Background VerfÜgung
D'molekulare Mechanismus tëscht Helicobacter pylori (H. pylori) Wonn an gastric Kriibs largement onbekannt. An dëser Etude, sech mir d'Roll vun miRNA zu H. pylori gastric Kriibs entschlof. VerfÜgung
Method an Resultater VerfÜgung
fonnt Mir datt Mir-204 zu H. rofgaang war pylori positive Stoffer vun qRT- Hinnen alleguer. Knockdown vum Mir-204 verstäerkte der Invasioun an Prolifératioun Fähegkeet vun gastric Kriibs Zellen kënschtlech. Luciferase assay Teamchef SOX4 war Zil- Gentherapie vum Mir-204, deen an-reglementéiert H. fonnt gouf pylori positive Stoffer. Down-Regulatioun vum Mir-204 an iwwer-Ausdrock vun SOX4 gefördert epithelial-mesenchymal Iwwergangsprozess. VerfÜgung
Conclusioun VerfÜgung
deelgeholl zesummen, eis Conclusiounen bewisen, dass Mir-204 als entholl suppressor Akt kann an H. pylori vun gastric Kriibs entschlof SOX4 gezielt VerfÜgung
Fro:. Zhou X, Li L, Su J, Zhang G (2014) ofgeholl Mir-204 zu H. pylori-Associéierten Gastric Cancer förderen Cancer Zell prolifération a Missiounen vun SOX4 gezielt. PLoS NËMMEN 9 (7): e101457. Doi: 10,1371 /journal.pone.0101457 VerfÜgung
Redakter: Jin Q. Cheng, H.Lee Moffitt Cancer Center & Fuerschung Institut, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung
Arnaque: 18. Mäerz 2014; Akzeptéiert: 5 Juni 2014; Publizéiert: Juli 1, 2014 VerfÜgung
Copyright: © 2014 Zhou et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Data Disponibilitéit:. D' Auteuren confirméieren datt all Daten d'Conclusiounen si voll sinn ouni Restriktioun Basisdaten. All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung
Funding:. Guoxin Zhang vum National Natural Science Foundation of China (Nr 81270476) finanzéiert gouf (http://www.nsfc.gov.cn/). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit [1]. Fir Datum, hunn molekulare Mechanismen op gastric Kriibs ënnersicht ginn, allerdéngs hu se net ganz verstan ginn [2]. Gastric carcinomas hi no engem multistep Prozess vun carcinogenesis ze entwéckelen, déi staark mat der Wonn duerch d'bakteriell pathogen, Helicobacter pylori VerfÜgung ( H. Pylori VerfÜgung) [3] verbonnen ass. H. pylori VerfÜgung, déi de Mo vun 50% vun der Weltbevëlkerung bewunnt, gouf als eng Klass ech zu der Entwécklung vun gastric Kriibs wéinst hirer causative Roll carcinogen séiert [4]. VerfÜgung Et huet confirméiert ginn datt d'Entwécklung an Werdegang vun gastric Kriibs ze microRNAs (miRNAs) kann [5] zougeschriwwen ginn - [8]. MiRNAs si kleng, Net-coding RNAs datt den Ausdrock vun Zil- Genen duerch respektiv Repressioun oder Messenger RNS (mRNA) ofgeschnidden [9] regléieren. Mir-204 huet aberrant Ausdrock Rapport mat verschiddenen Cancers ze associéieren [10], [11]. Mä, ass wéineg iwwert miRNA-204 Funktioun vun gastric Kriibs bekannt. Matsushima standing miRNA Partie Etude vun H. pylori positive Stoffer an contols a fonnt, datt Mir-204 Ausdrock war wesentlech méi déif an H. positive Stoffer pylori [12]. VerfÜgung Am Mënschen, déi Sex-Bestëmmung Regioun Y (SRY ) Këscht Famill, och zu de verstinn Famill bezeechent, regruppéiert 20 héich Faktoren conserved Transkriptiouns datt wichteg Roll an der Entwécklung vun der Aarbecht Kriibs [13] spillen. Dës Transkriptiouns Faktore si vun engem conserved Ënnerschrëft Haaptrei am Héich-Mobilitéit Grupp (HMG) DNA-verbindlech public (DBD) [14], [15] definéiert. SOX4 ass en 47-kDa FAQ héich zu vertebrates conserved ass a seng Krankheete Bedeitung huet Opmierksamkeet an de leschte Joren verdengten waarden, mat ville Rapporten, déi SOX4 suggeréiert [16] zu entholl Werdegang bäidroen kënnen, [17]. [21] - fräi SOX4 Ausdrock ass zu erhéijen vun der BBC, Aarbecht, an Colon, a mat Net-kleng-Zell haett erhéijen [18] fonnt. Dereguléierte Ausdrock vun SOX4 gouf mat méi Kriibs Zell Prolifératioun, Zell Iwwerliewe, inhibition vun apoptosis an entholl Werdegang vun gastric Kriibs [22] soll. Seng iwwer-Ausdrock huet och aarmséileg hätt an de Kliniken Zesummenhang ginn an et ass eng Bewaacher d'Resultat vun Patienten mat gastric Kriibs ze soe [23]. VerfÜgung Allerdéngs, bis viru kuerzem, ass et kloer, datt ob H. pylori Wonn kann SOX4 Ausdrock duerch verwandelt Regulatioun Mir-204 induce. Sou, standing mir eis studéieren ze weider d'Roll vum Mir-204 an SOX4 zu H. ermëttelen entschlof carcinogenesis pylori. VerfÜgung Séminairen Echantillon VerfÜgung kennen mat oder ouni H. pylori VerfÜgung Wonn um déi éischt laizistesch Hospital vun Nanjing Medical University, Jiangsu Province, China aus Mäerz 2012 an Dezember geholl 2013 Echantillon weiderentwéckelt gastroscope Équipe aus der 250 Patienten (150 noncancerous Patienten an 100 entholl Patienten) sech gesammelt, an sech positiv identifizéiert wann rapid urease Test positiv war. Dës ausgewielt Patienten goufen och déi Zell Kultur VerfÜgung SGC-7901 /MKN45 gastric Kriibs Zell Linnen ( kaaft vun ATCC) waren an RPMI-1640 mëttelfristeg cultured mat 10% an et Bovine serum nà (FBS) (Gibico) an penicillin (100 U /ml). Zellen sech mat 5% CO zu engem humidified Ambiance bei 37 ° C cultured 2. VerfÜgung bakteriell Kultur an Wonn Modell VerfÜgung H. pylori war mat 5% O bei 37 ° C an enger microaerophilic Atmosphär an der Schossel an cultured inoculated 2, 10% CO 2 an 85% N 2. No 3 Deeg, war d'bakteriell zu RPMI-1640 mëttelfristeg ouni FBS resuspended an Zellen zu engem MOI vun 100 BTS infizéiert goufen dunn no 48 h vu Wonn recoltéiert. VerfÜgung Isolatioun vun insgesamt RNS an Chemeschen RT-Hinnen alleguer Total RNAs sech aus gesammelt Stoffer an Zell Linnen ofgebaut benotzt Trizol (Tarkara, Japan) an dann zwou miRNA an mRNA sech ze cDNA ëmgedréint annescht. De Géigendeel Transkriptiouns war andems ëmgedréint Transkriptiouns Kit (Takara, Japan) gesuergt. Den Ausdrock vun alen miRNAs a Potential Zil- Genen sech duerch qRT-Hinnen alleguer mat SYBR Green Hinnen alleguer Kit (Takara) op Obwuel Biosystems StepOne-Plus Real-Time Hinnen alleguer System a mënschlech U6 RNS war wéi eng intern Kontroll Implikatioune gemooss. Der relativer Ausdrock Verhältnis vu Mir-204 war vun der 2 Immunohistochemistry VerfÜgung Stoffer sech an 4% paraformaldehyde fix an aus paraffin Spär geschnidde ze 5 μm deck. Iwwernuechtung mat citrate Natrium Prellbock (PH 6.0) an incubated mat der antibody SOX4 (Zell sécher Technology) bei 4 ° C No dewaxing mat xylene an abordablel mat engem graded Serie vun Ethanol, sech drënner an der autoclave fir dräi Minutte gehëtzt. Outil serum oder antibody dilution gefiermt gouf als negativ Kontrollen benotzt. D'geheescht antibodies waren ier déi selwecht wéi fir Western blot Analyse. Fotoen vun microsope geholl (Nikon, Sonnendäischtert 50i). D'Zuel vun positive staining Zellen immunoreactivity vun SOX4 zu zéng Vertrieder microscopic Felder war weist gezielt, an de Prozentsaz vun positive Zellen war och berechent. De Prozentsaz ukomm vun immunoreactive entholl Zelle beschriwwen huet wéi follegt: 0 (0%), 1 (1-10%), 2 (11-50%), an 3 (> 50%). D'Intensitéit war domatter wéi follegt: 0 (negativ), 1 (schwaach), 2 (moderéiert), an 3 (staark). Den Ausdrock Niveau vun SOX4 war vun multiplizéieren de Prozentsaz an d'Intensitéit stoung gemooss. Héich Ausdrock Echantillon heescht erhéijen mat engem Raum stoung erausgeet 4 während déi aner considéréiert goufen niddereg Ausdrock ze ginn. VerfÜgung Zell Prolifératioun assasy VerfÜgung Zell Prolifératioun war mat Waasser-soluble tetrazolium Salz assay iwwerpréift der Zell mat Zielen Kit-8 (Dojindo, Kumamoto, Japan). Bref, Zellen (1,5 × 10 BTS (2 × 10 BTS sech trypsinized an plated op 6-gutt Placke (500 Zellen /gutt) an cultured fir 2 Wochen. D'Kolonien sech fir 30 min no zéien mat 4% paraformaldehyde mat 1% glaskloer mauve Kierchefënster fir 30 Minutten. D'Zuel vun de Kolonien, definéiert als > 50 Zellen /Kolonie goufe gezielt. Dräi onofhängeg Experiment gesuergt. D'Daten war mat vläit t Test berechent. VerfÜgung Zell Migratioun assay (Meter-verkënnegt) VerfÜgung A Meter-verkënnegt assay benotzt gouf d'Fähegkeet vun entholl Zell motility ze bewäerten. Kuerz, Zellen (1 * 10 Zell Invasioun assay VerfÜgung Zell Invasioun Aktivitéit war mat Zell Kultur Text bedeckt mat Keller Membran Matrixentgasung évaluéieren (BD Biosciences , Bedford, MA) laut der Uweisunge d'Hiersteller. Kuerz, goufen am Ganzen 1 × 105 Zellen vun 0,2 ml serum-gratis RPMI-1640 mëttelfristeg op engem Transwell Staatsapparat rakommen. RPMI-1640 10% FBS (600 μl) wouvun war bis den ënneschten Chambre notéiert. No incubation vun den Zellen fir 24 h op 37 ° C an engem 5% CO2 incubator, Zellen op der erop Uewerfläch vun der Neiegkeet sech duerch sëlleschen mat engem Koteng Swab geläscht. Déi Zellen déi bis ënnen Uewerfläch vun der Neiegkeet eruewert huet fir 30 min, Kierchefënster zu 0,5% glaskloer mauve dann am 100% viraus-ofkillt methanol fix fir 30 min, an PBS rinsed an zu microscopic Inspektioun ënnerworf. Zellen sech am fënnef ënnerschiddleche Beräicher ënner microscope gezielt an der famill Invasioun a Migratioun sech als déi duerchschnëttlech Zuel vun Zellen ± normale deviation pro Terrain interpretéiert. VerfÜgung Western blotting VerfÜgung Total Proteinen sech bereet a laachen benotzt engem FAQ assay (BCA Method, Thermo, USA). Proteinen sech vun Natrium dodecyl sulfate polyacrylamide gelies electrophoresis fractionated (SDS-PAGE) transferéiert ze polyvinylidene fluoride (PVDF) Membran, virbildlech op 5% dréchen Mëllech bei Raumtemperatur fir 1 Stonn an immunostained mat antibodies bei 4 ° C Iwwernuechtung anti-SOX4 benotzt ( 1:1000, CST, USA), anti-N-cadherin (1:1000, CST, USA) an Anti-E-cadherin (1:1000, CST, USA). Anti-GAPDH (1:5000, Fläch, USA) war als Luede Kontroll benotzt. Resultater goufen duerch eng chemiluminescent erkennen System (Pierce ECL Realitéiten Western blot erkennen System, Thermo, Dammen an dir Hären, PA) visualized an dann an cuisine pauschal fënnt ChemiDoc XRS System (Bio-Rad, Hercules, CA) ausgesat. VerfÜgung Plasmid Bau VerfÜgung Cepheid vum Mir-204 bindend Siten war mat TargetScan Software (http://www.targetscan.org) gesuergt. 3'-UTR Haaptrei vun SOX4 déi mat Mir-204 oder e Mann- Haaptrei mat der virausgesot Zil- Siten zesummekomm virausgesot huet sech an der KpnI an SacI hin Siten vun pGL3 Promoteur Vecteure (Invitrogen). Si waren pGL3-SOX4 an pGL3-SOX4-Mut genannt. D'Zellen sech op 6-gutt Placke plated a sech mat 100 NG vun pGL3-SOX4 oder pGL3-SOX4-Mut, a Mir-204 mimics (50 nm) transfected vun Lipofectamine 2000 (Invitrogen Verletzung, CA, USA) benotzt. Mir normalized d'Differenzen an transfection Effizienz vun de Ko-transfecting engem Renilla luciferase Vecteure Praxis-SV40 (5 NG). VerfÜgung SOX4 Gentherapie war Wierderbuch (kaaft aus Genscript, Piscataway, NJ) mat restriktiv unzereegen Mlu ech mat an subcloned pLV-GFP plasmid, a benannt pLV-GFP-SOX4. Recombinant lentivirus war vun 293T Zellen mat Kalzium phosphate Nidderschlag entsteet. SGC-7901 Zell Strecken transfected mat lentivirus benotzt polybrene (8 ug /ml). VerfÜgung Luciferase Aktivitéiten Analyse VerfÜgung BTS sech cultured zu 24-och Telleren an transfected mat 0,2 μg vun entweder wäiträichenden Typ oder Mann- pGL-SOX4 plasmid Liichtkäfer luciferase wouvun, zesumme mat 0,01 μg vun der pGL-SOX4 Vecteure (Invitrogen) renilla luciferase an 1 μg oligonucleotides mat. Transfection war standing benotzt Lipofectamine 2000 reagent (Invitrogen). Relativer luciferase Aktivitéit war 48 h Post-transfection vun der Dual Luciferase Reporter Assay (Promega) berechent. All transfection Experiment an triplicate an widderholl dräimol onofhängeg gehaal. Date sinn wéi déi heeschen ± Fils ausgedréckt. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung Student d'T-Test oder eent-Manéier Analyse vun Varianz fir statistesch Analyse benotzt gouf, wou ubruecht. All Statistik analyséiert goufen mat der SPSS 17.0 (SPSS, Chicago, IL) gesuergt. A zwee-tailed Wäert vu P &Si besteet; 0,05 war statistesch relevant als VerfÜgung Mir-204 ass aberrantly verwandelt-reglementéiert H.. pylori VerfÜgung positive Stoffer an Zellen VerfÜgung Den Ausdrock vun ausgewielt miRNAs laut virdrun microarray Donnéeën [10] huet sech zu 75 Puer H. fonnt pylori positiv an negativ normal Stoffer, an 50 Puer H. pylori positiv an negativ entholl Stoffer déi real-Zäit Hinnen alleguer. Mir hu fonnt, datt Mir-204 war ee vun den Tip miRNAs verwandelt-reegelen op H. pylori Wonn (Dorënner S1A, Dorënner 1A, B). Ausserdeem gouf Mir-204 um ënneschten Niveau méi schwéieren gastritis (Dorënner 1c) ausgedréckt. Mir Verglach weider hiren Ausdrock an entholl Stoffer mat normal Stoffer, egal H. pylori Status an fonnt dass Mir-204 war am erhéijen (Dorënner S1B) wesentlech méi ausgedréckt. Mir ënnerdeelt d'Patiente mat entholl laut verschiddenen TNM Etappen an T2-T4 an M1 Patienten ausgedréckt vill manner Mir-204 wéi T1 an M0 Patienten (Dorënner S1C, S1D). Mir iwwerpréift och Mir-204 Ausdrock vun Zellen mat H. pylori Krankheet a mer fonnt hunn, datt de Begrëff vum Mir-204 zu Multiple H. wesentlech méi niddreg war pylori Zellen Krankheet wéi Kontroll (well 1D, Dorënner S1E). VerfÜgung Mir-204 Hien der Migratioun /Invasioun an Prolifératioun vu gastric Kriibs Zellen zu SGC-7901 an MKN-45 Zellen VerfÜgung Mir SGC7901 an MKN45 Zellen mat kann awer och sin-Mir-204 rescht /inhibitor oligonucleotides transfected an iwwerpréift d'Effekter op bewosst Prolifératioun a Migratioun /Invasioun. Eischtens, standing mir qRT-Hinnen alleguer d'Efficacitéit vun transfection fir z'iwwerpréiwen, wéi zu Lalumi uginn. 2A, transfection vun Zellen mat Mir-204 mimics /inhibitor zougedréckt vill Erhéijung /Ofsenkung vum Mir-204 Ausdrock Verglach mat hir negativ Kontroll (NC /INC). Meter verkënnegt assay gewisen, datt iwwer-Ausdrock vun Mir-204 Zell Migratioun oofgesinn hätt, iwwerdeems seng knockdown Zell Migratioun entschlof, mat däitlech méi Männer wéi Kontroll (Dorënner 2B). Konsequent, och Matrigel Invasioun assay gewisen, datt iwwer-Ausdrock vun Mir-204 Zell Invasioun attenuated hierkommen knockdown vun et kéinten der Häerzen (Dorënner 2C) ëmgedréint. Mir och MTT assay standing an fonnt dass den Taux vun der Raumstatioun-204 inhibitor transfected Zellen vill mat Kontrolle Verglach fräi war iwwerdeems Zellen mat Mir-204 mimics zougedréckt war de verschiddene (Dorënner 3A, B). Mir iwwerpréift och ob der Zell Zyklus géif vun der knockdown betraff sinn /iwwer-Ausdrock vun Mir-204 mat fluorescence-ageschalt Zell zortéieren (FACS) Analyse vun propidium-Kaliumiodid-Kierchefënster Zellen. Knockdown vum Mir-204 duerchgesat an engem groussen Zouhuele vun der Prozentzuelen vun Zellen an der G2 Phasen iwwerdeems iwwer-Ausdrock de Géigendeel Effet (Dorënner 3C) gewisen. Kolonie Opstellung assays Teamchef inhibition vun Mir-204 bedeitend d'Taux vun Zell Linnen (Dorënner 3D) fräi. Mir Verglach och Zell Funktiounen vun transfecting mat Mir-204 mimics mat mimics an H. pylori Wonn. Mir hu fonnt, datt Mir-204 mimics Zell Migratioun oofgesinn hätt, Iwwerfall a Prolifératioun op H. pylori Wonn (Dorënner S2). Dës Resultater zougedréckt zesummen dass verwandelt-Regulatioun vum Mir-204 entschlof vum H. pylori Wonn Migratioun /Invasioun an Zouhuelen vun der gastric Kriibs Zell Linn kënschtlech förderen. VerfÜgung Mir-204 erop-reegelen SOX4 Ausdrock vun gastric Kriibs VerfÜgung Mir identifizéiert der afgerappt Ziler vum Mir-204 vun computational Cepheid d'Mechanismen, fir duerch déi Mir-204 gastric Kriibs Zell Invasioun opgeléist. Dorënner honnerte vu Genen vun online miRNA Zil- Cepheid Websäit virausgesot (starBase, http://starbase.sysu.edu.cn/), forcused mir eis Opmierksamkeet op SOX4. SOX4 hat gemellt ginn gastric Kriibs Werdegang an EMT oder Akt als Basisdaten funktionell Zil vum Mir-204 ze regléieren. Fir d'Cepheid, duerch qRT-Hinnen alleguer an immunohistochemistry identifizéieren, hunn mir dass SOX4 war bis-reglementéiert H. positive Stoffer pylori. Seng Ausdrock ass och héich an CAG wéi CG am H. positive Stoffer pylori. (N = 75, p &Si besteet; 0,05; Dorënner 4A-C), déi inversely mat Mir-204 soll war. Benotzt Pearson d'Korrelatioun Analyse vun SOX4-Mir-204 mRNA Ausdrock, dèi mir eng statistesch relevant ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun (Dorënner S3A, R = -0,849, P = 0.002). Benotzt immunohistochemistry, mir entdeckt och déi SOX4 Ausdrock vill mat gastric Histologie verbonne war (p &Si besteet; 0,05; Table 1). Kënschtlech, hunn mir och, datt SOX4 mRNA an FAQ goufen gastric Kriibs Zellen vun H. pylori (Dorënner S3B, S3C) infizéiert an-reegelen. Mir sech dann den Ausdrock vun SOX4 an Äntwert op d'Ännerungen am Mir-204 Ausdrock. Western blot an qRT-Hinnen alleguer assays gewisen, datt iwwer-Ausdrock vun Mir-204 konnt däitlech d'mRNA verwandelt-regléieren an FAQ Ausdrock vun SOX4, iwwerdeems den Effet vun knockdown vum Mir-204 huet de Géigendeel (Dorënner 3D). Mir hunn och, datt de Wëllen vun EMT lues, N-cadherin an E-cadherin, och am Zesummenhang mat Mir-204 Ausdrock (Dorënner 4E) geännert huet, wat ugeholl, datt Mir-204 der EMT Prozess Afloss hätt. VerfÜgung SOX4 ass en direkte Zil- Gentherapie vum Mir-204 zu gastric Kriibs Zellen VerfÜgung wann SOX4 huet als direkten Zil vum Mir-204 erauskoum ginn, et kloer ass, ob Mir-204 kann direkt d'3'-UTR unerkennen vun SOX4 mRNA. Laut der virausgesot Zil- Site vun Targetscan, mir gekloonten der 3'-UTR ofgesprengt der virausgesot Site an der pGL3 luciferase reporter Vecteure (pGL3-SOX4) mat. D'3'-UTR ofgesprengt mat mutated Haaptrei am virausgesot Zil- Site war och als eng Kontroll (pGL3-SOX4-Mut) gekloonten. D'Resultater weisen, dass de Ko-transfection mat Mir-204 mimics an der pGL3-SOX4 Vecteure luciferase Aktivitéit zu SGC-7901 Zellen ofgeholl. Allerdéngs huet Mir-204 mimics net hunn den Effet op luciferase Aktivitéit wou d'Zellen mat pGL3-SOX4-Mut Vecteure (Dorënner 5) transfected goufen. Dës Donnéeë ugeholl datt SOX4 Gentherapie eng vun den direkten Ziler vum Mir-204 war. VerfÜgung Während-Ausdrock vun SOX4 den Effet vum Mir-204 huet op gastric Kriibs Zellen Invasioun VerfÜgung SOX4 als ze bestëmmen déi funktionell effector vum mir-204 zu gastric Kriibs Invasioun, mir SOX4-iwwer ausgedréckt mat lentivirus vun transfecting an iwwerpréift Auswierkunge vun gastric Kriibs Zellen. Iwwer-Ausdrock vun SOX4 an der Zell Linn war déi westlech blotting (Dorënner 6A) confirméiert. Mir hunn och, datt E-cadherin war verwandelt-reegelen iwwerdeems N-cadherin up-reegelen der pLV-SOX4 transfection war. Duerch Meter heelen an der Matrigel Invasioun assay, entdeckt mir dann dass d'Regioun-Ausdrock vun SOX4 vill Zellen Wanderung an Invasioun (Dorënner 6B an 6C) steigen. Fir sech de Verloscht vun SOX4 Trupen Prolifératioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen, Zellen mat Mir-204 mimics an SOX4 transfected fir weider beweisen, dass Mir-204 méi-Ausdrock entschlof Vecteure zesummen an d'Resultater weisen, dass d'Ophiewe vun Migratioun, Invasioun an Verbreedung vum Mir-204 huet attenuated (Dorënner S4). VerfÜgung Gastric Kriibs ass eng weltwäit Krankheet mat engem héich Heefegkeet, virun allem zu Südwestlech Asien [21]. De 5-Joer Iwwerliewe Tarif fir gastric Kriibs ass relativ héich. Verschiddener vun der gastric Kriibs Patienten goufen H. pylori dinn. Dofir ass et néideg fir Hënn der pathogenesis ermëttelen an nei cibléiert Fleeg fir H. entwéckelen pylori gastric Kriibs dinn. VerfÜgung MiRNAs sinn eng grouss Famill vun der Gentherapie Reglementatioun déi negatif hir Zil- mRNAs zu engem Haaptrei-spezifesch Manéier regléieren. miRNAs vläicht och als entholl suppressors oder oncogenes Funktioun [22]. Rezent Reproche ugeholl datt miRNAs wesentleche Rollen vun Multiple biologesche Prozesser ze Kriibs wëssenschaftlech Leeschtung, dorënner Zell dat, Prolifératioun, tumorignesis, angiogenesis, Iwwerfall a Metastasen [23]. Mir-204 gouf Untersuchungshaft Funktioun als entholl suppressor an héich-Niveau Ausdrock vu Mir-204 mat engem aarme prognostic phenotype zu Patiente mat Kriibs assoziéiert ass [24], [25]. Mä, do waren puer Studien Mir-204 Funktioun vun H. enquêtéiert pylori gastric Kriibs dinn. Hei waren mir déi éischt Beweiser ze presentéieren datt Mir-204 huet bedeitend erof-reglementéiert H. pylori positive Stoffer (normal an entholl Stoffer) an dass iwwer-Ausdrock vun Mir-204 Trupen SOX4 FAQ Ausdrock an de Wuesstem vun Zellen ofgeleet vun gastric entholl. VerfÜgung mir laachen éischt den Ausdrock vun mir-204 zu H. pylori Wonn Stoffer an Kontrollen a mir fonnt, datt de Bord-204 Ausdrock ass wesentlech méi an H. pylori Patienten infizéiert. Mir hunn och, datt de Wëllen fir d'Histologie vun de Patienten am Zesummenhang ass, datt et, d'Expressioun vun Mir-204 ass wesentlech méi an H. pylori positive Patienten mat chronescher atrophic gastritis wéi chronesch Net-atrophic gastritis. Dësen Ausdrock Muster zougedréckt datt Méiglechkeet, datt Mir-204 fir verschidden Arte vu gastritis an de méi schwéieren de Patienten goufen am Zesummenhang ass, war den ënneschten den Ausdrock vun Mir-204. Baséiert op der Raumstatioun-204 Ausdrock Niveau, kucke mer SGC-7901 an MKN45 Zellen fir d'Kierzunge gewannen-vun-Funktioun a Verloscht-vun-Funktioun Studien, bzw.. D'Resultater hindeit, datt verwandelt-Regulatioun vum Mir-204 zu gastric Kriibs Zell ass fir seng Werdegang dinn. Obwuel eng grouss Zuel vu mënschlechen miRNAs gemellt goufen, bleiwen vill vun hir mRNA Ziler onidentifizéierte [9]. An dëser Etude, déi mir eng kombinéiert Bioinformatik an experimentell Approche ze identifizéieren dass SOX4 der funktionell afgerappt Zil vum Mir-204 sinn. VerfÜgung SOX4 ass eriwwer-ausgedréckt an verschiddenen Cancers a war enk mat entholl Invasioun an Metastasen [soll ,,,0],16] - [19]. Et ass och eent vun den Memberen vun EMT-transcriptional inducers [26]. EMT ass e Schlëssel Entwécklungsphase Programm datt oft während Kriibs Werdegang ageschalt ass a Resistenz zu Therapie Promotioun kënnen [27]. Zhang et al [20] weisen datt overexpression vun SOX4 zu Mënsch mammary epithelial Zellen fir d'Acquisitioun vun mesenchymal Spure geleet, an deen Eck Zell Wanderung an Invasioun. Ausserdeem, SOX4 positiv dem Wëllen vun bekannt EMT inducers reglementéiert an ageschalt der TGF-β Passerelle fir EMT [28] ze bedeelegen. Fir Datum, ass EMT eng attraktiv Zil fir therapeutesch Interventiounen, gëtt eng nei Basis vun de Werdegang vun carcinoma Richtung dedifferentiated a méi malignant Staaten [29]. Eis Etude awer éischtens, datt H. pylori Krankheet entschlof Mir-204 verwandelt Regulatioun ze gastric Kriibs vun EMT Prozess Féierung konnt. VerfÜgung Fir ofzeschléissen, eis Beweiser uginn dass Mir-204 huet verwandelt-reegelen, iwwerdeems SOX4 war Bastelen zu H. pylori Wonn an gastric Kriibs reegelen. Ectopic Mir-204 Ausdrock ofgeholl SOX4 Ausdrock um mRNA an FAQ Niveauen an der gastric Kriibs Zell Linn. Mir bewisen, och dat Mir-204 direkt un der 3'-UTR vun SOX4 gebonnen huet. Mir-204 Ausdrock EMT via Repressioun vun SOX4 inhibited. Doriwwer, dass de Bord-204-EMT Passerelle mir fir d'Behandlung vun H. pylori Zesummenhang Cancers an eng therapeutesch Approche exploitéiert ginn. VerfÜgung spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
identifizéiert ka Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung (A) Den Ausdrock vun 5 miRNAs zu H pylori positiv an negativ Stoffer vun qRT-Hinnen alleguer festgestallt gouf. (B) Den Ausdrock Niveau vun Mir-204 zu entholl a Kontroll Stoffer. (C) Den Ausdrock Niveau vun Mir-204 laut TNM Etappen. (D) Den Ausdrock Niveau vum Mir-204 an dräi Zort H. pylori Krankheet Zellen. (* P &Si besteet; 0,05) VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0101457.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S2. VerfÜgung BTS transfected mat Mir-204 mimics an mimics mat H. pylori Wonn an (A) viabilities sech mat CCK-8 assay (B) D'Biller op 0 h (uewen) an 24 h (ënnen) Post-wounding fotografeschen sech um Vergréisserung vun x200 (C) d'Vertrieder Biller vun invasiv Zellen an der leschter vun de mat glaskloer mauve Kierchefënster Membran gewisen huet sech wéi dës visualized. (* P &Si besteet; 0,05) VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0101457.s002 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S3. VerfÜgung (A) D'famill mRNA Ausdrock vu Mir-204 an SOX4, normalized mat U6 an GAPDH, war vun 15 Beem uplanzen vun H. évaluéieren pylori positiv an negativ Stoffer vun qRT-Hinnen alleguer. (B) An ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun vun SOX4 an Mir-204 Ausdrock Niveauen war iwwerpréift (R = -0,920, P = 0.001). (C) Den Ausdrock vun SOX4 mRNA war vun qRT-Hinnen alleguer zu H. alles pylori Krankheet Zellen. (D) Den Ausdrock vun SOX4 FAQ Niveau war déi westlech blot an H. alles infizéiert Zelle pylori. (* P &Si besteet; 0,05) VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0101457.s003 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S4. VerfÜgung BTS transfected mat Mir-204 mimics an mimics mat pLV-SOX4 a (A) viabilities sech mat CCK-8 assay (B) D'Vertrieder Biller vun invasiv Zellen an der leschter vun de mat glaskloer mauve Kierchefënster Membran alles sech visualized wéi gewisen. (C) D'fotografeschen Biller op 0 h (uewen) an 24 h (ënnen) Post-wounding sech um Vergréisserung vun x200 (* p &Si besteet; 0,05) gewisen VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0101457.s004
(TIF) VerfÜgung
Nei entdeckt grouss Phagen verschwannen d'Liewen/Net-Liewensgrenz
Nei Studie kéint hëllefen fatale Infektiounen bei Puppelcher ze vermeiden
Immunzellen reparéieren beschiedegt Darm bei Kanner mat IBD
SARS-CoV-2 Infektioun verlängert viral Verloscht a Lymphozytenverloscht bei Patienten mat Kriibs
Gutt Immunzellen kéinte verantwortlech si fir de Stoffwiessel Ännerungen fënnt Studie
Strategiséiert pädiatresch Gesondheetsariichtung fir déi zweet Welle vun der COVID-19 Pandemie
Wéi hëllefen Hostfaktoren wéi de Lungemikrobiom bei der SARS -CoV -2 Infektioun?
Schwéier akut respiratorescht Syndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) ass en RNA Virus deen zu der Coronaviridae Gatt an der Betacoronavirus Subgenus gehéiert. Et ass de Roman an héich ustiechende Pathogen
Wëssenschaftler extrahéieren de komplette mënschleche Genom aus engem Dausende vu Joer alen "Knätschgummi"
Et schéngt, datt Kaugummi keen neien Trend ass! Fuerscher hunn Kaugummi fonnt dat ass 5, 700 Joer al an et huet Hiweiser iwwer antike DNA geliwwert. Eng Studie mat de Befunde gouf am Journal publizéie
Leit mat IBS Symptomer hu wahrscheinlech niddereg Niveaue vu Vitamin D,
Etude weist Wann Dir ee vun deenen zwee an zéng Leit sidd, déi un Irritabelen Darm Syndrom (IBS) Symptomer leiden wéi Blähungen, Bauchschmerzen a Verstopfung, et ass héchstwahrscheinlech datt Dir nidd