MiRNAs wichteg Roll an tumorigenesis Leeschtung. Dës Etude do Effekter a Regulatioun Mechanismus vun miRNA-137 op der biologescher Verhaalen vun gastric Kriibs op lassleeën. Total RNS war vun Stoffer vun 100 Patienten mat gastric Kriibs a vu véier gastric Kriibs Zell Linnen ofgebaut. Ausdrock vun Mir-137 war vun real-Zäit Hinnen alleguer aus 100 Patienten fonnt. D'Auswierkunge vun Mir-137 overexpression op gastric Kriibs Zellen 'Prolifératioun, apoptosis, Migratioun an Invasioun Fähegkeet sech an eng kënschtlech an VIVO propagéieren. D'Zil Gentherapie vum Mir-137 war vun Targetscan op Linn Software virausgesot, duerch duebel luciferase reporter Gentherapie assay opgefouert an déi westlech blot bewisen. Als Resultat, reduzéiert den Ausdrock vun Mir-137 huet bedeitend an gastric Kriibs Zell Linn HGC-27, HGC-803, SGC-7901 an MKN-45 souwéi am Verglach gastric Kriibs Stoffer mat GES-1 Zell oder bascht Net reagéiert -neoplastic Stoffer ( p VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Déi nei-Aféierung vum Mir-137 an gastric Kriibs Zellen gebass Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun zu inhibit. D'zu VIVO Experimenter bewisen, dass de Bord-137 overexpression der gastric Kriibs Zell Prolifératioun an Metastasen reduzéiere kënnen. Bioinformatic a westlech blot Analyse uginn, datt de Bord-137 als entholl suppressor Rollen op gastric Kriibs Zellen protokolléiert AKT2 duerch gezielt a weider d'Bad an GSK-3β betrëfft. Zu der Konklusioun, déi Mir-137, déi dacks verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs as potenziell zu gastric Kriibs tumorigenesis an Metastasen vun Regulatioun AKT2 Zesummenhang Signal Weeër Équipe ass VerfÜgung Fro:. Wu L, Chen J, Xing C, Wei S, Zhu Y, Yang W, et al. (2015) MicroRNA-137 dréit zu Dampened Tumorigenesis zu Mënscherechter Gastric Cancer vun AKT2 gezielt. PLoS NËMMEN 10 (6): e0130124. Doi: 10.1371 /journal.pone.0130124 VerfÜgung Akademesch Redakter: Irina V. Lebedeva, Columbia University, USA VerfÜgung Arnaque: 15 August 2014; Akzeptéiert: 18 Mee, 2015; Publizéiert: 23. Juni 2015 VerfÜgung Copyright: © 2015 Wu et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung Data Disponibilitéit: All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung Funding:.. Dës Aarbecht vun Medical Wëssenschaft an Technologie Fuerschung Projeten vun Henan Provënz, China (2011030004) VerfÜgung Wettsträit Interessen ënnerstëtzt war: d'Auteuren deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren. VerfÜgung Gastric Kriibs (GC) ass vum Kriibs an der Welt déi zweet heefeg Doudesursaach [1]. Sou wäit, ass de Mechanismus vun gastric carcinogenesis schiddene onbekannt. D'Fuerscher hunn probéiert GC aus der Vue vun Biochimie a molekulare Biologie studéieren, datt e puer entholl suppressor Genen an entholl-Zesummenhang Genen hunn am GC gemellt ginn. MicroRNAs (miRNAs) sinn endogenously kleng Net-coding RNAs vun 18 ~ 22 nucleotides datt den posttranscriptional Reglementatioun vun der Gentherapie Ausdrock identifizéiert ginn [2, 3]. MiRNAs Leeschtung kritescher Rollen an vill biologesch Prozesser wéi Prolifératioun, Entwécklung, dat, an apoptosis. Mëttlerweil, goufen miRNAs als oncogenes oder entholl suppressor Genen während tumorigenesis ze handelen validéiert. Zum Beispill, gouf Mir-31 als oncogene zu esophageal squamous Zell carcinoma [4] an Mir-451 Funktiounen als entholl suppressor zu Mënsch Net-kleng Zell haett Kriibs [5] identifizéiert. Et sinn och vill microRNAs goufen am Zesummenhang mat gastric Kriibs identifizéiert Virféierung an Entwécklung [6-13]. Et ass och, datt d'Regioun-Ausdrock vun Mir-1, Mir-20a, Mir-27a, Mir-34a an Mir-423-5p gemellt gi kann als diagnostic Critèrë vun gastric Kriibs benotzt ginn [14] .Therefore, miRNAs sinn Potential Kandidate vun Roman diagnostic biomarkers oder therapeutesch Ziler vun gastric Kriibs. VerfÜgung MicroRNA-137 (Mir-137) gemellt gouf Rollen als entholl suppressor gin verwandelt-reglementéiert an Leeschtung vun colorectal Kriibs a mëndlech Kriibs [15, 16]. Allerdéngs sinn d'Funktioun vum Mir-137 a sengem Mechanismus Basisdaten gastric carcinogenesis nach net ganz kloer. Chen et al verroden, datt de Bord-137 kann spillt als entholl suppressor vun CDC42 gezielt Zell Zyklus vun gastric Kriibs [17] ze regléieren. Och sou, ass et kloer fir eis, datt d'microRNA biologescher Verhaalen vun Multiple Wee Wee reguléieren, datt et méi Regulatioun Mechanismus vum Mir-137 Richtung GC tumorigenesis ginn hätt. An dëser Etude, gemooss mir den Ausdrock vun Mir-137 an 100 Patienten mat gastric Kriibs a propagéieren de Rollen vun Mir-137 zu gastric Kriibs Zellen. Mir hunn e puer aner Funktiounen vum Mir-137 am GC souwéi anere Wee Wee vun deem Mir-137 Roll vun entholl suppressor am GC tumorigenesis gespillt. VerfÜgung IFLA- Ausso All Mënsch Studie goufen duerch de passenden Ethik Comité ofgeseent an hun also am Aklang mat der ethesch Normen opgeféiert ginn. All Persounen hirt Awëllegung virun hirem Abezéiung vun der Etude. VerfÜgung kennen an uplanzen VerfÜgung Mënscherechter gastric Kriibs Echantillon vun chirurgesch uplanzen vu 100 Patienten gesammelt goufen (männlech 56, weiblech 44) mam GC am Cancer Institut an Klinik, éischt Spidol vun Henan Universitéit gehéiert; Zweete Spidol vun der Liberatioun Army of China d'Leit; Hebei Cancer Spidol. Non-entholl Echantillon vun der macroscopic entholl Spillraum huet bei der selwechter Zäit an benotzt den reagéiert bascht Net-neoplastic Stoffer isoléiert. All Echantillon waren an zwee Deeler opgedeelt. Ray Echantillon waren direkt an flëssegem Stéckstoff virgezunnen gefruer gesammelt, an bei -80 ° C bis RNS Extraktioun gespäichert. D'Benotzung vun der Otemschwieregkeeten Echantillon fir all Experiment war déi ethesch Verwaltungsrot vum Institut vun Grondakommes Medical Sciences, Chinese Academy vun Medical Sciences guttgeheescht. All Participant gëtt hir richteg informéiert Zoustëmmung zu dëser Etude, an hir richteg informéiert Autorisatioune goufen opgeschriwwe fir matzemaachen. Dëst onsent Prozess huet och vun der Ethik Comité ofgeseent. Véier gastric Kriibs Zell Linnen (HGC-27, SGC-7901, SGC-7901 an MKN-45) huet sech all an eiser Labo festhält an haten an DMEM oder 1640 mat 10% FBS. VerfÜgung RNS erauszéien, cDNA Synthes , an real-Zäit Hinnen alleguer assays VerfÜgung total RNS aus Stoffer an Zellen war vun Trizol Method (Ambion, USA) komplett folgenden d'Instruktioune ofgebaut. mat 2 μg vun insgesamt RNS als Skelett Single staarkt cDNA war vun M-MLV (Ambion, USA) Wierderbuch. Oligo (DT) 18 war fir mRNA ëmgedréint Transkriptiouns benotzt während Desaccord verantwortlech fir miRNA benotzt. Echtzäit-Hinnen alleguer (RT-Hinnen alleguer) war zur Bio-rad CFX96 (Bio-rad, USA) benotzt SYBR Mëschung (Tiangen, China) gesuergt. D'Hinnen alleguer Zoustand war: 95 ° C × 30s, gefollegt vun 40 Zykle vun 95 ° C × 5s, 60 ° C × 34s. Fir mRNAs, war GAPDH als normalized Kontroll benotzt. Fir miRNAs, war U6 snRNA fir miRNA Kontroll benotzt. Der relativer Ausdrock vu Mir-137 war vun 2-ΔΔCT Method berechnen. Primer Message sinn an Table dës 1. VerfÜgung Plasmid Konstruktioun VerfÜgung der Mir-137 Virleefer Haaptrei entsteet duerch annealing an Mir-137-Bocuse-F an Mir-137-Bocuse-R Extensioun Tëschenzäit gouf verdaut vun BamHI an BglII, d'Produite vun deem Text an der BamHI-BglII Brochstéck vun der pcDNA-GW /EmGFP-Mir Vecteure (GenePharma, China) war. An der Tëschenzäit war negativ Kontroll och gebaut. VerfÜgung Zell Kultur an miRNA transfection VerfÜgung D'Zell Linnen HGC-27, SGC-7901 MKN-45 an GES-1 war vun der Zell Ressourcen kaaft Zentrum vum Institut vun Grondakommes Medical Sciences, Chinese Academy vun Medical Sciences a Korea Unioun Medical College (Peking, China). De Mënsch gastric Zell Linnen HGC-27, SGC-7901 an MKN-45 waren cultured zu RPMI 1640 (Gibco, BRL, UK) Medien mat 10% An et Bovine serum ergänzt a mënschlech gastric epithelium Zell Linn GES-1 zu DMEM haten war ( Gibco, BRL, UK) Medien. De Mir-137 rescht an de Match rescht déi zu der mënschlecher Nepgen Net-homologous ass sech duerch GenePharma (Shanghai, China) Wierderbuch an zu enger definitiver oligonucleotide Konzentratioun vun 10nmol /L an den Zellen transfected. All Zell transfections sech duerch DharmaFECT1 Reagent (Dharmacon, Suerge, USA) agefouert no der benotzt Uweisungen d'Hiersteller. Fir all Zell transfection zwee oder dräi Gedächtnis Experiment gesuergt. VerfÜgung Zell Prolifératioun an apoptosis assay VerfÜgung Zell Prolifératioun assay vun CCK8 Method (DOJINDO, Japan) gesuergt huet. Kuerz, respektiv an 96-gutt rakommen goufen der 5000 Mir-137 rescht transfected Zellen an Alaister Zellen Telleren an cultured. Prolifération Tariffer sech op 0 alles, 12, 24, 48, 72, 96 Stonnen no transfection vun 10μl CCK8 Régent Schan an no der Manuskripter getest. D'apoptosis assays sech zu HGC-27 an SGC-7901 Zellen Linnen mat oder ouni Mir-137 overexpression vun Apoptosis Detektioun Kit ech (BD Biosciences, USA) an C6 Flow Cytometer (USA) getest. VerfÜgung Zell Wanderung an Invasioun assays VerfÜgung Mir standing de Meter-verkënnegt assay Zell Migratioun Fähegkeet mat oder ouni Mir-137 transfection ze testen. D'kënschtlech Wonnen waren op der Spuenien wär Zell monolayer mat FBS fräi Produktioun, eng 200 μL Pipette Tipp mat op 24 Stonnen Mir-137 transfection Post. D'Biller ware respektiv bei 0 geholl, 12, 24 an 36 Stonnen no Meter Kreatioun. VerfÜgung Mir standing dann transwell assays Zellen "Invasioun Fähegkeet ze diskutéieren. 5 × 10 Déieren Experimenter VerfÜgung D'Experimenter Déieren sensibiliséieren sech fir d'Fleeg an Uwendung vun schafft Déieren an d'institutionell ethesch Normen fir Déier Experimenter laut dem Guide gesuergt. De Protokoll ass duerch de Comité op d'Ethik vun Déieren Experimenter vun der Cams (Chinese Academy vun Medical Sciences) (: C72-14-0664 hänkt Number) abruecht. All Agrëff war ënner Natrium pentobarbital Anästhesie gesuergt, an all Efforten gemaach goufen Leed ze minimiséieren. Silessia-transfected an Mir-137 overexpression HGC-27 Zellen (5 × 10 Immunohistochemistry VerfÜgung Stoffer sech an paraffin Rubriken Ënnerbewosstsinn a behandelt 2 Stonnen bei 65 ° C an dann deparaffinised. Virum Opdroen Iwwernuechtung der Primärschoul antibodies bei 4 ° C, duerchgefouert mir de antigen retrieval Schrëtt eraus. (:; Zhongshanjinqiao, China 100 1) Duerno, sech drënner mat Première antibody ronn 2 Stonnen bei 25 ° C conjugated zu HRP incubated. D'Liquid botzt + Realitéiten (zsgb-Bio, China) war fir d'Detektioun vun der Aktivitéit HRP benotzt. VerfÜgung Luciferase miRNA Zil- reporter assay VerfÜgung der voller Längt vun der 3'UTRs vum Mënsch AKT2 mRNAs sech all Hinnen alleguer Implikatioune verstärkt an an der pMIR-REPORTTM Luciferase Reporter Vecteure (Ambion, USA) gekloonten der gemellt ze generéieren. Projet'en vun der virausgesot Som Regiounen an der mRNA Message goufen ugeluecht primers mat abegraff d'mutated Siten. HEK-293T Zell sech op 24-Meter Placke rakommen (1 × 10 Western blotting VerfÜgung Proteinen op 10% getrennt goufen SDS-PAGE an duerno bis 0,45 μm PVDF Schläimhait (Amersham, UK) transferéiert. D'Schläimhait sech mat 5% Nët-Fett gedréchent Mëllech Nuecht op 4 ° C an mat Anti-AKT2 monoclonal antibody (Proteintech, USA) op 1 incubated: 1000 dilution; Anti-Bad monoclonal antibody (Bioworld, USA) op 1: 500 dilution; Anti-GSK-3B polyclonal antibody (Bioworld, USA) op 1: 1000 dilution; Anti-GAPDH antibody (Proteintech, Chicago, USA) op 1: 30.000 dilution. Nom Wäschen zweemol mat TBST, goufen incubated d'Schläimhait mat Geess anti-Kanéngchen antibody (zsgb-Bio, China) op 1: 5000 an 1:. 50000 dilutions fir 2 h VerfÜgung Statistics VerfÜgung All Experimenter huet op d'mannst dräi Mol widderholl. t Test d'Student (two-tailed) an der x Mir-137 ass erof-reglementéiert gastric Kriibs Zellen a Krankheete Echantillon VerfÜgung Mir iwwerpréift éischt den Ausdrock vun alen Mir -137 zu 4 Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen (HGC-27, SGC-7901, SGC-7901 an MKN-45) an gastric epithelial Zell (GES-1). Dës GC Zell Linnen extrem niddreg Ausdrock vu Mir-137 Schatzkummer Verglach zu de GES-1 Zell Linn (Lalumi 1A). Fir weider d'Relatioun vun Mir-137 mat GC Optriede studéieren, nogewise mir den Ausdrock vun Mir-137 an 100 Medeziner Patienten (männlech 56, weiblech 44; mengen Alter 53 Joer) vun Taqman Studiebäihëllefe-drived Hinnen alleguer real-Zäit wéi uewen beschriwwen. Aus 100 GC Echantillonen, war den Ausdrock vun Mir-137 zu 77 Fäll-verwandelt reegelen (77%) am Verglach mat bascht Stoffer wann d'frecken war wéi 1,5 ageriicht. Mëttlerweil, gouf Mir-137 zu 23 Fäll an-reegelen (23%) (Lalumi 1B an 1c). Am Allgemengen, war den Ausdrock vun Mir-137 am GC Stoffer niddreg wéi déi vun bascht Stoffer an statistesch Differenze (p = 0,00079, vläit T-Test, zwee-tailed, Lalumi 1c). Och, hu mir eng statistesch relevant association tëscht dem Wëllen vum Mir-137 an gastric Kriibs Medeziner Etapp fonnt. Déi Patienten déi de nidderegen Niveaue vun Mir-137 Ausdrock hu sech mat héijer-Schouljoer an spéiden-Etapp erhéijen (Lalumi 1D) assoziéiert. Dës Resultater uginn, datt hire Restaurant vum Mir-137 zu gastric Kriibs Werdegang Équipe ginn hätt. VerfÜgung Mir-137 Zell Prolifératioun kënschtlech bremst an VIVO VerfÜgung Mir transfected Mir-137 rescht an GC Zell Linnen HGC-27 an SGC-7901, souwuel vun deenen groussen transfection Effizienz (Lalumi 2A) gewisen. D'Resultater vun CCK8 Wuesstem assays op 0, 1, 2, 3 a 4 d der Mir-137 an Alaister transfection sinn zu Lalumi 2B gewisen. Verglach mat Alaister transfection, Mir-137 transfection reduzéiert bedeitend d'Prolifératioun vu béiden Zell Linnen (Lalumi 2B). Dunn propagéieren mir den Effet vum Mir-137 op Zell apoptosis. Déi fréi apoptotic Zellen am Match war group huet ongeféier 10% vun HGC-27 an 2,9% vun SGC-7901 hierkommen der Mir-137 transfection, de Prozentsaz vun fréi apoptotic Zellen zu 17,5% vun HGC-27 grouss war an 8.3% an SGC-7901, déi wesentlech Differenz (Lalumi 2C) gewisen. Vun dëse Resultater, kann et ofgeschloss ginn, datt Mir-137 vun Pinguin fréi apoptosis haett Kriibs Zell Iwwerliewe oofgesinn hätt. VerfÜgung weider Fir d'Conclusiounen virun z'iwwerpréiwen, eng vun VIVO Modell gebaut gouf. Mir hu fonnt, dass de Wuesstem entholl war wiesentlech méi lues an der Mir-137 overexpression Mais wéi an der Kontrollen (Lalumi 2D, 2E an 2G). Am Accord mat der Linn entholl Wuesstem, d'Gewiichter vum Match Zellen entschlof erhéijen sech vill méi héich wéi déi vun der Raumstatioun-137 overexpression (Lalumi 2F). Dës Resultater bestätegt weider, datt d'Mir-137 overexpression der gastric Kriibs Zell Verbreedung zu VIVO Limite kéint. VerfÜgung Mir-137 Zell Wanderung an Invasioun kënschtlech bremst an VIVO VerfÜgung Mir évaluéieren weider d'Auswierkunge vum Mir-137 op Zell Wanderung an Invasioun, déi de Schlëssel determinants vun malignant Werdegang an Metastasen. D'Auswierkunge vun Mir-137 op Zell Migratioun sech vun engem Meter verkënnegt /Null assay zu HGC-27 an SGC-7901 Zellen bewisen. Souwuel vun zwee Zell Linnen behandelt mat Mir-137 rescht waren distinctively manner Opbau wéi Alaister Kontroll oder onbehandelt Zellen op 12, 24, an 36 Stonnen an der Schëtter (Lalumi 3A). Doriwwer eraus, hunn mir Zell Invasioun assay der Direktional Invasioun Fähegkeeten vun den Zellen an der Mir-137 overexpression ze moossen. Als Resultat, war d'invasiveness vun Zellen transfected mat Mir-137 rescht ofgeholl Trainer mat der Alaister Zellen zu HGC-27 Verglach an SGC-7901 (Lalumi 3B). Dunn, sech an VIVO Experimenter agestallt fir weider dësem Resultat z'iwwerpréiwen. Mir bewisen, éischtens, datt mat Mir-137 rescht oder rescht Kontroll transfected Zellen net e groussen Verloscht am Zell Nuetsvolen Verglach zu onbehandelt Zellen show gemaach. Och, et ass keen Ënnerscheed zu Zell Nuetsvolen tëscht der mat Mir-137 transfected Zellen rescht Verglach zu negativ Kontroll (S2 Lalumi). Als zu Lalumi 3C gewisen, huet d'bioluminescent Imaging vu Mais an d'Mir-137 overexpression Grupp eng méi kleng Bild. Och, duerch d'Zuel vun haett Metastasen pro Mais an Mir-137 Grupp e wesentlech méi Niveau Verglach zu Alaister Grupp, déi uginn, datt de Bord-137 Metastasen zu VIVO oofgesinn hätt. Dës Resultater bewisen, dass Mir-137 wichteg Roll an Regulatioun Zell Wanderung an invasiveness zu gastric Kriibs gespillt an huet virgeschloen, datt d'verwandelt-Regulatioun vum Mir-137 kënnen ze entholl Metastasen zu gastric carcinogenesis bäidroen. VerfÜgung Mir-137 Ziler AKT2 am GC VerfÜgung MiRNAs standing biologescher Funktiounen duerch hir Zil- Genen negatif Regulatioun. Wéi virausgesot, war et complementarity tëschent ass-mir-137 an AKT2 3'-UTR (Lalumi 4A). VerfÜgung d'Hypothes Fir Test datt AKT2 eng Zilscheif vum Mir-137 ginn, ausser e reporter plasmid d'Wëld -type 3'-UTR Regioun vun AKT2 afgerappt vun der luciferase coding Regioun (Lalumi 4A, AKT2_WT) gouf gebaut. HEK-293T Zellen sech mat reporter plasmid (AKT2_WT) an Alaister cotransfected. Als Resultat, zougedréckt Mir-137 transfected Zellen e markéiert Reduktioun (≈58%) vun luciferase Aktivitéit (Lalumi 4B). Dunn, no der selwechter assay fir aner reporter plasmid standing mutated wouvun AKT2 3'-UTR zu Mir-137 bindend Siten. Wéi erwaart, huet d'inhibition vun luciferase Aktivitéit vum Mir-137 deelweis mat verbindlechen Site geläscht 1 oder obligatoresch verwarnen 2 Mann- a bal vun der AKT2_MUT duebel Mann- ofgeschaf, suggeréiert, dass d'conserved Regioun fir Mir-137 Funktioun (Lalumi 4B) voll responsabel war der Interaktioun tëscht Mir-137 an AKT2, HGC-27 an SGC-7901 Zellen. VerfÜgung sech mat Mir-137 transfected Fir weider z'ënnersichen. AKT2 mRNA Ausdrock war vun real-Zäit Hinnen alleguer alles. Nee groussen Ënnerscheed ass tëscht Mir-137-behandelt a Silessia-behandelt oder onbehandelt HGC-27 an SGC-7901 Zellen (Lalumi 4C) observéiert. Dunn, war westlech blotting Analyse gehaal den Niveau vun AKT2 FAQ ze moossen. Mir hu fonnt, datt de Begrëff vun AKT2 FAQ verwandelt an Mir-137 behandelt HGC-27 an SGC-7901 Zellen reglementéiert war, mä net am Match war oder onbehandelt Zellen (Lalumi 4D). Dës Donnéeë hindeit, datt Mir-137 direkt d'3'-UTR vun AKT2 mRNA unerkennt an bremst AKT2 Iwwersetzung. Sou, verwandelt reegelen Mir-137 zu gastric Kriibs bremst d'Ennerdréckung vun AKT2, déi am Tour tumorigenesis decelerate. VerfÜgung AKT2 engem Member vun AKT Famill ass. Mir weider seng afgerappt effectors Bad an GSK-B fonnt. Als Resultat, regulariséiert der p-Bad a p-GSK-B war selbstverständlech verwandelt an Mir-137 behandelt HGC-27 an SGC-7901 Zellen am Verglach mat Silessia-behandelt oder onbehandelt Zellen. Nee bedeitend Ännerung gouf an Net-phosphorylated Bad oder GSK (Lalumi 4E) fonnt. Dës Conclusiounen hindeit, datt d'denke gastric Kriibs Zell Wuesstem war deelweis wéinst der Regioun-actived Akt Weeër. Nieft Spur Zell Prolifératioun, konnt actived Akt och Bad um Ser112 an Ser136 phosphorylate, erauszesichen Bad-entschlof Zell Doud. An d'Flichte vun phosphorylation op dës Siten, ass schlecht gemengt mat BCL-XL zesummekomm Zell Doud ze induce. Am Géigesaz, kann Akt-mediated hyperphosphorylation vu Bad Zell Iwwerliewe vun Kriibs Zellen förderen. Eis Western blotting Resultater bestätegt heivun Spekulatioun, datt d'Ännerung vun gastric Kriibs Zell Aktivitéiten am Zoustand vun Mir-137-transfected Zellen kéinten e Resultat gin vun phosphorylation vu Bad ofgeholl. Ausserdeem, analyséiert mir d'FAQ Niveau vun AKT2 zu 12 GC patientsin wiem Mir-137 huet verwandelt-reegelen. Dorënner Echantillonen, war AKT2 up-reegelen in9patientsin hir GC Stoffer (Lalumi 4F). VerfÜgung D'Restauratioun vun AKT2 Erscheinung un eng Aktivéierung vun Invasioun an enger Negatioun vun apoptosis VerfÜgung Fir weider vermëttelt de Rollen vun mir-137 an AKT2 während tumorigenesis huet, mir d'Wierkung vun enger Restauratioun vun AKT2 zu mir-137 transfected Zellen ze propagéieren. Déi westlech blot bewisen, dass d'AKT2 FAQ Niveau vun AKT2 overexpression Prouf wéi dat scheinbar héich war vun der negativ Kontroll souguer ënnert dem Ophiewe vum Mir-137. Der Restauratioun vun AKT2 Erscheinung un eng Aktivéierung vun Invasioun an enger Negatioun vun apoptosis (Lalumi 5). VerfÜgung miRNAs goufen dacks oft an ënnerschiddlechen Mënsch Cancers dysregulated agestallt ze ginn an e puer miRNAs huet och benotzt gi wéi therapeutesch Ziler vun Kriibs agestallt. D'Fuerschunge beschäftegt an d'Relatioun tëscht miRNAs an Cancers Duerstellung eis mat de Versteesdemech vun Kriibs hëllefe kéinten. VerfÜgung Et si nëmmen e puer Fuerschunge der Roll Mir-137 huet an gastric Kriibs schwätzen. Et ass confirméiert ginn, dass de Bord-137 engem negativen regulator vun Cdc42 ass an duerch deen déi Pinguin apoptosis an Zell Zyklus G1 verhaft an gastric Kriibs Zellen [17]. Allerdéngs ass d'Regelung Effet vun microRNA zu Kriibs relativ komplizéiert. Et schéngt onméiglech, datt de Bord-137 der gastric Kriibs vun der eenzeger Passerelle reguléieren. An dëser Fuerschung, d'Funktioun an Mechanismus dass Mir-137 gastric Kriibs reglementéiert war weider ze propagéieren. VerfÜgung Eischtens, nogewise mir den Ausdrock vun Mir-137 an 100 Patienten an fonnt dass den Ausdrock vun Mir-137 bedeitend erof ass zu Kriibs Prouf -regulated. Och, hu mir eng statistesch relevant association tëscht dem Wëllen vum Mir-137 an gastric Kriibs Medeziner Etapp fonnt. Dës Resultater uginn, datt hire Restaurant vum Mir-137 zu gastric Kriibs Werdegang Équipe ginn hätt. Mir hu versicht der Relatioun tëscht Mir-137 an Patienten Alter a Geschlecht ze fannen, mee keen iwwerleen Resultat fonnt gouf. Wéi de Moment studéieren verroden, datt de Begrëff vum Mir-137 war am meeschte vun de GC Stoffer verwandelt reegelen-Verglach mat bascht Stoffer (77%), konnt mir iwwer d'Diagnos an prognostic Benotzung vun Mir-137 betruecht. Weider Confirmatioun vun mèi Studien ass wierklech a méi accessibel Echantillon Quellen, wéi Mir-137-beräichert entholl-ofgeleet exosomes vum Blutt, soll ënnersicht ginn. Och, soll et bemierkt ginn, datt d'frecken Wäert gewëssermoossen (frecken = 1,5) nemmn nach nët arbiträr ginn hätt. Wann et méi héich gesat gouf, kéint et sinn der manner Patienten mat Mir-137 zu Kriibs Stoffer reegelen verwandelt. Mä och an deem Zoustand, war et ronn 23% vun der Cancers héich Mir-137 Ausdrock hunn. Dëst kann Patienten wéinst dem eenzelne Differenz ginn, datt e puer vun Individuen verschiddene Gentherapie Ausdrock Muster während tumorigenesis oder Kriibs Werdegang hun kann. VerfÜgung Well den Ausdrock vun Mir-137 am GC Stoffer méi niddreg wéi déi vun bascht Stoffer an mir kéinten statistesch Differenze (p = 0.00079), spekuléieren, datt dës Ausdrock charakteristesche mat de Kriibs Entwécklung verbonne war. Dëst Spekulatiounen war duerch eng kënschtlech an VIVO Studie confirméiert, datt de Bord-137 kënnen d'Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun negatif regléieren. De Mir-137 Ausdrock Niveau kann während enger laanger Period no transfection op engem héijen Niveau halen souwuel zu gastric Kriibs Zell Linnen, Schluss-Etapp xenograft erhéijen an inmetastatic Plaz an Longen (S1A Lalumi-S1C Lalumi). Allerdéngs, féiert d'overexpression Method fir Héich Ausdrock Niveau vun Mir-137 (Lalumi 2A). Dës héich Niveau vum Mir-137 kënnen zousätzlech Folge féieren. Zum Beispill, ass Mir-137 engem negativen regulator vun Cdc42 an duerch gezielt wéi am gastric Kriibs Zellen apoptosis an Zell Zyklus G1 verhaft Pinguin [17]. Wéi de Bord-137 vun eiser Etude dausende vun Mol upregulated gouf, kann et zu der inhibition vun aneren Ziler nodeems wéi Cdc42. Selbstverständlech, an dëst Studium ka mir net d'Méiglechkeet vir, datt de entholl suppressor Auswierkunge vum Mir-137 vun suppressing aner Zill Genen mediated war. VerfÜgung Dann, hunn mer dat Mir-137 Akten als entholl suppressor Gentherapie duerch gezielt AKT2 , dat ass e Member vun AKT Famill. Der Restauratioun vun AKT2 bewierkt an Regulatioun vun AKT2 zu Mir-137 transfected Zellen, déi wéi déi vill méi héich ass am Match war. Dëst kann an well dass d'AKT2 overexpression d'FAQ Niveau Mir-137 Trupen réckgängeg. Méi wichteg, d'Restauratioun vun AKT2 reguléieren der apoptosis an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen, Spëtzekandidat fir eng Aktivéierung vun Invasioun an enger Negatioun vun apoptosis (Lalumi 5). Dëst Rettungsplang experimentéiert gëtt weider Beweiser, datt de Bord-137 aktiv Zell apoptosis an negatif vun gezielt AKT2 Zell Invasioun regléieren. An VIVO Experimenter bewisen, och dass de Bord-137 Ausdrock fir d'AKT2 Ausdrock (S1D Lalumi a S1E Lalumi) negatif relativ ass. AKT ass e wichtege Faktor vun PI3K /AKT Wee Manéier. D'verwandelt Regulatioun vun AKT2 schellt weider seng verwandelt-bäiginn FAQ Bad an GSK-3B, datt den p-Bad a p-GSK-B war selbstverständlech iwwer reegelen. Schlecht kann seng "Rollen vun phosphorylation a weider reglementéiert der Zell Schicksal [18] spillen. GSK-3B, déi och als GSK-3β normalerweis bekannt ass, bedéngt der Zell Immigratioun an Invasioun. Zu der Konklusioun, hunn mir e Lien tëscht Mir-137 an AKT2 identifizéiert datt e Roman entstoend vun gastric Kriibs tumorigenesis ass. De Mir-137 huet bewisen gouf zu AKT2 Regulatioun Zesummenhang ze ginn [19]. An hepatocellular carcinoma, bremst Mir-137 Kriibs Zell Wuesstem an Metastasen via direkt gezielt AKT2 [20]. An Tatsaach, hunn mir e 8 Genen als potentiell Ziler vun Mir-137 (S1 Table) opgefouert. Allerdéngs ass de AKT2 der nëmmen direkt Zil vum Mir-137 no duebel luciferase reporter Gentherapie assay a westlech blot Enquête. Vun Lalumi 4D kënne mir thatmiR-137 kann Afloss der AKT2 a p-AKT2in souwuel HGC-27 an SGC-7901 Zellen fannen. Mä Spannen, an SGC-7901 gouf de phosphorylation Status méi vermeintlech betraff. Dëse Phänomen kann konsequent an den dräi widderholl blots observéiert ginn mir gesuergt. Mir ofsetzen, datt et zu de spezielle Besëtz vu verschiddene Kriibs Zellen wéinst ginn hätt. Et kéint spezifesch Regelung Wee Wee vun Mir-137 zu SGC-7901 gin déi d'phosphorylation Status vun AKT2.However repressed, aus dem haitegen Fuerschung, kënne mir net voll dëse Mechanismus erklären. Wann mir d'Patienten hutt déi zu hir GC Otemschwieregkeeten niddereg Ausdrock vu Mir-137 hunn d'AKT2 FAQ Ausdrock ze entdecken, hunn mir meescht vun dëse Patienten (9/12) vun hire GC Otemschwieregkeeten héich AKT2 Niveau hunn. Dëst Resultat, datt de Bord-137 AKT2 zu Patienten Zil hätt. Et waren och dräi Patienten déi niddreg Ausdrock vun AKT2 am GC Otemschwieregkeeten hunn wann de Wëllen vum Mir-137 niddreg ass. Dëst Resultat kann zu den eenzelne Ënnerscheed Patienten duerch. VerfÜgung An Conclusioun, eisem Ausdrock a funktionell Studien virgeschlo, dass de Bord-137 ass dacks verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs kann als entholl suppressor am GC Zellen Akt, gesinn Ausdrock vun deem op GC Zellen gastric Kriibs Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun duerch direkt gezielt AKT2 opgeléist. Sou, ass eisen Aarbechten eng gutt Zousaz zu der leschter Aarbecht an hëllefsbereet ass fir eis de Bord-137 Regulatioun Mechanismus zu Kriibs ze verstoen. VerfÜgung D'Auteuren Merci Dr. Chengyuan Feng aus Cancer Spidol, Chinese Akademie vun Medezinwëssenschaft fir technesch Assistenz a Manifestatioun Versioun. VerfÜgung
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung S1 Figebam. Mir-137 an AKT2 Ausdrock der transfection. VerfÜgung A. Mir-137 Ausdrock vun HGC-27 Zellen an SGC-7901 Zellen 72 h Post transfection. B. Mir-137 Ausdrock an d'Enn-Etapp xenograft erhéijen. C. Mir-137 Ausdrock vun metastatic Lokalisatioun vun Mais Longen. D. AKT2 Ausdrock vun metastatic Lokalisatioun vun Mais Longen. Mir gemëscht der fënnef Longen zesummen am selwechte Grupp. E. AKT2 Ausdrock vun metastatic Lokalisatioun vun Mais Longen. Mir fonnt der Akt2 FAQ Ausdrock respektiv an all Maus. 30 μg total FAQ war fir all Prouf benotzt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0130124.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S2 Figebam. Zell Nuetsvolen assay virun Metastasen Experimenter VerfÜgung Zell Nuetsvolen assay 24 Stonnen Post transfection Leeschtung war VerfÜgung Doi:.. 10,1371 /journal.pone.0130124.s002 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S3 Figebam. Adensitometric Analyse vum Lalumi 4E VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0130124.s003 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S1 Table. . Potential Zil- Genen vun Mir-137 VerfÜgung De potentiellen Zil- Genen vun Mir-137 huet déi op der Linn Software virausgesot an déi duebel luciferase reporter Gentherapie assay a westlech bloting fonnt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0130124. s004 VerfÜgung (DOCX) VerfÜgung
Arbeschterlidder VerfÜgung
Infliximab kann d'Effektivitéit vun e puer COVID-19 Impfungen behënneren
Milchsäure Bakterien a Darmbakterien droen zu de gesondheetleche Virdeeler vum Roggen bäi,
Mëttelmier Diät fördert e gesonde Alterung mat engem méi gesonde Darmmikrobiom
Wéi hëllefen Hostfaktoren wéi de Lungemikrobiom bei der SARS -CoV -2 Infektioun?
Planzefudder kënnen Antibiotikaresistent Superbugs op Mënschen iwwerdroen
Metformin kann hëllefe leckeren Darm
Thiopurine kéinte hëllefen eng viral Replikatioun a mënschleche Coronavirus ze stoppen
Fuerscher vum Departement Mikrobiologie &Immunologie, Dalhousie Universitéit, Universitéit vu Calgary, an Departement fir Biochemie a Molekularbiologie, Universitéit vu British Columbia, Kanada, huet
Detailléiert Kaart vum mënschlechen Zongmikrobiom
Eng nei Studie am Journal publizéiert Zellberichter am Mäerz 2020 bericht dBenotzung vu fortgeschrattem a schnelle Spektral Imaging Techniken fir eng detailléiert Kaart vu mikrobielle Gemeinschaften
Roman superaktivéierende Makrophag Rezeptor kéint Hyper-Entzündung a schwéiere COVID-19 erklären
Immunitéit ass eng virwëtzeg Saach. Iwwerdeems wesentlech beim Schutz vum Kierper géint invasiv Pathogenen an auslännesch Antigenen, et kann och géint de Kierper dréinen an zerstéierend immunologesch