Введение Пациенты и образцы ткани <бр> в общей сложности 135 пациентов GC, состоящих из 91 мужчин и 44 женщин, перенесших операцию в отделении желудочно-кишечной хирургии, Xiangya больница, Центральный южный университет (CSU), Китай, в период с 1 января 2007 года и 31 декабря 2008 года были зачислены в эта учеба. Средний возраст когорты был 53,62 ± 9,73 лет, с диапазоном от 26 до 72. Theprimary GC опухоль незлокачественные (NC) тканей, расположенных не менее 5 см от ядра опухоли были получены после хирургической резекции и немедленно обрабатываются tissuesand совпавшего и хранили до дальнейшего использования. Ни один из набирали пациентов не имели химиотерапию или лучевую терапию до хирургической операции. Гистопатологическая диагностика проводилась в предоперационном периоде и подтверждены операции. Все участники с этапа IB до IV опухолей получили ECF химиотерапии после операции (доза: эпирубицин 50 мг /м 2 на 1-й день, цисплатин 60 мг /м 2 на 1 день и непрерывной внутривенной инфузии 5-ФУ 500 мг /м 2 /сут в течение 4-х дней, повторяется каждые 3 недели до 24 недель). Клинические характеристики этих пациентов были приведены в таблице 1. Вестерн-блот-анализ <. BR> весь клеточные экстракты, полученные с использованием 0,14 М NaCl, 0,2 М триэтаноламина, 0,2% деоксихолатом натрия, 0,5% Nonidet P-40 и с добавлением ингибитора протеазы (все продукты были от Sigma, Сент-Луис, штат Миссури , США). Затем образец белка пропускали через 12% додецилсульфата-электрофорез в полиакриламидном геле (SDS-PAGE) гель натрия и переносили на мембрану. Перенесенные мембраны затем инкубировали в течение ночи при 4 ° С с первичным антителом. После промывки мембрану инкубировали с пероксидазой хрена (HRP) -связанной вторичное антитело в течение 1 ч при комнатной температуре. Первичные антитела были анти-АТГ-5 (Santa Cruz, CA, USA), анти-LC3A /B (Abcam, Кембридж, Великобритания) и анти-β-актина (Santa Cruz, CA, USA). Все сообщили, что результаты представляют собой средние показатели трех различных независимых экспериментов. Клетки высевали на 96-луночные планшеты (10000 клеток /лунку) в течение 24 ч перед обработкой. MTT анализы были использованы для оценки пролиферации клеток в различной момент времени после лечения. Анализ МТТ проводили следующим образом: МТТ добавляли в каждую лунку и планшеты инкубировали при 37 ° С в течение 4 ч. Среда смесь МТТ затем удаляли и 150 мкл диметилсульфоксида (ДМСО) добавляли в каждую лунку. Измеряли оптическую плотность при длине волны 570 нм с использованием спектрофотометра многослойный РНК-интерференции миРНК дуплексы с таргетингом АТГ-5 были синтезированы следующим образом: миРНК-ATG5-486:. GACGUUG GUAACUGACAAATT; миРНК-ATG5-695: GUCCAUCUAAGGAUGCAAUTT и миРНК-ATG5-938: GACCUUUCAUUCAGAAGCUTT. миРНК дуплексы, содержащие неспецифические последовательности использовали в качестве отрицательного контроля (НК): UUCUCCGAACGUGUCACGUTT. Различные миРНК трансфицировали отдельно в клетках с использованием 2000 реагента Липофектамин, и среду заменяли через 6 часов после трансфекции. Выражение АТГ-5 и MRP-1 в GC
<р> Несмотря на значительное снижение его уровня заболеваемости во многих развитых странах, рак желудка (GC) остается четвертым наиболее часто диагностируется злокачественная опухоль, а второй ведущей причиной смертности от онкологических заболеваний во всем мире [1]. За последние десятилетия, стандартные мультимодальных стратегии лечения вместе с другими рекомендованными вариантами (например, D2 рассечение и адъювантной химиотерапии) не смогли вылечить большую часть пациентов, страдающих GC, особенно для тех, с передовыми и метастатических заболеваний, с худшими выживаемости будучи замеченным вероятно, из-за наличия химиотерапевтических средств во время лечения [2]. Следовательно, идентификация новых молекулярных событий, лежащих в основе развития этой злокачественной опухоли и ее плохим прогнозом, а также понимание механизмов GC химиорезистентности срочно необходимы для более эффективного клинического вмешательства и лучшего управления пациентами.
<Р> В физиологических условиях, аутофагия является лизосом-зависимой системой самообслуживания переваривание в первую очередь отвечает за вывоз и утилизацию долгоживущих белков и поврежденных /устаревших intracellularorganelles с целью поддержания гомеостаза клетки [3]. Белки и органеллы, предназначенные для уничтожения поглощенных в "двойной мембраны" вакуолей (автофагосомы), а затем путем слияния с лизосомами строить комплексы, известные как автофагосомы, где содержимое разлагаются под действием лизосомальных гидролаз [4]. Было документально подтверждено, что аутофагии может быть вызван в ответ на многочисленные неблагоприятные условия, включая недостатка питательных веществ, окислительного стресса или повреждений ДНК и служит в качестве адаптивного клеточного механизма, в конечном счете, позволяя клеткам выживать и размножаться, в то время как обширные или стойкие результаты автофагии в гибели клеток [ ,,,0],5]. Ухудшения в физиологической активации, сборки и функции аутофагической пути все чаще наблюдаются в самых различных злокачественных опухолей человека, хотя точная роль играет аутофагией в канцерогенеза и прогрессии все еще находится под спора. Некоторые данные поддерживают идею, что аутофагия подавляет онкогенеза, в то время как другие доказательства предполагают, что аутофагия способен вызвать инициацию опухоли и защищает клетки опухоли от апоптоза [6]. Интересно отметить, что ингибирование аутофагией было недавно обнаружено, повышения активности противоопухолевой нескольких цитотоксических агентов. Ли и его коллеги сообщили, что аутофагия был активирован в качестве защитного механизма против клеточных эффектов 5-FU-обработки и ингибирование аутофагии 3-метиладенина дополненной 5-ФУ-индуцированный апоптоз в клетках рака толстой кишки [7], [8]. С другой стороны, некоторые противоопухолевые препараты (например, цетуксимаб и дазатиниба) были продемонстрированы, чтобы вызвать аутофагической гибель клеток с помощью различных механизмов, в некоторых раковых клетках [9] - [13]. Молекулярный механизм, с помощью которого аутофагии регулирует выживание или гибель опухолевых клеток остается в значительной степени неясным до сих пор. Аутофагии является весьма модулированный динамический процесс преимущественно казненный семьей аутофагии связанных (ATG) генов, который регулируется несколькими ключевыми киназ, включая МРМ, PI3K /Akt, AMPK и МАРК [14], [15]. АТГ-5 является центральным регулятором необходимо для аутофагии с точки зрения его участия в аутофагосом удлинения [16]. Принудительная экспрессия АТГ-5 с повышенной чувствительностью опухолевых клеток к противоопухолевым медикаментозное лечение и в пробирке
и В естественных условиях
; контрастной киРНК-опосредованная ингибирование ATG-5 привело к частичной устойчивости к химиотерапии [17]
<р> послеоперационная адъювантная химиотерапия в настоящее время является основным средством для лечения GC. Тем не менее, общая эффективность химиотерапии остается на низком уровне, возможно, как следствие наличия множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) фенотип. В отличие от других опухолевых образований, экспрессия классических МДР-опосредующих молекул, таких как глутатион S-трансферазы и гена множественной лекарственной устойчивости 1 не очень широко распространен в ГЦ тканях, что свидетельствует о том, что может существовать сложный механизм для развития МЛУ в этом злокачественного заболевания [ ,,,0],18]. В качестве одного из классических механизмов лекарственной устойчивостью, множественная лекарственная устойчивость-ассоциированный белок 1 (MRP1 /ABCC1) было установлено, что сильно выражено в GC и, таким образом, может оказывать центральную роль в опосредовании МЛУ в GC [19], [20]. Тем не менее, остается неизвестным, является ли выражение MRP-1 связан с выражением АТГ-5. А также является ли аутофагия участвует в chemoresistence у больных ГЦ неясна.
<Р> В настоящем исследовании мы впервые использовали иммуногистохимии для изучения профиля экспрессии ATG-5 и MRP1 в сумме 135 пациентов, получавших ГК ECF (эпирубицин, цисплатин и 5-FU) адъювантной химиотерапии после хирургической резекции. Соотношения между ATG-5 и MRP-1 выражение, а также выражение их с различными клинико-патологическими особенностями GC и клинические исходы были также оценены.
Материалы и методы
<р> Все случаи в данном исследовании были рассмотрены и все образцы были гистопатологически пересмотрено в октябре 2012 года глубина инвазии стенки, региональный узел метастаза лимфатический и гистологическое сорта были подтверждены той же группой из двух опытных старших патологоанатомов. Пациенты были распределены по категориям в зависимости от состояния дифференцировки раковых клеток на три гистологических сортов: хорошо, средних и бедных. На основе сочетания опухолевого заменяющих-региональный и наличие метастаз, все случаи были поставлены в соответствии с TNM классификации злокачественных Опухоли (TNM) стадии группировки [21]. Для анализа выживаемости, дата операции была использована для представления точку начала следующего визита. Пациенты, которые умерли от других болезней, а не GC или других неожиданных событий были исключены из коллекции случая. Причиной смерти, набираемых в данном исследовании было обострение GC. Общая выживаемость (OS) была рассчитана как период, начиная с даты начальной операции до даты смерти или даты последнего наблюдения в качестве конечной точки. Болезнь безрецидивной выживаемости (ДФС) была определена как интервал времени от операции до даты местного рецидива или первого отдаленного метастаза органа. Информированное письменное согласие было получено от каждого пациента до операции, и это исследование было одобрено Комитетом по этике исследования Центрального Южного университета Китая. Все образцы были обработаны и сделаны анонимно в соответствии с этическими и правовыми руководящих принципов.
Immunohistochemistry
<р> Свежие образцы фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине, а затем врезан с парафином. В парафином ткани были разрезаны на 4 мкм, а затем депарафинировали с помощью ксилола и регидратации для дальнейшей H &Amp; E или пероксидаза иммуногистохимии окрашивания с использованием DAKO Envision системы. Вкратце, после протеолитического расщепления и блокирование с эндогенной пероксидазы, горок ткани, инкубировали с первичными антителами (ATG5: ab54033; MRP1: ab32574; Abcam Inc., Кембридж, Великобритания) против соответствующих белков-мишеней при разведении 1:500 в течение ночи при 4 ° С. После промывания PBS, меченный пероксидазой полимер и субстрат-хромоген, были затем использованы для того, чтобы визуализировать immnohistochemical окрашивание. И, наконец, секции были контрастно гематоксилином, крышка-замазали монтажной средой, и исследовали с помощью световой микроскопии. Все процедуры были выполнены в отделении патологии, Xiangya больницы, C.S.U. Слайды были интерпретированы независимо друг от друга двумя опытными патологоанатомов, которые были слепы к информации пациентов. Мы количественно интенсивность окрашивания и процент окрашенных клеток с использованием описанного выше подхода [22], [23]: процент положительно окрашенных клеток (0% -100%) умножалась на доминантному типу интенсивности окрашивания, принимая во внимание 1 как отрицательные или проследить, 2, как слабый, 3 как умеренный и 4, как сильный. Таким образом, общая оценка колебалась от 0 до 400. Пациенты были впоследствии разбиты на четыре различных подгрупп: оценка 0-99, балл 100-199, 200-299 оценка и оценка 300-400
пролиферации клеток анализ
в реальном времени RT-PCR
<р> Суммарную РНК из клеточных линий и тканей были экстрагируют с помощью тризола реагента (Invitrogen, Carlsbad, США), следуя инструкциям изготовителя. Концентрацию РНК измеряли с помощью спектрофотометра. КДНК пул синтезировали с использованием 1 мкг полной РНК и TaqMan с обратной транскрипцией реагентами (Applied Biosystems, Foster City, США), как описано производителем. Экспрессия гена-мишени оценивали с помощью относительного количественного подхода (2 -ΔΔCt метод) с бета-актина в качестве внутреннего эталона.
иммунофлюоресценции
<р> Клетки проницаемыми с 0,3 % Тритон Х-100 в течение 10 мин с последующей фиксацией с 2-4% метаналь в течение 15 мин, и блокировали 3% овечьей сыворотки при комнатной температуре в течение 60 мин. Затем, зондировали первичными антителами анти-LC3B (Santa Cruz, CA, США) в течение ночи при комнатной температуре, и клетки промывали три раза PBS. Окраска Alexa Fluor 488, конъюгированного 488 кроличьего анти-IgG козьего в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем клетки промывали три раза PBS. Ядра визуализировали путем окрашивания DAPI (Sigma, США) в течение 2 мин. Окрашенные клетки наблюдали с перевернутой флуоресцентного микроскопа.
Статистический анализ
<р> Все статистические анализы были выполнены с помощью пакета программного обеспечения SPSS 15.0 для Windows (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Были представлены количественные данные, как среднее ± стандартное отклонение. χ Пирсона тест 2 используют для сравнения разницы между ранжированных данных, в то время как тест односторонним ANOVA проводили, чтобы сравнить разницу между количественных данных. Анализы выживаемости проводили с помощью метода Каплана-Мейера и сравнивались с помощью теста логарифмического рангового. ЦОГ-регрессионной модели выполнялась для оценки независимого коэффициент риска каждой переменной в многомерном анализе. Корреляции между экспрессией ATG5 и MRP1 исследовали с использованием Двумерный корреляции (Пирсона) тест. Различия считались статистически значимыми при значения P
были меньше, чем 0,05.
Результаты
<р> характер экспрессии и расположение ATG-5 и MRP-1 в наших GC пациентов, которые лечились с эпирубицин, цисплатин и 5-FU адъювантной химиотерапии (ECF) после хирургической резекции, были изучены с помощью иммуногистохимического анализа. Среди образцов 135 GC, 105 (77,78%) оказались положительными на АТГ-5 иммунореактивности и 107 (79,26%) были MRP-1 положительно. Как показано на рисунке 1, мы обнаружили, что ATG5 был преимущественно экспрессируется в цитоплазме. Более того, избыточная экспрессия АТГ-5 положительно коррелирует с тем из MRP-1 в газовой хроматографии. (Г = 0,616, P
&л; 0,001), как показали испытания Двумерный корреляции. Положительное выражение в смежных нераковых тканей были 113 (83,70%) для ATG-5 и 89 (65,93%) для MRP-1. Данные показали, что оба АТГ-5 и MRP-1 положительно выражено в раковых и нераковых тканей, которые предполагают, что АТГ-5 и MRP-1 может быть индуцирована химиотерапии в обеих опухолевых и неопухолевых тканей. Поскольку все наши образцы пациентов обрабатывали ECF химиотерапии, и мы обнаружили, что оба АТГ-5 и были высоко выражены MRP-1 и положительно коррелируют в этих образцах. Между тем, предыдущее исследование показывает, что MRP-1, может быть связано с множественной лекарственной устойчивости в GC. Вместе с предыдущим выводом, наши результаты свидетельствуют о том, что АТГ-5 и MRP-1 могут быть вовлечены в химиорезистентности у больных ГЦ.
Ассоциации между экспрессией АТГ-5 или MRP-1 и клинико-патологическими характеристиками GC
<р> ассоциации АТГ-5 и MRP1 экспрессии с различными клинико-патологическими параметрами ГХ, показаны в таблице 1 и таблице 2, соответственно. Выражение ATG-5 был в значительной степени связано с глубиной инвазии стенки, отдаленными метастазами и TNM этапах GC ( P
&л; 0,001, P
= 0,018, P
≪ 0,001 соответственно). Выражение MRP-1 был в значительной степени связано с увеличением размера опухоли, глубина инвазии стенки, поражение регионарных лимфатических узлов, метастазирование TNM стадии ( P
= 0,032, P
&л; 0,001, P = 0,016, P &л; 0,001 соответственно) и состояние дифференцировки ( P
= 0,005). Для дальнейшего определения участия щ е ATG-5 и MRP-1 в развитии GC, мы провели анализ выживаемости в наших образцах пациентов. Наш анализ выживаемости показал, что общая общая выживаемость (ОВ) скорость нашей GC когорты был 43,70% со средней выживаемости 39.849 месяцев (95% ДИ, 35.636-44.061 месяцев); в то время как болезнь свободной выживаемости (БРВ) ставка составила 34,07% при средней выживаемости 35.802 месяцев (95% ДИ, 31.618-39.986 месяцев). Далее мы классифицировали пациентов в четырех различных подгрупп в соответствии с баллами иммуногистохимического окрашивания. Анализ выживаемости Каплана-Мейера показал более высокое выражение АТГ-5 был в значительной степени связано с ухудшением ОС ( P
&л; 0,001) и ДФС ( P
= 0,003). Парные сравнения показали, что пациенты, несущий самую высокую экспрессию АТГ-5 (баллов 300-400) имели самые бедные показатели выживаемости по сравнению с другими подгруппами (фиг.2А и 2В). Последовательно, активируемых выражение MRP-1 было установлено, что в значительной степени связано с плохой ОС ( P
= 0,001) и ДПП ( P
= 0,018) наших пациентов GC. Подгруппа с наивысшим количеством баллов экспрессии MRP1 (0-99), как представляется, худший прогноз (рис 2С и 2D) по сравнению с другими подгруппами. Наши данные также показали, что существует значительная корреляция между стадиями TNM и выживаемости пациентов с GC. Пациенты со стадией III и IV опухолей показаны худший прогноз по сравнению с теми, укрывательство стадии IB и опухоли II ( P &лт; 0,01
) (рис 2E и 2F). Более интересно, многофакторный регрессионный опасности модель Кокса показал, что уровни экспрессии АТГ-5 и MRP-1 и TNM стадии были все независимые и значимые прогностические показатели для прогнозирования OS ( P
= 0,037, P <бр> = 0,005, P
&л; 0,001 соответственно) и ДФС ( P
= 0,004, P
= 0,008, P
&л; 0,001 соответственно) GC (таблица 3). Наши данные указывают на АТГ-5 и MRP-1 были тесно связаны с развитием GC и могут служить в качестве бедных маркеров прогноз при лечении ГК.
АТГ-5 значительно усиливает свою активность в клетках химиорезистентных
<р> Для дальнейшего изучения роли ATG-5 в онкогенеза и лекарственной устойчивостью. Мы обнаружили экспрессию белка в некоторых желудочных линий раковых клеток (AGS, КУП-832, SGC7901, SGC7901 /DPP и MKN45) и в увековечена желудка человека линии эпителиальных клеток слизистой оболочки (GES). Интересно, что мы обнаружили, что АТГ-5 была значительно избыточно экспрессируется в DPP резистентной линии клеток, клеток SGC7901 /DPP, по сравнению со всеми другими клеточными линиями, которые включают DPP чувствительные SGC7901 клетки (рис 3, а). Кроме того, мы подтвердили, что SGC7901 /DPP клетки устойчивы к лечению DPP. IC 25, IC 50 и IC75 были 15,4 мкМ, 38,7 мкМ и 93,53 мкМ в SGC7901 клетках. В отличие от этого, IC 25, IC 50 и IC75 были 120.03 мкМ, 271,9 мкМ и 423,7 мкМ в SGC7901 /DPP (фиг.3В). Это примерно от 5 до 9 раз выше, чем в резистентных клетках немедикаментозных. Наше открытие наводит на мысль, что АТГ-5 способствует лекарственной устойчивостью ГХ клеток.
Подавление АТГ-5 сенсибилизированных химиорезистентных клеток к лечению наркозависимости
<р> Для дальнейшего доказать, что АТГ-5 вносит вклад в лекарственной устойчивостью ГХ клеток, мы использовали небольшие интерферирующие РНК (миРНК) в нокдаун экспрессию ATG-5. Три миРНК были разработаны. Наше ПЦР в реальном времени и результаты вестерн-блоттинга показал, что все три siРНК, ингибирует экспрессию АТГ-5 на обеих мРНК, так и на уровне белка (фиг.4А и 4В). Мы выбрали один, миРНК-ATG5-695, с высокой эффективностью бросовой выполнить следующий эксперимент. Мы нокдаун выражение АТГ-5, а затем обрабатывали клетки с DPP. Способность пролиферации клеток исследовали при 0, 48 и 72 часов после обработки. Наш результат показал, что knockdowning АТГ-5 не влияет на клеточную пролиферацию в клетках SGC7901 /DPP по сравнению с контрольной миРНК (миРНК NC). Лечение ДПП в одиночку слегка тормозил пролиферацию клеток. Интересно отметить, что когда мы нокдаун экспрессию АТГ-5 и обрабатывали клетки с DPP в то же время, способность пролиферации клеток дополнительно подавлен по сравнению с клетками, обработанными DPP в покое 48 и 72 ч после обработки (Рис 4 C). Наши данные дополнительно подтверждают, что АТГ-5 способствует лекарственной устойчивостью ГХ клеток.
Аутофагия был вовлечен в лекарственной устойчивостью из DC клетки
<р> Как АТГ-5 является центральным регулятором аутофагии, мы предположили, что аутофагии может быть вовлечен в лекарственной устойчивостью ГХ клеток. Таким образом, мы использовали 3mA, который является ингибитором аутофагия, для лечения резистентных клеток наркотиков. Как и следовало ожидать, мы обнаружили, что 3MA вместе с лечением DPP был подобный эффект с АТГ-5 kncokdown вместе с лечением DPP (рис 4C и 4D). Полученные данные показывают, что аутофагия способствует лекарственной устойчивостью. Затем мы исследовали, был ли изменен аутофагии во время лечения. Мы использовали иммунофлюоресценции для выявления уровня экспрессии LC3B, который является маркером аутофагия в клетках. Наши данные показали, что аутофагия было подавлено после глушителей АТГ-5 или обработки клеток 3MA (фиг.5А). И вестерн-блот результат еще раз подтвердил, что экспрессия белка LC3A /B была затронута только в клетках, обработанных миРНК-ATG5 или 3MA. Соответственно, пролиферации клеток была дополнительно тормозится только тогда, когда аутофагии подавлялось (рисунок 4 и рисунок 5). Таким образом, наши данные показали, что АТГ-5 был вовлечен в лекарственной устойчивостью клеток постоянного тока, который был в основном за счет влияет на аутофагию раковых клеток.
Обсуждение
<р> GC остается одним из самых частые злокачественные опухоли на глобальной основе, несмотря на его снижение уровня заболеваемости и общее число, по прогнозам, непрерывно подниматься в результате роста населения. У мужчин, GC занимает второе место в смертности; у женщин, это четвертое место в смертности [24], [25]. Коэффициент смертности ГК в Китае составил 25,2 на 100 000 [26]. В нашем исследовании, мы исследовали экспрессию ATG-5 и MRP-1 в когорте GC пациента после химиотерапии. Тогда мы показали, что АТГ-5 была в цисплатин повышающей регуляции (DDP) клеточной линии устойчивы. Кроме того, после того, как АТГ-5 экспрессии или aotophogy подавлялся, раковые клетки чувствительными к лечению DPP. Наши результаты обеспечивают новое понимание механизма химиорезистентных в прогрессии GC.
<Р> Мы оценили профиль exression АТГ-5 и MRP-1 в 135 китайских пациентов GC. В соглашении с предыдущим докладом [22], наши результаты показали, что высокий процент ГЦ тканей выражается АТГ-5, и экспрессия АТГ-5 было статистически связано с глубиной инвазии стенки, отдаленными метастазами и TNM стадии ГХ. Эти данные подтверждают мнение, что высокий уровень экспрессии ATG5 может способствовать, в некоторой степени, более агрессивной и злокачественного фенотипа в GC. Эта точка зрения подкрепляется нашей нахождения связи между высшим выражением ATG5 в GC и неблагоприятным прогнозом пациентов (см больше обсуждение ниже). Что еще более важно, мы определили положительную корреляцию между экспрессией АТГ-5 и MRP1 в нашей GC когорте. Учитывая тот факт, что MRP1 является трансмембранный транспортный белок ABC хорошо известно содействовать фенотип MDR в GC, то разумно предположить, что АТГ-5 могут быть также вовлечены в придании GC химическую устойчивость через определенные неизвестных молекулярных механизмов.
<Р> широко распространено мнение, что рецидивы и метастазирование два основных препятствия в наших усилиях по улучшению низкой ОС и выживаемость DFS на GC. Химиорезистентность остается одной из наиболее важных причин, приводящих к опухоли Репопуляции /рецидива после лечения. Соответствующий вариант индивидуального лечения будет, несомненно, полезно для улучшения клинического исхода; тем не менее, нынешнее решение лечения в основном зависит от стадии TNM [27], [28]. Наш анализ выживаемости в 135 ГК пациентов со стадией IB до IV опухолей показало, что оба АТГ-5 и MRP-1 выражение были в состоянии самостоятельно предсказать ОС и DFS после лечения с адъювантной ECF химиотерапии, предполагая, что контроль за их уровни экспрессии в комбинации обычные прогностические маркеры могут предоставить нам дополнительную ценную информацию для лучшей оценки химиотерапии эффекта у пациентов GC. Интересно, что мы обнаружили, что АТГ-5 был избыточно экспрессируется в линиях клеток GC лекарственной устойчивостью. И глушителей АТГ-5 может сенсибилизированные лекарственное средство устойчивых клеток к химиотерапии снова. Наши данные свидетельствуют о том, что АТГ-5 может быть мишенью для химиорезистентных paitents.
<Р> Накопленные данные предположил, что аутофагия способна вызвать как выживаемость клеток и гибель клеток при различных контекстах. Лю и др сообщили, что через ингибирование PI3K /Akt /MTOR токопровода, β-elemene может вызвать защитную аутофагию для оказания помощи GC клетки лучше адаптироваться к стрессовым условиям и защитить их от прохождения смерти апоптоза [29]. Кроме того, недавние исследования показали, что PI3K /Akt /МРМ сигнального пути часто активируется в желудочно-кишечных злокачественных опухолей человека [30]. Сигнализации PI3K /Akt также модулирует MDR в GC клетки посредством регуляции р-гликопротеина, Bcl2 и Вах [31]. Кроме того, некоторые противораковые агенты, как сообщалось, ингибируют передачу сигналов MTOR и вызывают аутофагию в раковых клетках путем разрушения многих основных компонентов по оси MTOR [14], [32]. В целом, эти данные свидетельствуют о том, что аутофагии может быть вызван во время химиотерапии, а также подавление аутофагии путей с использованием ингибитора аутофагии имеют потенциал для повышения эффективности химиотерапевтического у больных ГХ с АТГ-5 высокой экспрессии. В подтверждение, мы обнаружили, что, когда аутофагии подавлялось, клетки лекарственной устойчивостью также были чувствительными к лечению наркозависимости снова, как глушителей выражение АТГ-5. Таким образом, наш результат поддержки, что аутофагия способствует химиорезистентных в пациента.
<Р> Таким образом, избыточная экспрессия АТГ-5, ключевой молекулярный игроком аутофагической пути, связан с химиорезистентности в GC. Выражение АТГ-5 и MRP-1 можно рассматривать как независимые прогностические маркеры для прогнозирования OS и ДПП пациентов GC на основании полученных данных в настоящее время. На основе TNM стадий, обнаружение их уровни экспрессии могут быть клинически значимым для лучшего прогнозирования химиотерапевтических результатов лечения у пациентов, страдающих от этого злокачественного заболевания. Будущие исследования, включающие оценку большего числа случаев, в идеале из другого этнического происхождения, которые, безусловно, оправдано, чтобы подтвердить наши выводы в данном исследовании.
Замена красного мяса заменителями мяса на растительной основе снижает риск сердечно-сосудистых заболеваний
Микробиота кишечника может предсказать тяжесть COVID-19
Генетически измененные кишечные бактерии снижают риск развития колоректального рака у мышей - результаты исследования
Зачем мне нужна колоноскопия?
Оральный секс может вызвать бактериальный вагиноз
Водородное дыхание исходит не с атолла Бикини
Хронический кашель можно облегчить с помощью нового препарата
Пара исследований показала, что хронический кашель и его мучительные симптомы можно облегчить с помощью нового лекарства. Также, препарат не имеет побочных эффектов, которые могут ограничить его приме
Микробиом кишечника может сыграть роль в тяжелой форме COVID-19
Текущая глобальная пандемия COVID-19 вызвана бета-коронавирусом, тяжелым острым респираторным синдромом, коронавирусом-2 (SARS-CoV-2), который заразил более 22,1 миллиона человек и стал причиной 780 т
Изменения микробиома кишечника при приготовлении растительной пищи,
говорит новое исследование Когда исследователи из Калифорнийского университета в Сан-Франциско и Гарварда объединились, чтобы выяснить, как приготовление пищи влияет на микробиом кишечника, они обнару