Autophagy-Zesummenhang Gentherapie-5 (ATG-5) ass ee vun de wichtegsten Reglementatioun vun autophagic Zell Doud. Et ass wéi e Schutzpatrounin molekulare Mechanismus fir entholl Zellen am Laf vun Chimiotherapie dicht erauskoum. Am Moment studéieren, ze propagéieren mir den Ausdrock Muster vun ATG-5 an multidrug Resistenz-verbonne FAQ-1 (MRP-1) an 135 gastric Cancers (GC) Patienten, déi mat epirubicin, cisplatin a 5-FU adjuvant Chimiotherapie (manner behandelt goufen ) folgenden chirurgesch resection an lant hiren Potential Medeziner Bedeitung. Mir hu fonnt, datt souwuel ATG-5 (77.78%) an MRP-1 (79.26%) waren am GC Patienten héich ausgedréckt. ATG-5 Ausdrock war vill mat Déift vun Mauer Invasioun, TNM Etappen an fernen Metastasen vun GC (P &Si besteet; 0,05) assoziéiert hierkommen MRP-1 Ausdrock vill mat entholl Gréisst verbonne war, Déift vun Mauer Invasioun, lymph Node Metastasen, TNM Etappen an dat Status (P &Si besteet; 0,05). ATG-5 Ausdrock war positiv mat MRP-1 (RP = 0,616, P &Si besteet; 0.01) soll. Fräi Meenungsäusserung vun ATG-5 an MPR-1 war vill mat aarmséileg globale Iwwerliewe soll (OS; P &Si besteet; 0.01) an Krankheet gratis Iwwerliewe (DFS; P &Si besteet; 0.01) vun eiser GC Kohort. Doriwwer eraus, hien huet mir dat ATG-5 am Alkohol- Zellen resistent vun GC Équipe war, déi haaptsächlech autophagy duerch Regulatioun war. Eis Daten hindeit, datt upregulated Ausdrock vun ATG-5, eng wichteg molekulare Fonktioun vun Schutzpatrounin autophagy, mat chemoresistance am GC verbonnen ass. Ausdrock vun ATG-5 an MRP-1 onofhängeg prognostic lues fir de GC Behandlung kënnen VerfÜgung
Fro:. Ge J, Chen Z, Huang J, Chen J, Yuan W, Deng Z, et al. (2014) Upregulation vun Autophagy-Contenu Gene-5 (ATG-5) Ass mat Chemoresistance zu Mënscherechter Gastric Cancer Associéierten. PLoS NËMMEN 9 (10): e110293. Doi: 10.1371 /journal.pone.0110293 VerfÜgung
Redakter: Pankaj K. Singh, Universitéit vun Nebraska Medical Center, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung
Arnaque: 5 August 2014; Akzeptéiert: 18. September 2014; Publizéiert: 17. Oktober 2014 VerfÜgung
Copyright: © 2014 Ge et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Data Disponibilitéit:. D' Auteuren confirméieren datt all Daten d'Conclusiounen si voll sinn ouni Restriktioun Basisdaten. All Daten sinn bannent de Pabeier VerfÜgung
Funding:. Dës Aarbecht vun National Natural Science Foundation vun Hunan Province, China (Nr 2012FJ6088) ënnerstëtzt huet. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Trotz eng bedeitend Reduktioun vun hiren Heefegkeet Taux vun villen entwéckelt Länner, gastric Kriibs (GC) bleift d'véiert stäerkste Toast festgestallte malignancy, an den zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll weltwäit [1]. Dene leschte Joerzéngten, Norm multimodal Behandlung Strategien zesumme mat anere recommandéiert Optiounen (zB D2 dissection an adjuvant Chimiotherapie) hunn dunn e groussen Deel vu Patienten mat GC betraff ugewandt, besonnesch fir déi mat fortgeschratt a metastatic Krankheeten, mat verschlechtert Iwwerliewe Tariffer gesi ginn wahrscheinlech wéinst der Präsenz vun chemoresistance während Behandlung [2]. Dofir, Identifikatioun vun Roman molekulare Evenementer d'Entwécklung vun dëser malignancy an hir aarmséileg hätt souwéi Versteesdemech de Mechanisme vun GC chemoresistance batter fir méi efficace Medeziner Interventioun a besser Gestioun vun de Patienten néideg sinn Basisdaten. VerfÜgung
Ënner gestallt Konditiounen, autophagy ass eng Lysosmen-ofhängeg Self-verdauen System haaptsächlech responsabel fir Entféierung a Recycling vu laange-gelieft Proteinen an beschiedegt /empfond intracellularorganelles fir Zell homeostasis ze erhalen [3]. D'Proteinen an organelles fir Zerstéierung Douanieren si bannent "double-Membran" vacuoles (autophagosomes), duerno duerch Fusioun mat lysosomes sequestered investéiert ze bauen als autophagosomes bekannt, wou den Inhalt vun Dëst hydrolases deforméiert sinn [4]. Et ass dokumentéiert, datt autophagy an Äntwert ze vill encadréiere Konditiounen dorënner Nährwert Entzuch, oxidative Stress oder DNA Schuedenersaz an déngt als Lycée Zell Mechanismus entschlof ginn hätt, schliisslech Zellen Délaie ze iwerliewen an proliferate, iwwerdeems extensiv oder bestänneg autophagy Resultater zu Zell Doud [ ,,,0],5]. Impairments zu gestallt Aktivéierung Versammlungs- a Funktioun vun der autophagic Passerelle ëmmer gewiescht an enger grousser Villfalt vu mënschlechen Cancers observéiert, obwuel de exakt Roll vun autophagy zu Kriibs Moses an Werdegang huet nach ënner kontroverse ass. Verschidden Daten dofir d'Iddi, dass autophagy tumorigenesis Hien ënnersicht aner Beweiser hindeit, datt autophagy gebass ass entholl Initiatioun ausléisen a schützt entholl Zellen aus apoptosis amgaang [6]. Spannen, war inhibition vun autophagy kuerzem d'Anti-entholl Aktivitéit vun e puer cytotoxic Agenten ze verbesseren fonnt. Li a Kollegen confirméiert datt autophagy als Schutzpatrounin Mechanismus géint de bewosst Auswierkunge vun 5-FU-Behandlung an inhibition vun autophagy vun 3-methyladenine ausgeléist gouf Lamb 5-FU-entschlof apoptosis vun Colon Kriibs Zellen [7], [8]. Wollt den Trainer awer no e puer anticancer Drogen (e.g. cetuximab an dasatinib) huet hien zu autophagic Zell Doud duerch verschidde Mechanismen puer Kriibs Zellen [9] induce - [13]. D'molekulare Maschinnen duerch déi autophagy Iwwerliewe oder Doud vun neoplastic Zellen reguléieren bleift gréisstendeels obskur Nordasien. D'autophagy Passerelle ass eng héich-modulated dynamesche Prozess Kannerbetreiung vun der autophagy-dinn (ATG) Famill vun Genen Bëscheef, déi vun e puer Eckdaten kinases dorënner mTOR, PI3k /Akt, AMPK an MAPK [14], [15] gefouert ginn ass. ATG-5 ass eng zentral regulator néideg fir autophagy zu Conditioune vun z'engagéieren an autophagosome elongation [16]. Ugewannt Ausdrock vun ATG-5 sensitized entholl Zellen ze anticancer Drogenofhängeger Behandlung souwuel kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung; am Géigesaz siRNA-mediated inhibition vun ATG-5 bis partiell Resistenz zu Chimiotherapie Nerve [17] VerfÜgung Wat haalt Dir dovun adjuvant Chimiotherapie ass weideres eng grouss Behandlung fir GC. Ee, bleift de globale Efficacitéit vun Chimiotherapie aarmséileg méiglecherweis als Konsequenz vun der Präsenz vun de Multi-Drogenofhängeger Resistenz (fir Premier) phenotype. Anescht wéi aner entholl gouffen, Ausdrock vun der klassescher fir Premier-mediating Molekülle wéi glutathione S-transferase an multidrug Resistenzgen 1 ass net ganz verwandelt an GC Stoffer, wat beweist, datt et vläicht e komplizéierte Mechanismus fir d'Entwécklung vun fir Premier an dëser malignant Krankheet existéieren [ ,,,0],18]. Als ee vun der klassescher EPO-resistent Mechanismen, multidrug Resistenz-verbonne FAQ 1 (MRP1 /ABCC1) fonnt ginn ass staark zu GC ausgedréckt gin an domat dréien Rollen an mediating fir Premier am GC huele kann [19], [20]. Allerdéngs bleift et onbekannt ob MRP-1 Ausdrock mat ATG-5 Ausdrock verbonnen ass. An och ob autophagy ass zu chemoresistence am GC Patienten Équipe ass onkloer. VerfÜgung Am Moment studéieren, mir éischt immunohistochemistry Employé de Ausdrock Profil vun ATG-5 an MRP1 zu enger Zomm vun 135 GC Patienten ze ermëttelen, déi manner dobäi (epirubicin, cisplatin a 5-FU) adjuvant Chimiotherapie folgenden chirurgesch resection. D'kennenzeléieren tëscht ATG-5 an MRP-1 Ausdrock souwéi hir Ausdrock mat verschiddenen clinicopathological Charakteristike vun GC a Krankheete Resultater goufen och évaluéieren. VerfÜgung kennen an Otemschwieregkeeten Echantillon a Ganzen 135 GC Patienten vun 91 Männercher an 44 Weibercher aus deen am Agrëff bei de Pompjeeën vun Gastrointestinal befënnt, Xiangya Spidol, Central South University (CSU), China, tëscht dem 1. Januar 2007 an dem 31. Dezember 2008 mécht Coursë waren dëser Etude. Den Duerchschnëtt vun der Kohort war 53,62 ± 9,73 Joer, mat enger Rei vun 26 bis 72. Theprimary GC entholl tissuesand Net-kriibserreegend stemmt (NC) Stoffer op d'mannst 5 cm ewech vum entholl Kär etabléiert sech no chirurgesch resection kritt an direkt verschafft an bis weider benotzt ginn. Keen vun den rekrutéiert Patienten hu Chimiotherapie oder radiotherapy virun chirurgesch Operatioun. D'histopathological Diagnos war preoperatively gemaacht a vun Agrëff confirméiert. All Mataarbechter mat Etapp normal schwätzen ze IV erhéijen scho manner Chimiotherapie der Chirurgie (Dose: epirubicin 50 mg /m All Fäll an dëser Etude gekuckt, waren an all uplanzen sech histopathologically am Oktober-du iwwerpréift, 2012. D'Déift vun Mauer Invasioun, Node Metastasen regional lymph, an histological mannerwäerteg waren duerch de selwechte Grupp vun zwee erfuerene Profiséquipe pathologists confirméiert. D'Patienten goufen baséiert op der dat Status vun Kriibs Zellen an dräi histological hierer kategoriséiert: gutt, moderéiert an aarm. Baséiert op enger Kombinatioun vun loco-regional entholl Engagement an der Präsenz vun Metastasen, waren all Fäll no der TNM Course vun Malignant Tumours (TNM) Etapp Glidderung [21] Darmstadt. Fir d'Analyse vun Iwwerliewe, war den Datum vun der Operatioun benotzt Ufank Punkt vun de Suivi fueren ze vertrieden. Patienten, déi vun aner Krankheete gestuerwe anstatt GC oder aner Iwwerraschunge ronderëm goufen aus de Fall Kollektioun ausgeschloss. D'Doudesursaach vun dëser Etude agestallt war aggravation vun GC. Déi gesamt Iwwerliewe (OS) huet als eng Period berechent aus dem Datum vun der initialen Agrëff an den Datum vum Doud ufänken, oder den Datum vun der leschter Suivi als Enn Punkt. D'Krankheet gratis Iwwerliewe (DFS) war wéi der Zäit nolauschterer aus Chirurgie bis den Datum vun lokal Réckwee oder éischter wäit Uergel Metastasen definéiert. Informéiert schrëftlech Erlaabnes war vun all Patient virum Agrëff kritt an dëser Etude war vun der Fuerschung IFLA- Comité vun Central South University, China guttgeheescht. All uplanzen sech ophuelen an huet anonyme no der ethesch a legal Richtlinnen. VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung Déi frësch uplanzen sech zu 10% neutral gefiermt formalin fix an dono mat paraffin Ënnerbewosstsinn. D'paraffin-Ënnerbewosstsinn Stoffer sech um 4 μm Géigewier an duerno mat xylene an rehydrated fir weider H &deparaffinized; E oder peroxidase immunohistochemistry staining vun der DAKO Stellt System benotzt. géint respektiven Zil- Proteinen op engem dilution vun 1:500 Nuecht op (::;; ab32574 Abcam Galaxy, Cambridge, UK MRP1 ab54033 ATG5) an dowéinst, folgende proteolytic unzereegen reduzéiert a sech mat endogenous peroxidase, goufen Otemschwieregkeeten drënner mat der Primärschoul antibodies incubated 4 ° C. No mat PBS wäschen, peroxidase Fortgeschratten Polymer an Realitéiten-chromogen sech dann fir Lounempfänger der immnohistochemical staining ze visualiséieren. Endlech, goufen counterstained Sektiounen mat hematoxylin, Cover-ukomm mam Opriichte mëttel, an duerch Liicht microscopy iwwerpréift. All d'Prozedure goufen am Departement vun wirklech gesuergt, Xiangya Spidol, C.S.U. Drënner waren onofhängeg vun zwee erfuerene pathologists interpretéiert, déi un Informatiounen 'Patienten blann waren. Mir laachen staining Intensitéit an Prozentsaz vun Kierchefënster Zellen e virdru beschriwwen Approche benotzt [22], [23]: de Prozentsaz vun positif Kierchefënster Zellen (0% -100%) vun der dominant Intensitéit Muster vun staining Raum war, vu que 1 als negativ oder Spuer, 2 sou schwaach, 3 als moderéiert a 4 esou staark. Dofir, huet de globale stoung gounge vun 0 bis 400. kennen dono an véier verschidden subgroups kategoriséiert: 0-99 stoung, stoung 100-199, stoung 200-299 an 300-400 stoung VerfÜgung Western blot Analyse <. br> Lait Zell dovu bereet sech mat 0,14 M NaCl, 0,2 M triethanolamine, 0,2% Natrium deoxycholate, 0,5% Nonidet P-40 a mat engem protease inhibitor nà (all vun de Produiten goufe vu Fläch, St. Louis am Missouri , USA). Dunn, FAQ Prouf war zu enger Membran duerch eng 12% Natrium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) gelies an transferéiert lafen. D'transferéiert Schläimhait sech dono Nuecht op 4 ° C mat enger Primärschoul antibody incubated. Nom Wäschen, war d'Membran mat engem horseradish peroxidase (HRP) -linked Secondaire antibody fir 1 h bei Raumtemperatur incubated. Der Primärschoul antibodies sech anti-ATG-5 (Santa Cruz, CA, USA), anti-LC3A /B (abcam, Cambridge, UK) an anti β-Actin (Santa Cruz, CA, USA). All Resultater gemellt der Moyenne nennen vun dräi verschiddene onofhängeg Experimenter sinn. VerfÜgung Zell Prolifératioun assay VerfÜgung BTS op 96 gutt Placke rakommen waren (10000 Zellen /gutt) fir 24 h virun Behandlung. MTT assays sech agesat fir Zell Prolifératioun bei verschiddene Zäit Punkt an der Behandlung bewäerten. D'MTT assay Leeschtung war wéi follegt: MTT war gutt zu all notéiert an d'Placke sech fir 4 h op 37 ° C incubated. D'MTT mëttelfristeg Mëschung war dann geläscht an 150 μL vu Police sulfoxide (DMSO) war fir all gutt dobäi. D'absorbance war um 570 nm mat engem multiwall spectrophotometer gemooss VerfÜgung RNS Amëschen VerfÜgung siRNA duplexes gezielt ATG-5 Wierderbuch sech wéi follegt zesummen: siRNA-ATG5-486:. GACGUUG GUAACUGACAAATT; siRNA-ATG5-695: GUCCAUCUAAGGAUGCAAUTT an siRNA-ATG5-938: GACCUUUCAUUCAGAAGCUTT. UUCUCCGAACGUGUCACGUTT: siRNA duplexes mat Net-spezifesch Message sech als negativ Kontroll (NC) benotzt. Verschidde siRNAs sech getrennt an Zellen transfected der Lipofectamine 2000 reagent benotzt, an déi mëttel- war 6 h der transfection ersat. VerfÜgung Real-Zäit RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS aus der Zell Linnen an Stoffer sech mat der Trizol reagent (Invitrogen, Karlsbad, USA) ofgebaut, folgende d'Uweisungen d'Hiersteller. D'Konzentratioun vun RNS war mat engem spectrophotometer gemooss. A cDNA Pool war mat Wierderbuch 1 μg vun insgesamt RNS an TaqMan Réckproduktioun Transkriptioun Reagents (Obwuel Biosystems, Foster City, USA) wéi déi vun den Hiersteller beschriwwen. Den Ausdrock vun der Zil- Gentherapie war mat enger relativer quantification Approche bewäert (2 Immunofluorescence assay VerfÜgung BTS sech permeabilized mat 0.3 % Triton X-100 fir 10 min duerch zéien mat 2-4% Methanal fir 15 min duerno, a fir 60 min mat 3% Schof serum bei Raumtemperatur gespaart. Dann, mat der Primärschoul antibodies anti-LC3B (Santa Cruz, CA, USA) Iwwernuechtung bei Raumtemperatur Komedie, an Zellen sech dräimol mat PBS gewäsch. Kierchefënster mat Alexa Fluor 488 conjugated 488 Kanéngchen anti-Geess IgG fir 1 h bei Raumtemperatur, an dann huet den Zellen dräimol mat PBS gewäsch. Kären sech duerch staining mat DAPI (Fläch, USA) fir 2 min visualized. D'grousst Zellen sech mat Inverted fluorescence microscope observéiert. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung All statistesch Analyse mat der SPSS Software Package standing goufen 15,0 fir Windows (SPSS Galaxy Chicago, IL, USA). Chemeschen Donnéeën sech als Mëttler ± Fils presentéiert. Pearson d'χ Expression vun ATG-5 an MRP-1 zu GC VerfÜgung den Ausdrock Muster an Plaz vun ATG-5 an MRP-1 vun eiser GC Patienten, déi mat epirubicin, cisplatin a 5-FU adjuvant Chimiotherapie (manner) folgenden chirurgesch resection behandelt goufen, waren mat immunohistochemical Analyse iwwerpréift. Vun der 135 GC uplanzen, 105 (77.78%) waren positiv fir ATG-5 immunoreactivity, an 107 (79.26%) waren MRP-1 positiv. Als zu Dorënner 1 duergestallt, fonnt mir dass ATG5 Kannerbetreiung an der Zytoplasma ausgedréckt huet. Desweideren, iwwer-Ausdrock vun ATG-5 war positiv mat deem vun MRP-1 zu GC soll. (R = 0,616, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001), wéi vun der Bivariate Korrelatioun Test verroden. De positiven Ausdrock an bascht Net-kriibserreegend Stoffer goufen 113 (83.70%) fir ATG-5 an 89 (65.93%) fir MRP-1. D'Donnéeë gewisen, datt béid ATG-5 an MRP-1 waren an Kriibs an Net-kriibserreegend Stoffer positiv ausgedréckt, wat drop hindeit, datt ATG-5 an MRP-1 kann vun Chimiotherapie zu souwuel entholl an Net-entholl Stoffer entschlof ginn. Well all eis Patient Echantillon sech mat manner Chimiotherapie behandelt, an hunn mir dass souwuel ATG-5 an MRP-1 waren duerchaus ausgedréckt a positiv an deenen Echantillon soll. Mëttlerweil, beweist virdrun Etude dass MRP-1 vläicht mat Multi-Drogenofhängeger Resistenz am GC assoziéiert. Zesumme mat virdrun fannen, eis Resultater hindeit, datt ATG-5 an MRP-1 kann vun chemoresistance am GC Patienten Équipe ginn. VerfÜgung Associatiounen tëscht Ausdrock vun ATG-5 oder MRP-1 an clinicopathological Charakteristiken vun GC VerfÜgung D'Associatiounen vun ATG-5 an MRP1 Ausdrock mat verschiddenen clinicopathological Parameter vun GC sinn an Table 1 an Table 2 bzw. gewisen. 0,001, P VerfÜgung = 0,018, P VerfÜgung; Ausdrock vun ATG-5 war vill mat Déift vun Mauer Invasioun, wäit Metastasen an TNM Etappe vun GC ( P VerfÜgung &Si besteet assoziéiert &Si besteet; 0,001 bzw.). MRP-1 Ausdrock däitlech mat méi entholl Gréisst verbonne war, Déift vun Mauer Invasioun, regional lymph Wirbelen Metastasen, TNM Etappen ( P VerfÜgung = 0,032, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, P = 0,016, P &Si besteet; 0,001 bzw.) an dat Status ( P VerfÜgung = 0.005). Fir weider d'Bedeelegung bestëmmen o f ATG-5 an MRP-1 an der GC Entwécklung, standing mir Iwwerliewe Analyse an eiser Patient Echantillon. Eis Iwwerliewe Analysë bewisen, datt de ganzen Ensembel Iwwerliewe (OS) Taux vun eiser GC Kohort 43,70% mat engem schwätzen Iwwerliewe vun 39,849 Méint huet (95% CI, 35.636-44.061 Méint); Obschonn d'Krankheet war gratis Iwwerliewe (DFS) Taux 34,07% mat engem schwätzen Iwwerliewe vun 35,802 Méint (95% CI, 31.618-39.986 Méint). Mir séiert nächste de Patienten an véier verschidden subgroups no de Fändelen vun immunohistochemistry staining. D'Kaplan-Meier Iwwerliewe Analyse Teamchef eng héich ATG-5 Ausdrock vill mat aarmen OS verbonne war ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an DFS ( P VerfÜgung = 0.003). Pairwise Vergläicher uginn dass Patienten déi héchste ATG-5 Ausdrock Droen (Fändelen 300-400) huet den Ärmsten Iwwerliewe Tariffer wéi zu deem vun anere subgroups (Dorënner 2A an 2B) am Verglach. Konsequent, war upregulated MRP-1 Ausdrock ze bedeitend verbonne mat aarmséileg OS ( P VerfÜgung = 0.001) an DFS ( P VerfÜgung = 0.018) vun eiser GC Patienten fonnt. Der Ënnergrupp, mat der héchster MRP1 Ausdrock Fändelen (0-99) wossten Schlëmmst hätt (Dorënner 2C an 2D) am Verglach mat anere subgroups ze hunn. Eis Daten zougedréckt och, datt et e wesentlechen Korrelatioun tëscht TNM Etappen an Iwwerliewe vun GC Patienten war. Patienten mat Etapp III a IV aarmen hätt ugewisen erhéijen wéi zu deene Verglach ausser Etapp normal schwätzen an II erhéijen ( P &Si besteet; 0,01 VerfÜgung) (Dorënner 2E an 2F). Spannen méi, de multivariate iwwerschloen Réckgang Modell bewisen d'Cox datt ATG-5 an MRP-1 Ausdrock Niveauen a TNM Etappe waren all onofhängeg a wesentleche prognostic Indicateuren fir en den OS ( P VerfÜgung = 0,037, P ATG-5 bedeitend an chemoresistant Zellen upregulated war VerfÜgung beschen weider d'Roll vun ATG-5 am tumorigenesis an Drogenofhängeger resistent. Mir nogewise d'FAQ Ausdrock vun e puer gastric Kriibs Zell Linnen (AGS, BGC-832, SGC7901, SGC7901 /DPP an MKN45) an an eng och mënschlech gastric epithelial mucosa Zell Linn (GES). Spannen, fonnt mir dass ATG-5 dramatesch an DPP resistent Zell Linn overexpressed war, SGC7901 /DPP Zellen, am Verglach mat all aner Zell Linnen déi DPP sensibel SGC7901 Zellen (Dorënner 3A) gehéiert. Mir bestätegt weider dass SGC7901 /DPP Zellen ze DPP Behandlung méi resistent ginn. Den IC 25, IC50 an IC75 goufen 15,4 μM, 38,7 μM an 93,53 μM zu SGC7901 Zellen. Am Géigesaz, Den IC 25, IC50 an IC75 goufen 120,03 μM, 271,9 μM an 423,7 μM zu SGC7901 /DPP (Dorënner 3B). Et ass ongeféier 5 bis 9 Mol méi héich wéi déi vun den Net-Drogenofhängeger resistent Zellen. Eis Opklärung mobiliséiert staark dass ATG-5 dréit zu Drogenofhängeger resistent vun de GC Zellen. VerfÜgung Inhibition vun ATG-5 sensitized chemoresistant Zellen fir Drogenofhängeger Behandlung VerfÜgung weider ze beweisen, datt ATG-5 fir d'dréit Drogenofhängeger resistent vun de GC Zellen, mir benotzt kleng interfering RNAs (siRNAs) den Ausdrock vun ATG-5 bis knockdown. Dräi siRNAs sech entwéckelt. Eis real Zäit Hinnen alleguer a westlech blot Resultater gewisen, datt all dräi siRNAs den Ausdrock vun ATG-5 inhibited souwuel mRNA an FAQ Niveau (Dorënner 4A an 4B). Mir hate een, siRNA-ATG5-695, mat héchsten knockdown Effizienz de folgenden Experimenter ze maachen. Mir knockdown ATG-5 Ausdrock an dann behandelt d'Zellen mat DPP. Zell Prolifératioun ëmmer war op 0, 48 an 72 Stonnen an der Behandlung iwwerpréift. Eis Resultat gewisen, datt knockdowning ATG-5 net Zell Verbreedung zu SGC7901 /DPP Zellen am Verglach mat Kontroll siRNA (siRNA NC) Afloss huet. DPP Behandlung inhibited eleng gehumpelt der Verbreedung vun den Zellen. Spannen, wou mir de Beweis vun ATG-5 a behandelt d'Zellen mat DPP gläichzäiteg knockdown, war d'Zell Prolifératioun ëmmer weider mat Zellen mat DPP eleng 48 an 72 Stonnen an der Behandlung (Dorënner 4 C) behandelt Verglach opgeléist. Eis Daten weider Ënnerstëtzung datt ATG-5 dréit zu der Drogenofhängeger resistent vun GC Zellen. VerfÜgung Autophagy am Alkohol- Équipe war resistent vun DC Zellen VerfÜgung Als ATG-5 enger zentraler regulator vun autophagy ass, mir spekuléieren, datt autophagy am Alkohol- vun GC Zellen resistent Équipe kann. Also benotzt mir 3MA, déi eng autophagy inhibitor ass, d'Drogen- resistent Zellen ze entweckelen. Wéi erwaart, fonnt mir dass 3MA zesumme mat DPP Behandlung engem ähnlechen Effekt mat ATG-5 kncokdown zesumme mat DPP Behandlung (Dorënner 4C an 4D) hat. D'Donnéeën déi beweisen datt autophagy dréit zu der Drogenofhängeger resistent. Dunn, iwwerpréift mir ob autophagy während der Behandlung geännert huet. Mir benotzt Immunofluorescence assay LC3B Ausdrock Niveau ze entdecken, déi eng autophagy Bewaacher geflitzt an d'Zellen ass. Eis Daten zougedréckt datt autophagy opgeléist gouf no silencing ATG-5 oder bestéet d'Zellen mat 3MA (Dorënner 5A). A westlech blot Resultat bestätegt weider dass LC3A /B FAQ Ausdrock nëmmen an Zellen mat siRNA-ATG5 oder 3MA behandelt betraff war. An anere Wierder, huet Zell Prolifératioun inhibited weider nëmmen wann autophagy inhibited war (Dorënner 4 a Gestalt 5). Dofir, datt eis Daten datt ATG-5 resistent vun DC Zellen am Alkohol- Équipe war, deen haaptsächlech duerch d'autophagy vun de Kriibs Zellen Afloss huet. VerfÜgung GC bleift ee vun de meeschte reegelméissegen malignant erhéijen op eng global Basis an trotz sengem zréckgeet Heefegkeet an der Gesamtzuel ass virausgesot als Resultat vun de Bevëlkerungswuesstem kontinuéierlech ze erauszefuerderen. An Männer, verléiert GC der zweeter veruerteelt Taux; vun de Fraen, ass et déi véiert veruerteelt [24], [25]. D'Brutto veruerteelt Taux vun GC zu China war 25,2 100 000 [26]. An eiser Etude, iwwerpréift mir den Ausdrock vun ATG-5 an MRP-1 op enger Kohort vun GC Patient no Chimiotherapie goen. Dunn, hien huet mir dat ATG-5 upregulated war zu cisplatin (DDP) resistent Zell Linn. Ausserdeem, no ATG-5 Ausdrock oder aotophogy inhibited war, huet sech de Kriibs Zellen ze DPP Behandlung sensitized. Eis Resultater déi nei Asiicht an de Mechanismus vun chemoresistant am GC Werdegang. VerfÜgung Mir Uschléi exression Profil vun ATG-5 an MRP-1 zu 135 Chinese GC Patienten. Zu engem Accord mat virdrun Rapport [22], huet eist Resultat, dass en héije Prozentsaz vun GC Stoffer ATG-5 ausgedréckt, an ATG-5 Ausdrock war statistesch mat Déift vun Mauer Invasioun, wäit Metastasen an TNM Etappe vun GC assoziéiert. Dës Conclusiounen Ënnerstëtzung eng Notioun déi héich Ausdrock Niveau vun ATG5 ze droen kann, gewëssermoossen, e méi aggressiv a malignant phenotype am GC. Dëst Embryone ass weider vun eise Opklärung vun der Associatioun tëscht héich ATG5 Ausdrock am GC an aarmen hätt vun Patienten ënnerstëtzt (méi Diskussioun hei drënner ze gesinn). Méi wichteg, identifizéiert mir e positive Korrelatioun tëscht ATG-5 an MRP1 Ausdrock an eiser GC Kohort. Opgrond vun der Tatsaach, dass MRP1 ass eng FAQ Transport ABC transmembrane och de Premier phenotype am GC ze förderen bekannt, et ass raisonabel ze proposéieren, datt ATG-5 kann och zu Laureaten GC chemoresistance duerch verschidden onbekannt molekulare Mechanismen agebonne ginn. VerfÜgung et ass allgemeng ugeholl, datt um Terrain an Metastasen sinn zwee grouss Hürden an eis Efforten niddereg OS a DFS Iwwerliewe Taux vun GC ze verbesseren. Chemoresistance bleift ee vun de wichtegsten Grënn Virwaat ze entholl repopulation /Terrain folgenden Behandlung. Entspriechend Optioun vun individuell behandelt gëtt sécherlech positiv sinn d'Medeziner Resultat ze verbesseren; dësen, ass aktuell Behandlung Decisioun meeschtens hänkt op der TNM Etappen [27], [28]. Eis Iwwerliewe Analysë vun der 135 GC Patienten mat Etapp normal schwätzen ze IV erhéijen verroden, datt souwuel ATG-5 an MRP-1 Ausdrock konnt sech onofhängeg mat adjuvant manner Chimiotherapie den OS a DFS der Behandlung ze soe, suggeréiert, dass zu geschéckt hiren Ausdrock Niveauen Iwwerwaachung vun konventionell prognostic lues vläicht fir eng besser Evaluatioun vun Chimiotherapie Effet vun GC Patienten eis mat zousätzleche wäertvoll Informatiounen bidden. Spannen, den mir d'ATG-5 am Alkohol- resistent GC Zell Linnen overexpressed war. An silencing ATG-5 kann erëm d'Drogenofhängeger resistent Zellen ze Chimiotherapie sensitized. Eis Daten hindeit, datt ATG-5 vläicht eng Zilscheif fir chemoresistant paitents ginn. VerfÜgung aktueller Beweiser huet virgeschloen, datt autophagy ass kapabel souwuel Zell Iwwerliewe an Zell Doud ënner anere Kontexter ausléisen. Liu et al confirméiert datt duerch inhibition vun der PI3K /Akt /mTOR Passerelle, β-elemene Schutzpatrounin autophagy induce konnt GC Zellen besser upassungsfäheg stresseg Konditiounen a schützen si aus amgaang apoptosis Doud [29] ze hëllefen. Doriwwer eraus, hunn rezent Studie gewisen datt d'PI3K /Akt /mTOR Passerelle sécher dacks an mënschlechen gastrointestinal malignancies ageschalt ass [30]. D'PI3K /Akt sécher modulates och fir Premier am GC Zell duerch d'Regulatioun vun p-glycoprotein, Bcl2 an Bax [31]. Anerersäits, hunn e puer anticancer Agenten gemellt ginn mTOR sécher ze inhibit an autophagy zu Kriibs Zellen induce déi vill grouss Deeler vun der mTOR Achs [14], [32] onwiirdeg. Am Allgemengen, géif proposéieren dës Donnéeën, déi autophagy während Chimiotherapie entschlof ginn hätt, an Ennerdréckung vun autophagic Weeër autophagy inhibitor hunn benotzt Potential der chemotherapeutic Effikacitéit vun GC Patienten mat ATG-5 héich Ausdrock ze verbesseren. An ënnerstëtzen, hunn mir dass wann autophagy inhibited war, och d'Drogenofhängeger resistent Zellen fir Drogenofhängeger Behandlung sensitized sech erëm als ATG-5 Ausdrock silencing. Also, eis Resultat Ënnerstëtzung datt autophagy dréit zu chemoresistant zu Patient. VerfÜgung Am Resumé, iwwer-Ausdrock vun ATG-5, e Schlëssel molekulare Spiller vun de autophagic Passerelle, mat chemoresistance am GC verbonnen ass. Ausdrock vun ATG-5 an MRP-1 hätt fir en OS a DFS vun GC Patiente baséiert op den Ament kritt Daten als onofhängeg prognostic lues considéréiert ginn. Op der Basis vun TNM Etappen, Detectioun vun hiren Ausdrock Niveaue ka vun dëser malignant Krankheet fir besser Cepheid vun chemotherapeutic Behandlung Resultater am Patienten Leed klinesch sënnvoll ginn. Zukunft Studien Bilan vun enger grousser Zuel vu Fäll, Idealfall aus enger anerer ethnescher Hannergrond, sinn definitiv hëllt eis Conclusiounen vun dëser Etude ze confirméieren. VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
= 0,005, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 bzw.) an DFS ( P VerfÜgung = 0,004, P VerfÜgung = 0,008, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 bzw.) vun GC (Table 3). Eis Donnéen uginn der ATG-5 an MRP-1 waren enk mat de GC Entwécklung ze dinn a kann als aarm hätt lues zu GC Behandlung déngen. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung
Alkohol beschiedegt de Mikrobiom am Mond
Darmmikrobiom ännert sech beim Kachen vu Planzefudder,
Mikroben verbonne mat Häerzinfarkt fanne Studie
Mëttelmier Diät fördert e gesonde Alterung mat engem méi gesonde Darmmikrobiom
Nei Fuerschung identifizéiert e Link tëscht dem Darmmikrobiom a Strokes
Penis Mikrobiom ass Reservoir fir bakteriell Vaginose-assoziéiert Bakterien
Pankreatitis
DBauchspaicheldrüs ass laang, flaach Drüs, déi hannert dem Mo am ieweschte Bauch ass. Seng Haaptaufgab ass Enzyme ze produzéieren déi an der Verdauung vun enger Persoun hëllefen an Hormone déi reegelm
Mënschlecht Mikrobiom schneit mucosal Glycanen,
SARS-CoV-2 Infektioun beaflossen En internationalt Team vu Fuerscher huet eng Studie gemaach déi weist datt Differenzen am mënschleche Mikrobiom dFäegkeet vum schwéieren akuten Otemschwier Syndrom Cor
Allgemeng Pilz op der Haut kann entzündlech Darmkrankheet verursaachen
Therapien, déi bestëmmte commensal Pilze zielen, kënnen en neie Wee zur Behandlung vun inflammatorescher Darmkrankheet (IBD) ubidden, laut LA Fuerscher. Hannergrond | Shutterstock IBD ass