Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastric Cancer > Gastric Cancer

PLOS NËMMEN: Intratumor Hypoxia förderen immun Toleranz vun Regulatioune Pinguin T BTS via TGF-β1 zu Gastric Cancer

Wat VerfÜgung

Regulatioune T Zell (Treg) immunosuppression -mediated immun virleien Mechanismen eent vun den entscheedende entholl duerstellt an ass engem Haaptgrond Hindernis fir erfollegräich entholl immunotherapy. Hypoxia, eng gemeinsam Fonktioun vun zolidd erhéijen, huet mat potentiated immunosuppression verbonne gouf, ofgeholl therapeutesch Äntwert, malignant Werdegang a lokal Invasioun. Leider, bleift de Lien tëscht hypoxia an Treg-mediated immun Toleranz an gastric Kriibs ganz wéineg verstan. An eiser Etude, goufen Tregs an hypoxia inducible Faktor-1α fonnt mat all aner gin positiv soll a sech mat der entholl Werdegang fräi. A nächster kënschtlech VerfÜgung Étude uginn, datt aus gastric Kriibs Zellen ënner hypoxic Conditioun ofgeleet supernatants, hätt dem Wëllen vun Foxp3 via TGF-β1 induce. Dës Conclusiounen confirméiert déi enorm wichteg Roll vun Tregs wéi eng therapeutesch Zilscheif vun gastric Kriibs Therapie a gëtt hëllefräich Gedanken fir den Design vun immunotherapy fir gastric Kriibs an der Zukunft VerfÜgung

Fro:. Deng B, Zhu JM, Wang Y, Liu TT, Xing YB, Xiao Courssen, et al. (2013) Intratumor Hypoxia förderen immun Toleranz vun Pinguin Regulatioune T BTS via TGF-β1 zu Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 8 (5): e63777. Doi: 10.1371 /journal.pone.0063777 VerfÜgung

Redakter: Nupur Gangopadhyay, Universitéit vu Dammen an dir Hären, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung

Arnaque: 10. Januar 2013; Akzeptéiert: Abrëll 6, 2013; Publizéiert: Mee 27, 2013 VerfÜgung

Copyright: © 2013 Deng et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Etude war vun der Shanghai Wëssenschaft an Technologie Kommissioun (10410709400, 10411950100), National Natur Science Foundation of China (81000968, 81101540, 81101637 oder 81172273) an der National Séminairen Key Special Betreff vun China ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs stellt ee vun de meescht genannten Grenn vun Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll weltwäit [1]. Trotz groussen Schrett an diagnostic an therapeutesch Approche während de leschte Joerzéngten, bleift d'Iwwregens hätt vun gastric Kriibs net dat wéinst hirem héijen Terrain an Metastasen [2]. Immunocytes hunn laang wéi e Faktor Spur entholl Wuesstem vun der entholl microenvironment [3], allerdéngs, d'Basisdaten molekulare Basis bleift gréisstendeels Déift unerkannt ginn. E bessere Verständnis vun de Mechanismen an gastric Kriibs gëtt positiv effikass therapeutesch ofgeséchert ze entwéckelen. VerfÜgung

Intratumor hypoxia ass eng gemeinsam Fonktioun vun zolidd erhéijen, deen de Werdegang vun erhéijen vun activating Schlëssel biochemical a bewosst Weeër Afloss kéint [4 ], [5], [6]. Etuden bewisen, och dass hypoxia enger Jarnéier Roll an entholl-mediated spillt immun Ennerdréckung, Contributioun der immunological Auswee vun erhéijen ze erhalen [7], [8]. Kuerzem, gouf zu spillt Kriibs etabléierten engem bestätegt Lien tëscht entholl hypoxia an immun Toleranz duerch de Rekrutement vun reglementaresche T Zellen (Tregs) [9]. Soumat huet eng Hypothes virgestallt gouf, datt hypoxia Hindernisser fir therapeutesch immun Interventiounen suerge kann. VerfÜgung

erhéicht Tregs hunn an der Circulatioun an entholl Stoffer vun Patienten mat verschiddenen Cancers, dorënner gastric Kriibs, colorectal Kriibs, hepatocellular carcinoma gemellt ginn an pancreatic Kriibs [10]. Aktueller Donnéeën annoncéiert och dass d'Präsenz vun Tregs duerchgesat an eng grouss Gefor fir de Werdegang vun Kriibs [11], [12], [13]. Ausserdeem, ass Treg-mediated immunosuppression als eent vun den entscheedende immun virleien Mechanismen entholl gin woubäi se d'Anti-entholl Aktivitéit vun CD8 cytotoxic Zell, dendritic Zell an natierlech Mäerderer Zell [14] zu iwwerwanne kënnen. Sou, Opkläerungsaarbecht vun der Basisdaten Mechanismus vun Treg Beräicherung an gastric Kriibs gëtt fir gezielt Tregs fir engem virdeelhaft Medeziner Resultat vun Wäert ginn. Obwuel d'Mechanismen net gutt verstane ginn, hunn e puer Studien uginn dass TGF-β1 an et Équipe ass [15]. VerfÜgung

An dëser Etude, Hypothes mir dass gastric Kriibs eng selektiv Virdeel vun Aféierungs- vun Tregs ënner hypoxia Kaf kënnen via TGF-β1 sécher Passerelle domat immun Iwwerwaachung hannerzéien. Fir eis Hypothes hindeiten, analyséiert mir den Ausdrock vun hypoxia inducible Faktor-1α (HIF-1α) an Foxp3 zu gastric Kriibs Stoffer, évaluéieren d'Wierkung vun hypoxia op TGF-β1 Produktioun vun Kriibs Zell Linnen, an opgekläert endlech d'Roll vun hypoxia mediating Treg Beräicherung an gastric Kriibs. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

kennen an uplanzen VerfÜgung

Paraffin-Ënnerbewosstsinn, formalin-fix entholl Rubriken sech aus 99 Patiente mat gastric Kriibs kritt dat mécht Operatiouns- resection vum Dezember 2006 bis Februar 2008 bei der zweeter Séminairen Medical School vun Yangzhou Universitéit. Follow-up Date goufen den Oktober vun 2012 mat engem Steiren Suivi vun 53 Méint (Rei 4-70 Méint) zesummegefaasst. Allgemeng Survival (OS) war wéi aus der Zäit vun Agrëff definéiert zu lescht Suivi oder Zäit vum Doud. VerfÜgung

Randerscheinung Blutt Echantillon waren ier vun 20 Patiente mat gastric Kriibs een Dag gesammelt an 10 Deeg nom Agrëff vum Juli 2012 bis Oktober 2012. Sera bei -80 ° gefruer waren C direkt no centrifugation fir Zukunft benotzen. Randerscheinung Blutt mononuclear Zellen (PBMCs) goufen direkt vun engem Ficoll Dicht packt isoléiert. VerfÜgung

Näischt vun de Patienten immunosuppressive Drogen oder Chimiotherapie virun chirurgesch resection dobäi haten. D'Etude gouf vun der Ethik Comité (IFLA- Comité vum Zweete Séminairen Medical School vun Yangzhou University, Yangzhou) abruecht, a schrëftlech informéiert Autorisatioune goufen aus all Etude Participanten kritt. VerfÜgung

Immunohistochemical Staining VerfÜgung

Serial Sektiounen (5 μm) vun formalin-fix, paraffin-Ënnerbewosstsinn uplanzen gemaach goufen. Sektiounen sech zu graded Alkohol deparaffinized an rehydrated. Antigen retrieval war vun bestéet d'drënner an héich ass an engem Schleck erëm fir 10 Minutte gesuergt. Kanéngchen anti-Mënsch HIF-1α Primärschoul antibody (bioworld, USA), Maus anti-Mënsch TGF-β1 antibody (Santa Cruz, USA) a Maus anti-Mënsch Foxp3 antibody (Abcam, USA) huet fir d'alleréischt antibodies benotzt. Diaminobenzidine (botzt) war fir Realitéiten folgenden counterstaining mat hematoxylin fir eenzel staining benotzt. Double staining war mat 2 verschidden chromogens gesuergt:. Botzt chromogen (brong Faarf) fir HIF-1α an fast-rout chromogen (rout Faarw) fir TGF-β1 oder Foxp3 VerfÜgung

Immunoreactivity Buteur VerfÜgung

HIF -1α Keimzell staining war folgenden d'Untersuchungshaft Method [16], staining stoung = Intensitéit vun immunoreactivity (asetzen) × Undeel vun positif Kierchefënster Zellen bewäert. Asetzen Intensitéit gouf an véier Kategorien stratified: 0, kee asetzen; 1, schwaach asetzen; 2, mëttelméisseg staark asetzen; an 3, staark asetzen. Den Undeel vun positive Zellen war an fënnef Gruppen séiert: 0, kee staining; 1, &Si besteet; 2% staining; 2, 2-10% staining; 3, 11-29% staining; a 4, &plain. 30% staining VerfÜgung

A geännert ukomm System war fir Foxp3 + Zellen benotzt [17]. Zéng Felder sech op héich-Muecht fir Foxp3 gezielt. Der absoluter Zuel vun lymphocytes pro héich-Muecht Terrain (HPF 400) war alles. Déi heeschen Zuel vu positive Kierchefënster Zellen pro héich-Muecht Felder war berechent. VerfÜgung

Zell Kultur an Hypoxia Schulung VerfÜgung

Mënscherechter gastric Kriibs Zell Linnen, AGS an BGC823, vun Shanghai Institut vun Zell kritt huet Biologie, Chinese Akademie vun de Wëssenschaften (Shanghai, China). All Zellen sech an 5% CO 2 op 37 ° C an DMEM oder RPMI 1640 (HyClone Tianjin, China) ergänzt mat 10% FBS (Gibco, Australien), 100 U /ml penicillin an 100 mg /ml streptomycin propagated ( HyClone Tianjin, China). Fir hypoxia Experimenter, goufen Zellen rakommen an 6-gutt Placken, zweemol mat PBS zou wann se bis 60-80% Niewebaach opgewues, huet zu serum-gratis AIMV mëttelfristeg (Invitrogen, USA) fir eng incubation iwwernuecht, an dann an engem tip gesat incubator ëmkomm (Ruskinn Bauten, YK) fir 24 h ënnert hypoxic (1.0% O 2) oder normoxic (21% O 2) Konditiounen, souwuel mat 5% CO 2 op 37 ° C. Supernatants sech bei -80 ° C fir spéider Determinatioun vun Konzentratioune vun TGF-β1 a fir Co-Kultur assay gesammelt a gespäichert. All kënschtlech VerfÜgung Confirmatioun Experiment mannst triplicate duerchgefouert. VerfÜgung

Immunofluorescence VerfÜgung

D'Zellen (1 × 10 5 /gutt) op coverslips zu engem plated sech 24-gutt zappen fir eng 24 h Kultur. Duerno, waren se fir 30 min an kal methanol fix fir aner 30 min permeabilized mat 0,5% TritonX-100 ze ginn. Zellen sech fir 30 min dräimol, blockéiert vun 10% Geess serum vun PBS gewäsch, an incubated mat anti-Mënsch TGF-β1 antibody (Santa Cruz, USA) an Anti-Mënsch HIF-1α antibody (Epitomics, USA) zu engem Frigo op Iwwernuechtung 4 ° C. Der Primärschoul antibody war via alexa488-conjugated zweet antibody (Invitrogen, USA) an Alexa fluor 594-conjugated zweet antibody (Invitrogen, USA) bzw. fonnt. D'coverslips goufen ënner OLYMPUS florescence microscopy iwwerpréift. VerfÜgung

RNS erauszéien a Chemeschen Real-Zäit Hinnen alleguer (qPCR) VerfÜgung

All vum zwou Zell Linnen beschriwwen uewen am triplicate Wells ënner normoxic oder hypoxic Konditiounen cultured war , wéi uewe beschriwwen. Total RNS gouf direkt aus normoxic oder hypoxic Zellen um Enn vun der Experimenter isoléiert, mat Trizol reagent (Invitrogen, USA). Total RNS (5 NG) war ëmgedréint ausserdeem benotzt cDNA Réckproduktioun Transkriptioun Trikoten (TaKaRa, Dalian, China), no den Hiersteller d'Uweisungen. qPCR gouf zu engem SYBR Green Hinnen alleguer Master Mix (TaKaRa, Dalian, China) gehaal. Fantastesch Ännerungen an den Ausdrock vun all TGF-β1 mRNA famill ze GAPDH waren op der loung Zyklus (Kosovo) als 2 (ΔCt) berechent baséiert, wou ΔCt = CT Zil- - CT GAPDH an Δ (ΔCt) = ΔCt hypoxia - ΔCt normoxia. D'TGF-β1 primers huet: no, 5'-GCCAG AGTGG TTATC TTTTG ATG-3 "; Géigendeel, 5'- AGTGT GTTAT CCCTG CTGTC AC -3 ", an der GAPDH primers huet: no, 5'- GGACC TGACC TGCCG TCTAG AA-3"; Géigendeel, 5'-GGTGT CGCTG TT GAAGT CAGAG-3 ". qPCR war zu triplicate. VerfÜgung

Aktivitéit-Hausnummeren Immunosorbent Assay (Elisa) VerfÜgung

D'Konzentratioun vun TGF-β1 an der Kultur supernatants an Sera standing alles war en Elisa Kit (eBioscience, San Diego benotzt, CA) no der Taktik vum Produzent. VerfÜgung

Isolatioun a Kultur vun T Zellen VerfÜgung

PBMCs vun Donateuren goufen indirekt mat biotin-antibody bocktail Fortgeschratten an Anti-biotin MicroBeads. CD4 + T Zellen sech duerch negativ Auswiel getrennt laut den Hiersteller d'Instruktioune (Miltenyi Biotec, Däitschland). CD4 + T Zellen sech direkt mam Label mat CD25 Mikro-Glaspärelen an CD4 + CD25 - T Zellen duerch negativ Auswiel isoléiert sech geméiss den Hiersteller d'Instruktioune (Rengheet > 95%; Miltenyi Biotec, Däitschland) . D'supernatants aus cultured AGS Zellen ënner normoxic oder hypoxic Konditiounen gesammelt goufen verdënntem mat frëschen AIMV mëttelfristeg (1:3), genannt normoxic mëttel- a hypoxic mëttelfristeg, bzw.. Eng total vun 1.0 × 10 6 /ml CD4 + CD25 - T Zellen sech stimuléiert mat anti-CD3 /CD28-Beschichtete Glaspärelen (1:5; Invitrogen, USA) ± IL-2 (200 U /ml; Peprotech) fir 72 h an AIM-V serum-gratis mëttelfristeg (Kontroll mëttelfristeg), normoxic mëttel- oder hypoxic mëttelfristeg. An e puer Experimenter, recombinant Mënsch TGF-β1 (2 Dummeldéng /ml; R & D Systemer, USA) an TGF-β1 receptor kinase inhibitor LY-364947. (5 μM; Merck, Däitschland) sech un d'Kulturen dobäi VerfÜgung

Flow Cytometry VerfÜgung

Phenotype Analyse vun Tregs war mat enger BD FACS AriaII standing Flux cytometer (BD, USA). Kuerz, goufen d'Zellen mat CD4-FITC an Foxp3-PE (eBioscience, San Diego, CA) folgenden Fabrikant d'Protokoll ausgezeechent. Ze analyséieren, déi prevalence vun Tregs, CD4 + Foxp3 + T Zellen no esou doran op CD4 bewäert goufen + T Zellen a sech als Prozentsaz vum Gesamtakommes CD4 + T Zellen ausgedréckt.

statistique Analys VerfÜgung

sech statistique Analysë op SPSS 17,0 fir Windows gehaal. Ënnerscheeder tëschent Gruppe waren mat enger eenzeger-Manéier ANOVA, Mann-Whitney U Test oder χ 2 Test analyséiert, wou ubruecht. D'Korrelatioun gouf vun engem Pearson Korrelatioun iwwerpréift. Entwéckele Iwwerliewe Zäit war via Kaplan-Meier an analyséiert via d'Logbuch-Platz Test berechent. Date sinn ausdrécke wéi heescht ± Sem. Statistique Bedeitung opgeriicht um P VerfÜgung &Si besteet;. 0,05 VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

HIF-1α an Foxp3 Expression zu Gastric Cancer Stoffer VerfÜgung

No histological Confirmatioun vun gastric Kriibs (Figebam. 1A, ieweschte-lénks a verwandelt-lénks), ze propagéieren mir den Ausdrock vun HIF-1α an Foxp3 vun immunohistochemistry zu 99 Patienten. HIF-1α mat niddereg Ausdrock (Figebam. 1A, uewen) an héich Ausdrock (Figebam. 1A, verwandelt) gouf virun allem an der Zytoplasma an helle Kriibs Zellen am entholl Spillraum fonnt, an nëmmen nuklear HIF-1α staining markéiert. Dat interessant ass datt notéieren, an e puer Fäll, lymphocytes zougedréckt och staark Ausdrock vun HIF-1α. Foxp3 mat niddereg Ausdrock (Figebam. 1A, ieweschte-riets) an héich Ausdrock (Figebam. 1A, verwandelt-riets) an den helle lymphocytes gesi gouf, déi meescht vun deenen an der entholl Spillraum etabléiert huet. VerfÜgung

Next den Ausdrock vun HIF-1α an Foxp3 zu entholl Stoffer, sech an Patienten mat nonmetastatic (n = 52) an metastatic (n = 47) gastric Kriibs Verglach. Béid der Moyenne stoung vun HIF-1α an der Zuel vun Foxp3 + Zellen zu metastatic Patienten war méi héich wéi zu nonmetastatic Patienten (HIF-1α, 7,69 ± 0,45 vs 5,41 ± 0,40, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 , Lalumi 1B, lénks of. Foxp3, 14,61 ± 1,01 vs 8,07 ± 0,95, P VerfÜgung &si besteet; 0,001, Lalumi 1B, riets) VerfÜgung

Bezéiung tëscht OS a HIF-1α oder Foxp3.. zu Gastric Cancer Stoffer VerfÜgung

als leschte Suivi, 50 vun 99 (50.5%) Patienten goufen lieweg, mat engem Steiren Suivi vun 64 Méint (Rei 57-70), wobäi 49 Équipe vun Krankheet gestuerwen mat engem Steiren Zäit fir den Doud vun 28 Méint (Rei 4-64). Ass, fir sech d'Relatioun tëscht dem Wëllen vun HIF-1α oder Foxp3 an OS, HIF-1α als negativ kategoriséiert (n = 34; Fändelen ≤4) oder positiv (n = 65; Fändelen > 4), während war Foxp3 kategoriséiert wéi héich (n = 51F) oder héich (n = 48) an de Steiren Zuel (8.6 Zellen /HPF) wéi der cutoff benotzt. An eiser Etude, OS zu Foxp3-niddereg Grupp war vill méi héich wéi zu Foxp3-héich Grupp ( P VerfÜgung = 0,017, Figebam. 1c, lénks), während HIF-1α-negativ Grupp bedeitend méi héich wéi d'HIF war -1α-positiv Grupp ( P VerfÜgung = 0,009, Fig.1C, riets). VerfÜgung

Association tëscht HIF-1α oder Foxp3 an Clinicopathologic Charakteristiken VerfÜgung

D'Korrelatioun tëscht clinicopathological Fonctiounen an Ausdrock vun HIF-1α oder Foxp3 gouf bewäert (Table 1). Nee Korrelatioun war tëscht HIF-1α oder Foxp3 Ausdrock an Alter oder Geschlecht vu Patienten, souwéi entholl Gréisst fonnt. Allerdéngs, et war eng Erhéijung vun den positiven Taux vun HIF-1α mat Déift vun entholl Invasioun ( P = VerfÜgung 0.013). oder Foxp3 ( P VerfÜgung = 0.008) an entholl Bühn; A ähnlechen Trend war och tëscht den Ausdrock vun HIF-1α (0.001 P VerfÜgung &Si besteet) fonnt. Ausserdeem, war e wesentleche Korrelatioun tëscht lymph Node Metastasen an den Ausdrock vun HIF-1α ( P VerfÜgung = 0.029) oder Foxp3 ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) fonnt VerfÜgung

. Relatioun tëscht HIF-1α an Foxp3 oder TGF-β1 zu Gastric Cancer Stoffer VerfÜgung

d'uewendriwwer-ernimmt immunohistochemical Resultat uginn, datt d'Zuel vun Foxp3 + Zellen war vun staarke positive Korrelatioun mat de Virsprong vun HIF-1α zu Patiente mat Metastasen (r VerfÜgung = 0,772, P VerfÜgung &si besteet; 0,001;. Lalumi 2A, lénks), mee net an Patienten ouni Metastasen ( r = VerfÜgung 0,461, P VerfÜgung = 0,001;. Lalumi 2A, riets). Mir standing dann immunohistochemical double-staining der Präsenz vun coexpression tëscht HIF-1α an Foxp3 oder TGF-β1 ze diskutéieren. D'Resultater weisen, datt Foxp3 + Zellen haaptsächlech am Siten no hypoxic entholl Regioun mat héijer HIF-1α Ausdrock Board (Figebam. 2B). Ausserdeem, goufen déi héich HIF-1α entholl Zellen héich Ausdrock vun TGF-β1 (Figebam. 2C). VerfÜgung

libre Tregs an TGF-β1 zu Pre-Agrëff an Post-Chirurgie kennen VerfÜgung

Fir fir d 'Relatioun tëschent Tregs an der Konzentratioun vun TGF-β1 an der serum, CD4 + Foxp3 + T Zellen sech am Patienten mat gastric Kriibs via Flux cytometry (Figebam. 3A) analyséieren. D'Frequenz vun Tregs virum Agrëff war méi héich wéi déi an der Chirurgie (9.84 ± 0,40% vs 8,47 ± 0,33%, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, Lalumi 3B.). TGF-β1 Konzentratioune der Chirurgie ofgeholl däitlech wann mat deenen virum Agrëff Verglach (6431.95 ± 629,24 vs 7581,56 ± 556,45 PG /ml, P VerfÜgung = 0,005, Figebam. 3C). Eng positiv Korrelatioun tëscht Treg Frequenz an TGF-β1 Konzentratioun war zu serum virun Operatioun ( r VerfÜgung = 0,454, P VerfÜgung = 0,044, Figebam. 3D). VerfÜgung

fonnt TGF -β1 ass immens Upregulated zu gastric Cancer Zell zesummeféieren ënner hypoxia VerfÜgung

fir identifizéieren ob hypoxia der secretion vun TGF-β1 zu gastric Kriibs Zellen induces, goufen d'TGF-β1 Niveauen an zwee gastric Kriibs Zell Linnen, AGS propagéieren an BGC823, ënnert hypoxic oder normoxic Konditiounen. D'mRNA Ausdrock vun TGF-β1 ënner hypoxia fräi war am Verglach mat normoxic Konditiounen (Figebam. 4A). Konsequent mat qPCR, déi TGF-β1 Niveau vun der Kultur supernatant zougedréckt ähnleche Resultater (Figebam. 4B). Weider huet d'Ausstralung vun TGF-β1 an HIF-1α och vun immunofluorescence fonnt, a weisen d'Resultater TGF-β1 an HIF-1α Ausdrock ënner hypoxic Konditiounen fräi wann Verglach mat deem vun ënner normoxic Konditiounen (Figebam. 4, C). VerfÜgung

hypoxia Lamb d'Kapazitéit vun Pinguin Tregs via TGF-β1 zu Gastric Cancer Zell zesummeféieren VerfÜgung

d'Hypothes fir Test datt hypoxia-entschlof TGF-β1 fir d'Erhéijung vun Tregs dréit, libre CD4 + CD25 - T Zellen aus gesond Persounen goufen mat supernatants vun Zellen ënner verschiddene Konditiounen behandelt. De Punkt Diagrammer weisen verschidden Medien den Ausdrock vun Foxp3 zu CD4 Pinguin + T Zellen (Figebam. 5A). D'Foxp3 Ausdrock vun T Zellen zu normoxic mëttelfristeg, hypoxic mëttel- a recombinant Mënsch TGF-β1 mëttelfristeg all als Verglach mat der Kontroll mëttelfristeg eropzesetzen ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Foxp3 Ausdrock vun der hypoxic mëttelfristeg Ausserdeem war wiesentlech méi héich ass wéi an der normoxic mëttelfristeg (13.04 ± 0,74% vs 6,76 ± 0,35%, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, Lalumi 5B.). Weider, wéi LY-364947 un all Zort vun mëttelfristeg derbäi war, ofgeholl der Foxp3 Ausdrock weess ( P VerfÜgung &Si besteet;. 0,001, Lalumi 5C). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Zënter de leschte Joerzéngt, huet zouginn Reproche ugeholl datt Tregs fir d'Opstelle vun erhéijen vun impairing der antitumor immun Äntwert, oder souguer stimuléieren Metastasen direkt [18], [19] bäidroen. Beweiser am leschte Joer krut hien Ofstänn vun intratumoral Tregs zu gastric Kriibs fräi, déi zu encadréiere clinicopathological Fonctiounen an den armen hätt verbonne goufen [20], [21], [22]. Konsequent mat deene virdrun gemellt Resultater, eiser Etude gëtt Beweis datt d'Frequenz vun entholl-infiltrating Tregs mat Zäit geholl entholl Etappen fräi. Doriwwer eraus, gëtt Tregs och en hätt Faktor fir Post-Agrëff vun gastric Kriibs. Zousätzlech, bestätegt mir dass d'Zuel vun Tregs zu metastatic gastric Kriibs si vill méi héich wéi zu nonmetastatic gastric Kriibs. D'virun Resultater Krediter Ënnerstëtzung fir d'Notioun dass Tregs ze entholl Werdegang bäidroen kënnen an engem Potential therapeutesch Zil fir gastric Kriibs kann. Mir envisagéiert also nächst der Basisdaten Mechanismus mediating Treg Beräicherung an gastric Kriibs ze entdecken. VerfÜgung

entholl hypoxia ass och e wichtege Faktor unerkannt geplatzt Behandlung Resistenz an aarme hätt fir gastric Kriibs [6], [16], [ ,,,0],23]. HIF-1α, wéi den Haapt molekulare Ënnerschrëft fir hypoxia, ass den Haaptgrond afgerappt regulator vun der hypoxic Äntwert zu entholl Zellen [24]. Resultater vun eiser Etude bewisen, dass HIF-1α mat engem malignant gelooss Kategorie soll, vun Invasioun, lymph Node Metastasen an Zäit geholl entholl Etapp dorënner Déift. Contreras, gastric Kriibs Patienten mat héije HIF-1α haten aarmen Iwwerliewe wéi déi mat niddereg HIF-1α, déi weider eiser Propositioun verstäerkt datt HIF-1α, oder éischter hypoxia, mat de Werdegang vun gastric Kriibs verbonnen ass. VerfÜgung

et huet laang unerkannt ginn, datt entholl Zellen aus immun Schued zu hypoxic entholl microenvironments geschützt ginn; Ee, bleiwen d'Basisdaten Mechanismen nach ënner Leescht [25]. Well vun elo, ass wéineg iwwert bekannt ob e Lien tëscht hypoxia do ass an Treg-mediated immunosuppression zu erhéijen. Puer rezent Studien hunn hypoxic Regulatioun vun Tregs, mat contraire Resultater studéiert. Ben-Shoshan et al. VerfÜgung [26] gemellt dass hypoxia der Zuel an suppressive Eegeschafte vun Tregs Erhéijunge eng anti-demagogesch Programm zu Alimentatioun. Wei et al. VerfÜgung [7] confirméiert och, datt hypoxia der Fähegkeet vun Gehirtumoren multiforme Erhéijunge Tregs zu induce, an domat spillt eng wichteg Roll an entholl-mediated immun Ennerdréckung. Allerdéngs, Dang et al. [27] fonnt dass HIF-1α bremst Treg dat duerch gezielt Foxp3 FAQ fir ofgeschnidden. An eiser Etude virgestallt mir eng ganz positiv Korrelatioun tëscht Tregs Zuel an HIF-1α Ausdrock, suggeréiert datt hypoxia zu Tregs einfach an gastric Kriibs bäidroen kënnen. Et ass Bandmembere datt, an eise Studien, déi Tregs an der Regioun no Zellen zu Kriibs etabléiert sech ausdrécke HIF-1α. Sou, weider Opkläerungsaarbecht vun ob hypoxia-verbonne Molekülle vum Kriibs Zellen Verëffentlechung bäidroen fir de Räichtum vun Tregs zu gastric Kriibs ass waren. VerfÜgung

Sech an de Räichtum vun Tregs zu erhéijen Équipe Mechanismen sinn nach net gutt verstanen hunn, Mir an aner Enquêteuren hun kuerzem bewisen, dass entholl Zellen als Quell vun TGF-β1 déngen kann, déi fir de kopéiert an Ënnerhalt vun Tregs kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung [28] néideg ass, [29], [30]. An der aktueller Etude, déi meescht vun Tregs an TGF-β1 zu Circulatioun virum Agrëff war méi héich wéi déi an der Chirurgie, an déi zwee Parameteren zougedréckt engem positive Korrelatioun, datt entholl-ofgeleet TGF-β1 proposéiert fir d'Erhéijung vun Tregs zu gastric bäidroen kënnen Kriibs. VerfÜgung

Hypoxia, eng gemeinsam Fonktioun vun Cancers, kann Kriibs Zellen ze geheime immunosuppressive cytokines dorënner TGF-β1 [7], [31] induce. Resultater vun eiser Etude bewisen stäerkste héich TGF-β1 Zellen Kriibs Zellen ausdrécken HIF-1α zu erhéijen goufen. An kënschtlech VerfÜgung Etude huet den Ausdrock vun TGF-β1 zu engem groussen Deel zu gastric Kriibs Zellen ënner hypoxic Kultur fräi, déi mat uewendriwwer-ernimmt Studien och konsequent ass. Baséierend op eise Conclusiounen, Hypothes mir dass Kriibs Zellen TGF-β1 secrete der Produktioun vun Tregs zu gastric Kriibs ze induce. Fir Test eis Hypothesen, isoléiert CD4 + CD25 - T Zellen aus gesond Individuen vun verdënntem supernatants vun entholl Zellen cultured goufen ënner verschiddene Kultur Konditiounen. Resultater weisen, datt Foxp3 Ausdrock vun T Zellen zu hypoxic mëttelfristeg cultured bedeitend méi héich wéi Zellen cultured zu normoxic mëttelfristeg war. Ausserdeem, Schan extra recombinant Mënsch TGF-β1 vill fräi Foxp3 Ausdrock hierkommen Schan LY-364947, engem TGF-β1 receptor inhibitor, reduzéiert Foxp3 Ausdrock. Sou, gedoe dës Resultater engem direkte Lien tëscht hypoxia, TGF-β1 an Tregs zu gastric Kriibs. VerfÜgung

Allerdéngs eis virleefeg Etude awer och, datt TGF-β1 vun HIF-1α Stabilisator, Gilsbuerg Chlor (CoCl onverännert war 2), oder HIF-1α inhibitor, 2-methoxyestradiol (2ME2) ​​zu AGS an BGC823, obwuel d'HIF-1α vun hypoxia fräi war (Donnéeën net gewisen). Dës Conclusiounen ugeholl datt HIF-1α vläicht mat der Aféierungs- vun TGF-β1 zu gastric Kriibs Zellen ënner hypoxia unassociated ginn, wat mat virdrun Etude konsequent ass [32]. Doriwwer eraus, kéint d'Produktioun vun Tregs net komplett ablated vun TGF-β1 erauszesichen, wat beweist, datt aner cytokines oder Weeër och Équipe kann. Ausserdeem sinn Kriibs Zellen net déi eenzeg Quell vun cytokines bannent de entholl microenvironment. Sou, si weider Studien waren d'Basisdaten Mechanismus vun Treg Heefung an gastric Kriibs ze confirméieren. VerfÜgung

An Conclusioun, hien huet de Moment studéieren datt hypoxia der Fähegkeet vun gastric Kriibs potentiates vun immun Iwwerwaachung ze flüchten an-Regulatioun den Ausdrock vun TGF-β1, Pinguin domat Tregs zu erhéijen. Weider, eisen Daten gëtt och Beweiser fir d'Existenz vu intercellular Kräiz-Diskussioun tëscht entholl Zellen an Tregs, déi immun Äntwerte anti-entholl regléieren kéint. VerfÜgung

Other Languages