a betegeknél, kiterjedt metasztázis, az eredmény a műtét kombinált kemoterápia és immunterápia messze nem optimális, és összesen 5 éves túlélési ráta mindössze 24% [1,2]. Ezért van sürgős szükség van egy jobb megértéséhez a mechanizmus a GC metasztázis annak érdekében, hogy egy jobb terápiás stratégia.

Fas jelátviteli útvonal egyik klasszikus mechanizmusok apoptózist indukál [3]. Ligálás után a természeti ligandum, FasL, Fas receptor alkotja a halál kiváltó jelátviteli komplexet, ami a kaszpáz-8, ami viszont aktiválja a downstream kaszpázok, ami az apoptózis [4]. Leírták, hogy a Fas-közvetített sejtpusztítást felelős a rákellenes funkciója Fas jelátviteli mechanizmus prosztatarák [5]. Azonban a legtöbb daganatok, ahelyett, apoptózist indukáló, Fas jelző aktiválás elősegíti a tumor progresszióját [6,7]. Tumorsejtek gyakran reagálnak a Fas stimuláció mértékű szaporodása [8,9]. Számos tanulmány azt is kimutatták, hogy a Fas jelátviteli elősegítheti a tumorsejtek migrációját és invázióját [10-12]. Egy nemrégiben készült tanulmány, magas Fas expresszió GC sejtekben kimutatták, hogy korrelál a előfordulása áttétek a regionális nyirokcsomók [13], ami arra utal, hogy a Fas-jelátvitel elősegíti a metasztázis gyomorrák.

fascin, egy aktin -bundling fehérje, már azonosították kulcsfontosságú molekula tumormetasztázisban [14]. Fascin fontos szerepet játszik a tumor sejtek migrációját és a kifejezés a fascin fokozott többféle rákos megbetegedések, beleértve a GC [15,16]. Fascin jelentése közvetlen STAT3 célgén válaszul az IL-6, mind egér és humán emlőrák sejtek [17]. Fas jelátviteli leírták, hogy részt vesz a aktiválását STAT3 [18-20]. Ezért azt feltételezzük, hogy a Fas jelzés segíti a GC-migráció és az azt követő tumormetasztázisban a STAT3 függő túlszabályzását fascin. Katalógusa

A jelen tanulmány célja az volt, hogy bizonyítsa a bevonása Fas szabályozásában fascin kifejezés révén STAT3 aktiváció AGS sejtekben. Megkíséreltük összekapcsolni a fokozott fascin szinten sejtmotilitással és metasztázis AGS sejtek in vivo katalógusa. Azt is elemezték az összefüggést a Fas és fascin mRNS szintek a daganatos szöveteket a betegek GC. Azt remélték, hogy a megállapítások válik egy új mechanizmust GC áttét, amely alapot a jövőbeli fejlődés Fas-alapú terápiás stratégia fejlett GC. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Az emberi szövetminták

az emberi GC szöveti mintákat gyűjtöttünk 23 beteg (14 áttétes és 9. nélkül metastasis) műtéten átesett kemoterápia előtt Zhejiang Cancer Hospital (Hangzhou, Kína) között 2012-ben és 2014-ben klinikai jellemzői a betegek GC 1. táblázat foglalja össze a tanulmány megfelelt az előírásoknak, a egészségügyi Minisztérium Kína és a World Health Organization Kutatásetikai felülvizsgálati bizottság nemzetközi iránymutatások járó kutatás az emberi alanyok és a Helsinki nyilatkozat Etikai alapelvek bevonó orvosi kutatás az emberi alanyokat. A vizsgálati protokollt felülvizsgálta és jóváhagyta az Institutional Review Board Zhejiang Cancer Kórház. Tájékoztatás után írásos beleegyezésüket adták az egyes betegek megelőzően vizsgálat megkezdése.

Reagensek

egér anti-humán-Fas (2R2) monoklonális antitestet vásárolt eBioscience (San Diego, CA, USA) . Egér anti-humán-Fas (CH11) monoklonális ellenanyag, és a STAT3 inhibitor S3I-201 cégtől vásároltuk Merck Millipore (Billerica, MA, USA). A nyúl anti-humán STAT3 (79D7) és anti-humán foszforilált STAT3 (D3A7) monoklonális antitesteket szereztünk be a Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Az egér anti-humán fascin (D-10) monoklonális antitest, humán fascin siRNS, STAT3 siRNS, a negatív kontroll siRNS (NC siRNS-t), és a STAT3-inhibitor, Stattic, vásároltunk a Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). A CCK8 sejtburjánzás kit vásárolt Dojindo Molecular Technologies (Kumamoto, Japán). Az Annexin V-FITC apoptózis detektáló kit a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). A Transwell kamrák (8-um pórusméretű) vásároltunk a Costar (Cambridge, MA, USA).

Állatok

Hat hetes csecsemőmirigy nélküli csupasz egereket szereztünk be a SIPPR-BK Kísérleti Animal Co. (Shanghai, Kína). Az egereket egy patogénmentes. A kísérleti protokollokat felül és hagyja jóvá az Animal Care and Use Committee Zhejiang Cancer Kórház. Katalógusa

sejtek és kultúra katalógusa

Az emberi GC sejtvonalak AGS és MNK-45 volt az American Type Culture Collection (Manassas, VA, amerikai Egyesült Államok) és karbantartani, 1640 táptalajban, amely 10% magzati borjúszérumot (FBS), 37 ° C-on, 5% CO _2.

Western blot analízis katalógusa

az összesen 20 ug nyers fehérje kivont sejtlizátumokban elválasztottuk 10% -os nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gél elektroforézis és átvisszük polivinilidén-difluorid membránokra (Millipore, Billerica, MA). A membránokat blokkoltuk 5% BSA-Tris-pufferolt sóoldat plusz 0,05% Tween-20, majd inkubáljuk megfelelő primer antitestekkel át 4 ° C-on egy éjszakán át. Mosás után Tris-pufferolt sóoldattal plusz 0,05% Tween-20, a membránokat megfelelő HRP-konjugált másodlagos antitestekkel. A fehérjéket tettük láthatóvá SuperSignal West Femto Maximum (Thermo, IL, USA).

kimutatása sejt apoptózis

AGS sejteket (2 × 10 ^{5 ng /ml) kezeltük 1 vagy 5 ug /ml anti-Fas monoklonális antitest (anti-Fas), vagy izotípusú antitest (ISO) 24 órán, az apoptotikus sejteket megfestettük Annexin V-FITC és propidium-jodid 5 percig 4 ° C-on sötétben, és ezután analizáltuk áramlási citometriával egy FACSCalibur áramlási citométerrel (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA).}

Cancer sejt migrációs assay in vitro Matton

AGS sejteket (1 × 10 ^{6 /ml) kezeltük 5 ug /ml anti-Fas vagy az ISO 2 órán át 37 ° C-on. Ezután 2 × 10 5 AGS tumorsejteket vittünk át 100 ul szérummentes tápközegben és szélesztettünk a felső kamrába a Transwell kamrák (8-um pórusméret). Az alsó kamra tele volt 800 ul 1640 táptalajban, amely 20% FBS-t. Miután egy 48-órás inkubálás 37 ° C-on a sejteket metanollal fixáltuk 20 percig, és PBS-sel mossuk háromszor, 20 perc minden. A rögzített sejteket megfestettük 10 mg /ml DAPI-on 30 percig, és PBS-sel mostuk. A megfestett sejteket alatt vizsgáltuk virágzás mikroszkóp. Hatásainak megállapítására a STAT3 a sejtek migrációját, 10 | iM Stattic adtunk a táptalajhoz. Annak meghatározására, a szerepe fascin a sejtmigráció, mielőtt az anti-Fas stimuláció, összesen 40 nM fascin siRNS duplexeket transzfektáljuk AGS sejteket (2 × 10 5 /lyuk) alkalmazásával 3 ul INTERFERin siRNS transzfekciós reagens ( Polyplus, NY, CA, USA) egy 24-lyukú lemezen. A hatékonyság fascin tranziens hangtompító igazoltuk Western blot.}

Cell proliferációs vizsgálati

AGS-sejteket kezeltünk 5 ug /ml anti-Fas vagy az ISO 24, 48, vagy 72 órán át, és 20 ul CCK8 adunk az egyes lyukakhoz, majd a sejteket további 4 órán át. A minden lyuk abszorbanciáját leolvassuk 450 nm-en. Sejtproliferációt kiszámítani az ODS a kezelt sejtek az ODS a kontroll sejtek.

Real-time PCR

Teljes RNS-t extraháltuk a TRIzol reagenst és cDNS-t szintetizáltunk egy PrimeScript RT reagens készlet (Takara Bio Inc. Otsu, Shiga, Japán). Az alábbi PCR-körülményeket alkalmaztuk: 1 ciklus 95 ° C-on 30 s, majd 40 ciklus 5 s 95 ° C-on és 34 s 60 ° C-on. Real-time PCR-t végeztünk egy Applied Biosystems 7500 valós idejű PCR-rendszer (Foster City, CA, USA). Az eredményeket normalizáltuk ellen β-aktin RNS-t. A szekvenciák PCR primereket alkalmaztuk a következők voltak: az értelemben, 5'-CCACGAAACTACCTTCAACTCC-3 'és az anti-sense, 5'-GTGATCTCCTTCTGCATCCTGT-3' a β-aktin; értelemben, 5'-GTGAGGGAAGCGGTTTACGA-3 'és az anti-sense, 5'-AGATGCCCAGCATGGTTGTT-3' Fas; értelemben, 5'-TGTCTGCCAATCAGGACGAG-3 'és az anti-sense, 5'-CACGCCACTCGATGTCAAAG-3' a fascin.

tüdőmetasztázis assay in vivo Matton

AGS sejtek ( 5 × 10 ^{6 egerenként) előkezelt anti-Fas vagy az ISO 2 órán injektáltunk 6 hetes csupasz egerekbe farki vénájukba. Hatásainak megállapítására STAT3 a tumor metasztázis és fascin kifejezés in vivo katalógusa, AGS tumorsejtek (5 × 10 6 per egér) intravénásan a 6 hetes nude egerekben és 24 órával később az egereknek intravénás injekció S3I-201 (5 mg /kg, minden 2. nap, összesen 3 alkalommal). Három héttel a sejtek befecskendezése után az egereket érzéstelenítjük belélegzése által klorál-hidráttal és feláldoztuk, és a tüdőket eltávolítottuk, és a számok a tüdő tumor gócok megszámoltuk egy boncoló mikroszkóp alatt.}

Immunhisztokémia

tumor gócok a tüdőből fixáltuk 10% -os formalin, etanollal dehidratáltuk, és paraffinba ágyaztuk. A szöveti metszeteket vágtunk, 4 jim, szerelt csúszdák és szárítjuk 60 ° C-on 4 órán át. Következő rövid proteolitikus emésztés és egy peroxidáz blokk a szöveti tárgylemezek használatával 2,5% hidrogén-peroxiddal metanolban 30 percig szobahőmérsékleten, a lemezeket inkubáltuk anti-fascin antitest egy éjszakán át 4 ° C hőmérsékleten. Mosás után a lemezeket inkubáltuk peroxidázzal jelölt polimer és a szubsztrát kromogén. Végül a mintákat inkubáltuk foszfáttal pufferolt sóoldatban, amely diamino-benzidin 5 percig. Olympus mikroszkóp alkalmaztunk, hogy szemléltesse a festés a tumor szövetekben.

Statisztikai analízis

Eredmények segítségével hasonlítottuk össze egyirányú ANOVA. A Spearman rangsor korrelációs tesztet alkalmaztunk, hogy vizsgálja meg korrelációt a szintek Fas és fascin mRNS daganatszöveteken GC betegeknél. A p érték < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Katalógusa

Eredmények katalógusa

aktiválása Fas jelátviteli elősegíti a migráció AGS sejtek katalógusa

Először is megerősítette a kifejezés Fas receptor AGS és MNK-45 sejtek real-time PCR és Western blot analízis, és megállapította, MNK-45 sejtek kifejezett magasabb Fas receptor, mint AGS sejtek tette (1A ábra). Mindkét sejtvonal is kimutatta, a magas szintű FasL expresszió (az adatokat nem mutatjuk be). A következőkben azt vizsgálta, hogy a elkötése Fas receptor is apoptózist indukálni AGS és MNK-45 sejtekben. Miután stimulálás anti-Fas vagy az ISO koncentrációban 1 ng /ml vagy 5 ug /ml, ez volt MNK-45, de nem AGS sejtek mutattak koncentráció-függő fokozását apoptózis (1B ábra). Ezért megvizsgáltuk, hogy az aktiválás a Fas jelátviteli okozhat más hatása AGS sejtek helyett apoptózis indukció a következő kísérletekben. Az AGS sejt migrációs vizsgálattal végeztük in vitro
és azt találtuk, a migráció a AGS sejtek szignifikánsan megnövekedett stimuláció után 5 ng /ml anti-Fas (ábra 1C). Hogy kizárja annak lehetőségét, hogy a megnövekedett migráció AGS sejtek okozta felemelt elterjedése után anti-Fas stimuláció megvizsgáltuk elterjedése ACS sejtek és nem talált nyilvánvaló különbség kezelt sejtek vagy anélkül anti-Fas (1d), ami arra utal, hogy a a növekedés a sejtek migrációját nem volt eredményeként a proliferatív tulajdonságai után anti-Fas stimulációt. Összefoglalva, ezek az eredmények azt jelzik, hogy a Fas-jelátvitel növelheti a motilitását GC sejtek in vitro
.

aktiválása Fas jelátviteli serkentett fascin expresszió AGS sejtek aktiválása révén STAT3

leírták, hogy a Fas-jelátvitel részt vesz az aktiválási STAT3 [18-20]. A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy aktiválását Fas jelátviteli okozna STAT3 aktiváció AGS sejtekben. Amint azt a 2A ábra, stimulálás után anti-Fas egy rövid ideig, a foszforilált STAT3 szignifikánsan fokozódott AGS sejtekben. Azt is leírták, hogy az fascin növelheti a motilitást a tumorsejtek és a közvetlen célgént a STAT3 [17]. Így észlelt expresszióját fascin AGS sejteket stimulálás után anti-Fas. Amint azt a 2B ábra az mRNS-szinteket fascin emelkedett volt egy időfüggő módon és tetőzött 12 óra elteltével anti-Fas stimulációt AGS sejtekben. Ahhoz, hogy tovább erősítse a túlszabályzását fascin, kimutattuk a fehérje szintje fascin és elterjedten fascin protein szintjét anti-Fas de nem ISO kezelt AGS sejtek (2C ábra). Annak igazolására, a kapcsolat a STAT3 és fascin AGS sejtekben után Fas aktiválás jelzéshez, kezeltünk AGS sejteket Stattic, egy specifikus inhibitora STAT3, mielőtt az anti-Fas stimuláció és megállapította, hogy az anti-Fas-indukált növekedést fascin fehérjét teljesen megszüntették jelenlétében Stattic (ábra 2D). Azt is érzékeli a aktiválását STAT3 AGS sejtekben után anti-Fas stimuláció 24 h, de az aktivált mértékben valamivel alacsonyabb volt, mint a kapott 2H anti-Fas stimuláció (2C ábra és 2D). Ahhoz, hogy tovább erősítse meg, hogy STAT3 részt szabályozásában fascin kifejezés után anti-Fas stimuláció, mi leütötte a STAT3 kifejezés használatával STAT3 specifikus siRNS előtt anti-Fas stimuláció és észlelte a STAT3-kiütés hatékonyságát Western blot analízissel. Ábrán látható 2E, STAT3 siRNS de nem NC siRNS transzfekció jelentősen gátolta a STAT3 expressziójának AGS sejtekben. Várhatóan a fascin fehérje nem indukálódik STAT3-knockdown AGS után a sejtek anti-fascin stimuláció (ábra 2F). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az aktivált STAT3 szükséges a túlszabályzását fascin kifejezés okozta Fas aktiválás jelzéshez AGS sejtekben. Katalógusa

Fas jelátviteli előléptetett sejtmigráció függ STAT3 /fascin útvonal katalógusa

Ez már kimutatták, hogy a fascin közvetíti a tumorsejtek migrációját [17]. A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy kiütése fascin gátolná Fas jelző által kiváltott sejtmigráció in vitro katalógusa. Azt találtuk, hogy csökkent a fascin protein volt kimutatható AGS transzfektált sejtekben fascin siRNS, de nem az NC-siRNS (3A ábra). Akkor végeztünk a tumorsejtek migrációját vizsgálatok észlelni motilitás fascin-knockdown AGS után a sejtek anti-Fas stimuláció. Ábrán látható a 3B, amikor az anti-Fas stimuláció jelentősen elősegítette a migrációját AGS sejtek, ez a hatás nyilvánvalóan gátolta-val kezelt sejtekben fascin siRNS, de nem NC siRNS. Mivel STAT3 szükséges a Fas jelző-indukált fascin expressziót AGS sejtekben, azt a következő elemeztük hatását STAT3 a Fas jelző-mediált sejtmigráció in AGS sejtekben. Amint azt a 3C, miután kezelt Stattic, Fas jelátviteli fokozott sejt migráció volt teljesen megszüntette. Összhangban ezzel az eredménnyel, STAT3 siRNS is szignifikánsan gátolta Fas jelátviteli javított AGS sejt migrációt (ábra 3D). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a Fas jelátviteli támogatott-migráció és ez függ a aktiválása STAT3 /fascin útvonal. Katalógusa

Fas jelátviteli elősegíti a sejtek metasztázis in vivo aktiválásával STAT3 /fascin útvonal katalógusa

további bizonyítására a közötti kapcsolat Fas jelátviteli és GC metasztázis, akkor át anti-Fas-stimulált AGS sejteket intravénásán csupasz egerekbe, és kimutatható a tumor gócok a tüdőben. Találtunk növekedését tumor gócok egerek tüdejében átruházott sejtekkel előkezeljük anti-Fas, de nem az ISO (ábra 4A). Hogy tisztázza a viszonyát fascin és Fas-mediált jelátviteli tumor metasztázis végeztünk immunhisztokémiai kimutatása fascin a tumoros szövetben. Megfigyeltük magasabb fascin kifejezés a daganatos szöveteket kapó egerek anti-Fas-stimulált sejtek AGS, mint amelyet a kezelt egerekben ISO vagy un-stimulált AGS sejtek (4.b ábra). Mivel STAT3 szükséges a Fas-antigén elleni indukált túlszabályzását fascin és fokozott mozgékonysági AGS sejtekben megvizsgáltuk a hatását STAT3 az AGS-metasztázis in vivo katalógusa. Kezelés után S3I-201, egy kémiai szonda inhibitor STAT3 aktivitás [21], a tumor gócok a tüdőben szignifikánsan csökkent (ábra 4C). Ezen túlmenően, fascin expresszió a tumor szövetek S3I-201 kezelt egerekben szintén gátolta (ábra 4d), ami arra utal ellenőrzése fascin által STAT3 in vivo katalógusa. Összefoglalva, ezek az eredmények azt jelzik, hogy a Fas jelátviteli elősegítheti sejt metasztázis in vivo katalógusa, függ a aktiválása STAT3 /fascin útvonal.

fascin expresszió korrelációban Fas expresszió a tumor szövetek betegek GC katalógusa

Mivel Fas jelátviteli elősegíti fascin kifejezés, mi határozza meg, van-e összefüggés a Fas és fascin kifejezést a tumor szöveteket a GC betegeknél. Elemeztük a mRNS szintje Fas és fascin a tumor szöveteket a GC betegeknél. Amint az 5. ábrán látható, az mRNS szinteket a Fas és fascin pozitív korrelációt mutatott. Ez az eredmény bizonyítja az a gondolat, hogy a Fas jelátviteli elősegíti fascin kifejezést GC. Katalógusa

Vita katalógusa

Általában a következő trimerizációs Fas elkötés után a FasL, apoptózist indít el. Fas klaszter toboroz a FADD adapter protein, és alkotja a halál-indukáló jeltovábbítási komplex, így a kaszpáz-8. Kaszpáz-8, viszont aktiválja a downstream kaszpázok, például kaszpáz-3, amelynek végén az apoptózist [4]. Amellett, hogy sejthalált kiváltó, Fas is közvetíti proliferációját és aktiváló jelek a tumorsejtekben [22]. Leírták, hogy a Fas-közvetítő astric nyálkahártya sejtburjánzás ERK függ [23], de aktiválása ERK jelátviteli útvonal nem indukálja a proliferációját B16 egér melanóma sejteket [24]. Ezért Fas indukálhatja elterjedése néhány, de nem minden a tumorsejtek és a vonatkozó mechanizmus még mindig nagyrészt ismeretlen. Itt, azt találtuk, Fas érvénytelen kiváltásában AGS sejtburjánzást. Fas jelátviteli Kimutatták azt is indukál motilitását apoptózis-rezisztens tumorsejtek keresztül urokináz plazminogén aktivátor [10]. A jelen tanulmányban unravelled egy új mechanizmust a Fas-közvetítő tumorsejt mozgékonyságát, ami függ a túlszabályzását fascin aktiválásán keresztül STAT3.

Általában úgy vélik, hogy, hogy elkerülje az apoptózis által okozott FasL-pozitív T sejtek, tumorsejtek kifejlesztett számos módon, hogy ellenálljon a FasL által indukált sejtpusztulás hatásokat. Tumor sejtek kimutatták, hogy downregulate vagy akár veszít Fas receptor expressziós [25] vagy megszünteti az intracelluláris Fas jelátviteli keresztül mutáció Fas [26]. A tumor sejtek is upregulate celluláris FADD-szerű IL-1β-konvertáló enzim-gátló fehérjét vagy foszforilálni kaszpáz-8, hogy gátolja a kaszpáz-8, és blokkolja a down-stream jelátviteli útvonal Fas [27,28]. A jelen vizsgálatban azt találtuk, az aktiválás a STAT3 AGS sejtekben után anti-Fas stimulációt. Az aktiválás a STAT3 kimutatták, hogy megvédje a rákos sejtek apoptotikus stimulusokra származó Fas receptor [29]. Előkezelése STAT3 inhibitor nem kezdeményez AGS sejt apoptózis után Fas jelzési aktiválását (adatokat nem mutatjuk), ami arra utal, hogy az aktiválási a STAT3 nem vesz részt a megelőzésében AGS sejtek Fas-indukált apoptózis.

Ez már számolt be, hogy Lewis-féle tüdőkarcinóma-sejteket konstitutívan rezisztensek a Fas-közvetített apoptózisra, de a overexpressziója Fas ezeken a sejteken lehetővé teszi a Fas-közvetített apoptózisra után térhálósító agonista anti-Fas antitest [30], ami arra utal, hogy van egy minőségi különbség az aktivált jelátviteli sejtek kap, amely meghatározza a sorsát, miután Fas jelző lekötés. A szint Fas expresszió mérsékelt AGS sejtekben és stimuláltunk magas dózisú anti-Fas (20 ng /ml); úgy találtuk, hogy az AGS sejtek mutattak kissé fokozott apoptózist (adatokat nem mutatjuk). Ez azt jelzi, hogy az apoptózis indukció és migrációs promóciós jelátvitel egyaránt aktiválható után Fas receptor ligálás, ami összefüggésben lehet a szintje anti-Fas használt ilyen kísérletek. Ha magas a Fas-szignalizációs szállítás nem lehet elérni fiziológiás körülmények között, a migráció promóciós jelzés veszi át, miután a Fas receptor ligálás és okoz fokozott GC metasztázist.

megvalósításához távoli metasztázis, erőteljes motilitás szükséges a tumorsejtek . Fascin, mint egy aktin-kötegelésére fehérje, fontos a karbantartási és stabilitási fonalas aktin kötegek, és ezért részt vesz a sejtmozgás [31]. A jelen tanulmányban azt mutatta, hogy a Fas jelátvitel részt vett a túlszabályzását fascin kifejezés. IL-6 tűnik upregulate fascin expressziójának GC-sejtek [32]. A Fas jelátviteli Kimutatták azt is, hogy támogassák az IL-6 szekréciót a tumorsejtekben [33]. Ezek a bizonyítékok azt jelzik, hogy a Fas jelátviteli valószínűleg felerősíti a hatását fascin upreguláció keresztül IL-6. Azt továbbá kimutatta, hogy a Fas és fascin kifejezések szorosan kapcsolódó GC betegeknél, erősítve a fontosságát, Fas-fascin tengely a folyamat a GC metasztázist.

összhangban van a korábbi tanulmányok azt igazolták, hogy a Fas-indukálta aktiválásának STAT3 volt szükség a termelés serkentése fascin. A csupasz egér tüdő metasztázis modell, a STAT3-inhibitor, S3I-201, gátolhatják a fascin expresszió a tumor szövetekben. Egér eredetű rekombináns FasL nem volt képes aktiválni a STAT3-aktiválást (az adatokat nem mutatjuk), ami arra utal, hogy az aktivált jelzés által kezdeményezett FasL on AGS sejtek saját elegendő ahhoz, hogy közvetítsen STAT3 aktiváció és a downstream fascin upreguláció. Szabályozása mellett fascin kifejezés, STAT3 is részt vesz a sejtproliferáció és túlélés, onkogenezis, és a rák metasztázis GC [34-36]. Egy orálisan hasznosuló kis molekulájú STAT3 inhibitor fedeztek fel, és lehet egy potenciális terápiás ágens az emberi rák [37]. Úgy gondoljuk, hogy a STAT3 inhibitor egy ígéretes szer, amely felhasználható a klinikai GC terápia a közeljövőben.

Összefoglalva, azt mutatják, hogy a Fas jelátvitel részt vesz a GC metasztázis keresztül STAT3-függő túlszabályzását fascin. Eredményeink azt sugallják, a Fas /STAT3 /fascin út lehet egy molekuláris célpontja GC kezelés. Katalógusa

Köszönetnyilvánítás katalógusa

értékelik Dr. Hua Wang biztosító cDNS kivont daganatszöveteken GC betegek . Azt is nagyra értékelik a szerkesztő Medjaden módosítására a kézirat. Katalógusa

• PLoS One: egészségviselkedésekre koreai gyomorkarcinóma Túlélők hypertonia: A Hajlandóság elemzése KNHANES III-V (2005-2012)
• PLoS One: ATOH1 képes szabályozni a tumorképző gyomorrák sejtek indukálva differenciálása Cancer Stem Cells