Введение Этика Заявление Общая Выделение РНК и QRT-PCR Парафин -вложено срезы ткани от пациентов или голых мышей были термической обработке при температуре 60 ° с в течение 1 ч, депарафинизации в ксилоле, повторно гидратированный в серии этанола (100-50%) и обрабатывают в 0,01 моль /л цитратного буфера (рН 6,0 ) для извлечения антигена. Активность эндогенной пероксидазы ингибируется после инкубации с метанолом, содержащим 0,3% H <суб> 2 С <суб> 2 в течение 30 мин. Затем срезы инкубировали с антителами обнаружения RABEX-5 (1:50, Santa Cruz Biotechnology, США) или VEGF (1:150; Ab46154, Abcam, США) при 4 ° С в течение ночи. Следующая экспериментальная процедура инкубировали со вторичным антителом. Срезы тканей контрастно гематоксилином Майера. Слайды были независимо друг от друга оценивали двумя патологоанатомами, ослепленный на любые данные пациента. Интенсивность окрашивания RABEX-5 был забит как 0 (без окрашивания), 1 (легкое окрашивание), 2 (умеренное окрашивание) или 3 (интенсивное окрашивание). Окрашивание район был забит как 0 (0%), 1 (1-25%), 2 (26-50%), 3 (51-75%) или 4 (76-100%), на основании процентного содержания положительно окрашенных клеток. Окончательный счет окрашивания, рассчитывается как сумма интенсивности и расширения оценки, были разделены на три группы следующим образом: 0-2, отрицательное выражение; 3-4, слабое выражение; и 5-6, сильное выражение. Целевые глушение RABEX-5 Вестерн-блоттинга SGC-7901 /KD, клетки NCI-N87 /KD и контрольных клеток собирали и клеточный цикл и апоптозом оценивали с помощью проточной цитометрии. Для анализа клеточного цикла клетки фиксировали 75% -ным этанолом и хранили при 4 ° С в течение ночи. На следующий день фиксированные клетки промывали PBS, обрабатывали РНКазой А (50 мкг /мл) и окрашивали пропидийиодидом (PI) (50 мкг /мл) в течение 30 мин в темноте. Окрашенные клетки анализировали с помощью проточной цитометрии (FACSCalibur, Becton-Dickinson). Результаты RABEX-5 выражение усиливается в. желудочные раковые ткани Подавление RABEX-5 ингибирует желудочную пролиферации раковых клеток и образование колоний Обсуждение
<р> Несмотря на снижение глобальной заболеваемости в некоторых регионах мира, рак желудка остается четвертое место в заболеваемости и второе место в смертности среди всех раковых заболеваний во всем мире [1]. Исследования показывают, что факторы окружающей среды, такие как хеликобактерной
инфекции, курение и диеты, могут играть важную роль в развитии рака желудка [2]. На ранних стадиях рака желудка, как правило, протекает бессимптомно или связаны с неспецифическими симптомами, такими как диспепсия, и к тому времени возникают симптомы, она часто достигла продвинутой стадии. Несмотря на общее использование мультимодальной терапии (химиотерапии, лучевой и хирургии), 5-летняя выживаемость больных остается на низком уровне, на 20-40% [3]. Хотя исследования в области рака желудка был достигнут значительный прогресс, молекулярные механизмы, лежащие в основе развития рака желудка остаются не полностью изучены.
<Р> Экзоцитоз и эндоцитоз являются ключевые процессы, используемые клетками для поддержания нормальной физиологической функции, и пузырек транспорт является одним из основных часть этого процесса. Малые GTPases играют функцию переключателя в внутриклеточных молекул и очень важную роль в эндоцитоза и везикул транспорта, в том числе регуляции роста клеток, трансдукции сигнала, дифференцировки и актина цитоскелета здания и многие аспекты других клеточных процессов [4]. В суперсемейства Ras, существует более 50 видов, в том числе ГТФаз Раба, который принадлежит к самому большому подсемейства [5]. Исследования показали, что большинство Rab белки регулируют нацеливание транспорт, фагоцитоз и везикул стыковку к конкретным мембранах, в то время как небольшое количество Rab белков регулируют пузырек многообещающий [6], [7]. Небольшой GTPase БОА-5, которая распространяется в плазменной мембране и ранних эндосом, является мастером регулятором раннего эндоцитотического оборота [8]. Как и в других малых GTPases, RAB-5 активируется путем обмена связанного валового внутреннего продукта с ГТФ, катализируется семейством гуанин-нуклеотид обменных факторов [9]. RABEX-5 был идентифицирован как интерактора из Rabaptin-5 и обладает активностью ГЭФ к RAB-5 и связанных с ним ГТФаз. Точно так же, как RABEX-5 и Rabaptin-5 необходимы для RAB-5 управляемых эндосом слияния в пробирке
[10].
<Р> Недавние исследования показали, что RABEX-5 выражение значительно выше в нескольких видов рака, включая рак молочной железы [11], рак предстательной железы [12] и рак толстой кишки [13]. Аномальные RABEX-5 экспрессии в опухолях позволяет предположить, что RABEX-5 имеет большое значение в патогенезе рака и прогрессии, и может влиять на биологическое поведение опухоли. Тем не менее, роль и механизм действия RABEX-5 в желудочном канцерогенезе рака и прогрессии еще не были определены. В данном исследовании мы впервые проанализировали экспрессию RABEX-5 в желудочном раковых тканей с использованием количественной обратной транскрипции-полимеразной цепной реакции (QRT-PCR) и иммуногистохимии. Впоследствии, мы исследовали влияние RABEX-5 на биологической функции опухоли в пробирке
и В естественных условиях
. Наши результаты показывают, что RABEX-5 гиперэкспрессируется и играет роль онкогенных при раке желудка.
Материалы и методы
<р> Все эксперименты на животных, описанные в данном исследовании, были утверждены животных по уходу и использованию комитета (Institutional IACUC) в Taishan медицинского университета и всех животных были сохранены в соответствии с руководящими принципами IACUC. Сбор и использование человеческих образцов были одобрены Институциональным наблюдательным советом Тайшань медицинского университета и аффилированном Taian Центральной больницы Медицинского центра, после информированного письменного согласия от всех пациентов.
Пациенты и ткани образцов
<р> в общей сложности 110 наборов опухолей желудка и прилегающих к ним, неопухолевых тканей (не менее 5 см от края опухоли) были получены от пациентов, перенесших хирургическое лечение в Центральном госпитале Taian в период с января 2010 по декабрь 2013 г. Они включали 27 женщин и 83 мужчин, средний возраст 59,3 лет (диапазон: 32-80 лет). Ни один из пациентов не получал лучевой терапии или химиотерапии до операции. Клинико-патологические данные были собраны и патологическое стадирование опухоли определяли по данным Американского Объединенного комитета по вопросам рака (AJCC) желудка TNM рака постановка системы. Гистологическое типирование было выполнено по крайней мере двух экспертов патологоанатомов, работающих независимо друг от друга в двойном слепом моды. Исследование было одобрено Институциональным наблюдательным советов по Тайшань медицинского университета и аффилированном Taian Центральной больницы Медицинского центра. Письменное информированное согласие было получено от каждого пациента до включения в исследование.
Клеточные линии и условия культивирования
<р> желудка человека линии раковых клеток и увековечил желудка, через слизистую оболочку эпителиального клеточная линия, ГЭС-1 , были приобретены у шанхайских институтом биологических наук, китайской академии наук. Клеточные линии поддерживали в рутинно RPMI-1640, содержащей 10% сыворотки теленка, пенициллин (100 МЕ /мл) и стрептомицина (100 МЕ /мл) в 5% CO <суб> 2 в атмосфере при 37 ° С.
<р> Суммарную РНК экстрагировали из образцов тканей или клеточных линий с использованием тризола реагента (Invitrogen, США), в соответствии с инструкциями изготовителя. Обратную транскрипцию проводили с использованием 1 мкг тотальной РНК в соответствии с инструкциями производителя (Promega, Madison, WI, USA). ПЦР проводили с использованием SYBR Green реагента (Applied Biosystems, CA, USA) и следующих праймеров для ПЦР; RABEX-5
(вперед) 5'-TTGGACAGATGGAATTGCAA-3 'и (обратный) 5'-GTTGCAGTGGTGGAGGAAGT-3'; VEGF
(вперед) 5'-CTGTACCTCCACCATGCCAAGT-3 'и (обратный) 5'-CTTCGCTGGTAGACATCCATGA-3' и GAPDH
(вперед) 5'-GGACCTGACCTGCCGTCTAG-3 'и (обратный) 5'-GTAGCCCAGGATGCCCTTGA-3 '. Реакции ПЦР проводили с первоначальной денатурации при 95 ° С в течение 2 мин, затем 30 циклов при 94 ° С в течение 30 с, 55 ° С в течение 30 с и 72 ° С в течение 30 с, с конечным удлинением при 72 ° C в течение 10 мин. GAPDH
использовали в качестве внутреннего контроля и все реакции проводились в трех экземплярах. Относительное выражение отношения RABEX-5
в каждой парного опухоли в образце ткани неопухолевой были рассчитаны с использованием -ΔΔCt метод 2.
Immunohistochemistry
<р> лентивирусов вектор помех RABEX-5 был приобретен у Shanghai GenePharma Co., Ltd. Последовательность RABEX-5 интерференция ориентации олигонуклеотида 5'-GGATGCAAACTCGTGGGAA-3 ', в то время как негомологичный регуляторная последовательность 5'-TTCTCCGAACGTGTCACGT-3'. SGC-7901 и NCI-N87 клетки высевают в 6-луночные планшеты (5 × 10 4 клеток /лунку), выросшие до 40% слияния и обрабатывали титруют вирусным супернатантом при множественности инфекции (MOI) 10.
<р> целые белки клетки были извлечены из клеток с использованием Рипа буфера, содержащего ингибитор протеазы коктейль (Pierce, Rockford, IL, USA). Белок количественно оценивали с помощью ВСА Protein Assay Kit (Pierce). Клеточные экстракты (100 мкг) разделяли с помощью 10% -ного додецилсульфата электрофореза в полиакриламидном геле с натрия, и переносили на мембраны поливинилиденфторида. Мембраны блокировали 5% молоком обезжиренным в Трис-буферном солевом растворе (TBS) и инкубировали с первичными антителами при 4 ° С в течение ночи. Первичные антитела были использованы кроличьего анти-RABEX-5 (1:200; Santa Cruz Biotechnology), кролик анти-GAPDH (1:5000; Ab9485, Abcam) и мышиного анти-VEGF (1:300; Ab46154, Abcam). Мембраны затем промывали три раза в TBS-Tween раствором в течение 15 мин, и инкубировали с вторичными антителами. Сигналы были обнаружены с помощью усовершенствованной системы обнаружения хемилюминесценции (Amersham Bioscience, Piscataway, Нью-Джерси, США) в соответствии с протоколом производителя.
Пролиферация клеток для анализа
<р> пролиферации клеток измеряли с использованием Cell счетная Kit -8 (ССК-8; Dojindo лаборатории, Кумамото, Япония). SGC-7901 или NCI-N87 клетки высевали в 96-луночные планшеты (1,5 × 10 3 клеток /лунку) и инкубировали в течение различных временных точках (24, 48, 72, 96 и 120 ч). Питательную среду затем удаляли и заменяли 200 мкл среды RPMI-1640, содержащей 10% FBS и 20 мкл CCK-8 и планшеты инкубировали при 37 ° С в течение 3 ч. Оптическую плотность измеряли при 450 нм с использованием микропланшет-ридера Safire2. Среду RPMI-1640, содержащей 10% FBS и CCK-8 использовали в качестве контроля.
Колонии Анализ образования
<р> Клетки высевают в 6-луночные планшеты (1 × 10 3 клеток /лунку) и культуральную среду заменяли каждые 3-4 дня. После того, как культуры 14 дней, колонии клеток фиксировали 4% параформальдегидом в течение 10 мин, окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым в течение 20 мин, и фотографируют. Колонии более 50 клеток подсчитывали в каждом тире.
Анализ клеточного цикла и апоптоза
<Р> Для анализа апоптоза, An аннексина V-APC Апоптоз Обнаружение Kit I (BD Pharmingen, США) использовали в соответствии с инструкциями изготовителя. ПИ и аннексина V-АРС двойное окрашивание проводили и клетки анализировали с помощью проточной цитометрии (FACSCalibur, Becton-Dickinson), с использованием программного обеспечения Cell Quest (Becton-Dickinson). Аннексина V-APC-положительные и отрицательные PI-клетки были определены как апоптозу. Все эксперименты проводились в трех экземплярах и были рассчитаны средние значения этих групп.
Transwell миграция и инвазия анализ
<р> Для миграции анализов, 1 × 10 5 клетки суспендировали в serum- свободной среде RPMI-1640, и высевали на чашки с камерами, которые не покрывали матригелем (Corning Costar, NY, USA). Для анализа инвазии, верхняя камера была предварительно покрытых Матригель (BD Bioscience, CA, USA) в соответствии с протоколами изготовителя, и 1 × 10 5 клеток в бессывороточной среде RPMI-1640, были добавлены к камере. Для обоих анализов, среды, содержащей 10% FBS, добавляли в нижнюю камеру в качестве хемоаттрактанту. Через 24 ч после культуры, камеры окрашивали 0,5% раствором кристаллического фиолетового в течение 15 мин и погружали в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS) в течение 10 мин. Клетки в нижней камере были впоследствии подсчитывали под инвертированным микроскопом. Значения выражены в виде чисел среднее клеток в пяти случайных полей зрения (200 ×).
ранозаживляющие анализ
<р> Клетки высевают в 6-луночные планшеты и культивировали, пока они не достигли слияния. Раны были поцарапаны на монослой клеток с использованием 20-мкл наконечники пипеток. Планшеты промывали один раз свежей средой для удаления не прилипших клеток после культивирования клеток при 0 или 48 ч (среде без сыворотки теленка), и фотографировали.
ксенотрансплантата модель
<р> Четыре уик самцов линии BALB /C голых мышей были приобретены из Института зоологии китайской академии наук Шанхая. Животных содержали в клетках с древесностружечные стелек в контролируемой температурой комнате (68-72 ° F) с 12-часового цикла свет-темнота и 45-55% относительной влажности, и было разрешено свободный доступ к питанию и питьевой воде. В кратком изложении, СГК-7901 /KD или СГК-7901 /NC клетки обрабатывали трипсином и повторно суспендируют в PBS (рН 7,4) для инъекций в одну мышь, в общем объеме 100 мкл. Суспензию клеток (1 × 10 6 клеток) вводили в правый бок мышей. Размер опухоли измеряли наружно каждые 3 дня с помощью штангенциркуля, а объем опухоли оценивали, используя уравнение: длина (мм) х ширина 2 (мм) × 0,52. Для того, чтобы смягчить любые страдания мышей, наблюдаемых в ходе этих экспериментальных исследований мышей умерщвляли CO <югу> 2 ингаляции на 28-й день после внутрибрюшинного введения, и опухоли взвешивали после вскрытия. Образцы хранили в жидком азоте в течение QRT-PCR или фиксировали в 4% формалине для получения залитых парафином секции. Все процедуры были проведены в соответствии с Руководством для животных по уходу и одобрены Комитетом по уходу за животными Taishan медицинский университет им.
Статистический анализ
<р> Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (SD). Статистические различия между этими двумя группами были рассмотрены Студента т
-test. Корреляция между экспрессией RABEX-5 в желудочном раковых тканях и клинико-патологическими параметрами были проанализированы с помощью хи-квадрат или точных тестов Фишера. P
&л; 0,05 считается значительным, и P
&л; 0,01 считалось весьма значительным
<р> выражение RABEX-5
исследовали при раке желудка и прилегающих к нему тканей неопухолевыми по QRT-PCR. Мы наблюдали значительно более высокую экспрессию RABEX-5
мРНК в желудочном раковых тканях по сравнению с соответствующими неопухолевые тканей ( P
&л;. 0.01, рис, 1А). Эти результаты были подтверждены на уровне белка с помощью иммуногистохимического окрашивания (рис. 1В, С, D, Е). Выражение RABEX-5 был преимущественно локализован в цитоплазме раковых клеток. RABEX-5 усиливается в 61,8% (68/110) из больных раком желудка. Далее мы исследовали взаимосвязь между RABEX-5 и выражения клиникопатологическими особенностей рака желудка. Положительная регуляция RABEX-5 был связан с размером опухоли ( P
= 0,035) и метастазов в лимфатических узлах ( P
= 0,006), но не с другими клинико-патологическими факторами, включая пол, возраст или место нахождения опухоли (таблица 1).
<р> Затем мы исследовали экспрессию RABEX-5 в желудочном клеточных линий и клеточных линий нераковых , ГЭС-1, с помощью Вестерн-блот-анализа. Была выражена RABEX-5 во всех клеточных линиях, и был особенно высок в SGC-7901 и клетках NCI-N87 (рис. 2А). Для того, чтобы исследовать функции RABEX-5 в желудочном линиях раковых клеток, мы провели целевой нокдаун RABEX-5 в линиях высоких экспрессирующих клеток, SGC-7901 и NCI-N87. RABEX-5 выражение было значительно снижено в SGC-7901 /KD и NCI-N87 /KD клеток по сравнению с контрольными клетками (рис. 2В). Во-первых, мы исследовали влияние потери RABEX-5 на рост клеток рака желудка. Через 5 дней культивирования, темпы роста SGC-7901 /KD и клеток NCI-N87 /KD был значительно медленнее, чем в контрольной группе (рис. 2в). Мы также подтвердили эти наблюдения в анализах образования колоний. числа колоний были значительно сокращены в SGC-7901 /KD клеток и клеток NCI-N87 /KD по сравнению с контрольными клетками (рис. 2D), и мы обнаружили, что размер колонии был также меньше в экспериментальных группах по сравнению с контрольной группой. Эти данные свидетельствуют о том, что подавление RABEX-5 подавляет пролиферацию раковых клеток желудка.
Подавление RABEX-5 способствует апоптоз клеток рака желудка и индуцирует G0 /G1 клеточного цикла
<р> наблюдаемых эффектов RABEX-5 нокдаун на клеточный рост может быть из-за изменений в прогрессии клеточного цикла и апоптоза. Поэтому мы исследовали влияние RABEX-5 глушителей на клеточного цикла и апоптоза в пробирке
, с использованием проточной цитометрии. Анализ проточной цитометрии показал, что доля клеток в фазе G0 /G1 в SGC-7901 /KD или NCI-N87 клеток /KD был выше, чем в SGC-7901 /NC или NCI-N87 контрольных групп /NC, в то время как процент клетки в G2 /M фазе значительно снизилась по сравнению с контрольной группой (рис. 3А, в). Мы также наблюдали значительное влияние на апоптоз в по-разному обработанных групп (фиг. 3C, D), с понижающей регуляции экспрессии RABEX-5 ведущих к увеличению клеток желудка апоптоза.
Подавление RABEX-5 ингибирует миграцию , вторжение и ранозаживляющие способность клеток рака желудка
<р> Для того, чтобы исследовать влияние RABEX-5 по вопросам миграции и вторжения, мы в следующий раз проводили Transwell миграции и вторжения анализов. Подавление RABEX-5 подавленной миграции клеток (SGC-7901 /группа KD, 121,3 ± 6,1 клеток /поле; SGC-7901 группа /NC, 261,0 ± 10,5 клеток /поле; NCI-N87 /группа KD, 108,7 ± 6,1 клеток /поле; NCI-N87 /NC группу, 241,7 ± 10,6 клеток /поле; P
&л;. 0,05) (рис 4A, C). Аналогичные результаты наблюдались в Transwell инвазии анализах (SGC-7901 /группа KD, 76,3 ± 6,1 клеток /поле; SGC-7901 /группу NC, 108,7 ± 6,0 клеток /поле; NCI-N87 /группа KD, 60,7 ± 6,0 клеток /поле; NCI-N87 /группа NC, 119,0 ± 8,5 клеток /поле; P
&л; 0,05) (рис 4B, D)
<р> Для того, чтобы исследовать влияние RABEX-5 на моторику.. и заживление ран, мы также провели ранозаживляющим анализы. Мы наблюдали, что расстояние между намотанными краями СГК-7901 /KD и клеток NCI-N87 /KD был значительно длиннее, чем у СГК-7901 /NC или клетками NCI-N87 /NC (рис. 4E). В соответствии с этими наблюдениями, уровни VEGF были подавляются на обоих уровнях мРНК и белка в SGC-7901 /KD клеток (рис. 4F, G).
Сайленсинг RABEX-5 ингибирует рост рака желудка в естественных условиях
<р> на основании в пробирке
результаты описанных выше, мы затем исследовали влияние RABEX-5 глушителей на рост опухоли в естественных условиях
впрыскиванием SGC7901 /KD или SGC7901 /NC клетки подкожно в правый фланг регионов голых мышей. Размер опухоли контролировали каждые 3 дня с суппортом. Объем опухоли была значительно снижена у мышей через 2 недели после инъекции СГК-7901 /KD клеток по сравнению с контрольными клетками ( P
≪ 0,05;. фиг.5А). Объем опухоли ксенотрансплантатов происходит от СГК-7901 /группе KD была сравнима с таковой КЗВ-7901 группы /NC, обнаруживая заметное уменьшение объема опухоли через 4 недели после инокуляции опухолевых клеток ( P
≪ 0,05, рис. 5В, С). Кроме того, вес опухолей, полученных из СГК-7901 /клеток KD был значительно меньше, чем у контрольных ( P
≪ 0,05;. Рис 5D). Далее мы исследовали экспрессию VEGF в опухолевых образцах трансплантация от QRT-ПЦР и иммуногистохимии. Как показано на рис. 5E и 5F, уровни мРНК VEGF и белка в SGC-7901 /KD группы по сравнению с СГК-7901 контроль /NC были снижены. Это В естественных условиях
данные согласуются с нашими
пробирке наблюдений и подтверждают, что молчание RABEX-5 ингибирует рост злокачественной опухоли желудка и прогрессирования путем модулирования VEGF транскрипционной активности. Таким образом, RABEX-5 играет онкогенного роль в раке желудка
<р> Хотя предыдущие исследования показали, что RABEX-5 играет определенную роль в онкогенеза в нескольких типах рака [11]. - [14], его роль при раке желудка не было исследовано. В настоящем исследовании мы обнаружили, что RABEX-5 экспрессия значительно повышающей регуляции в желудочном раковых тканей по сравнению с нормальной тканью, указывая, что RABEX-5 может внести свой вклад в желудочном онкогенеза рака. Кроме того, экспрессия RABEX-5 в значительной степени связано с размером опухоли и метастазов в лимфатических узлах. В отличие от этого, не было никаких достоверных корреляций между аномальной RABEX-5 и выражения пола, возраста или локализации опухоли. Это первое исследование с целью выяснить значение клинико-патологическими выражения RABEX-5 у больных раком желудка.
<Р> Чтобы исследовать роль RABEX-5 в продвижении опухоли, мы в следующий раз проводили обширные потери функционального анализа в RABEX- 5 высоковольтных линий клеток, экспрессирующих, SGC-7901 и NCI-N87. Успешное ингибирование экспрессии RABEX-5 была достигнута с помощью технологии RNAi, и нокдаун была подтверждена вестерн-блоттинга. Наш анализ показал, что были получены в анализах образования колоний пролиферации клеток было значительно снижено в SGC-7901 /KD и NCI-N87 /KD клеток и аналогичные результаты. Важно отметить, что В естественных условиях
модели ксенотрансплантата поддерживали эти в пробирке
наблюдения. Этот фенотип может быть вызвано RABEX-5 регуляции специфических генов и сигнальных путей, влияя тем самым на клеточный цикл и апоптоз. В Transwell анализах, меньшее количество СГК-7901 /KD и NCI-N87 /KD клетки мигрировали в нижнюю камеру, чем контрольные клетки, предполагая, что RABEX-5 усиливает миграцию и инвазию в желудочном раковых клеток. Заживление ран также значительно снизился следующие глушителей RABEX-5. Эти результаты подтверждают важную роль RABEX-5 в желудочном роста раковых клеток и метастатическим поведением. Однако точный молекулярный механизм, с помощью которого RABEX-5 оказывает эти эффекты остается неизвестным, так как исследований с участием RABEX-5 ограничены.
<Р> Предыдущие исследования показали, что RABEX-5 может специфически связываться с активной формой RAB- 5, тем самым регулируя стыковку и слияние эндосомальных мембран, моторику эндосомы и внутриклеточной передачи сигналов [15]. Выражение RAB-5 белков был связан с развитием различных злокачественных опухолей [16] - [18] и способна стимулировать миграцию опухолевых клеток [19], [20]. Ангиогенез играет ключевую роль в онкогенеза [21], и регулируется несколькими факторами, такими как тромбоцитарный фактор роста, полученный из (PDGF) и фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) [22]. PI3K /Akt сигнального пути может регулироваться как СЭФР и PDGF. Например, VEGF усиливает пролиферацию нейробластомы путем активации PI3K /сигнализации Akt [23]. Аналогичным образом, исследования показали, что ФРПТ может повлиять на миграцию способность клеток через PI3K /Akt пути [24]. Активация сигнализации PI3K /Akt может ингибировать апоптоз клеток, вызванную различными стимулами [25] - [29], а также способствовать прогрессии клеточного цикла [30], [31], тем самым способствуя выживанию и пролиферации клеток. Этот путь также участвует в ангиогенеза [32], [33], а также играет важную роль в формировании опухоли, инвазии и метастазированию [34], [35]. Наше исследование показывает, что RABEX-5 глушителей вызывает снижение экспрессии VEGF. Таким образом, мы предполагаем, что RABEX-5 способствует росту и метастазированию способность клеток рака желудка путем активации VEGF и его вниз по течению сигнальных путей.
<Р> В заключение мы хотели бы продемонстрировать, что RABEX-5 способствует пролиферации, образование колоний, миграции и вторжения, предполагая, что RABEX-5 может быть онкогенов при раке желудка, и его последствия могут быть частично опосредована модуляции активации VEGF. Поэтому RABEX-5 может представлять собой новый диагностический и прогностический маркер и новый терапевтическую мишень при раке желудка. Больше усилий должно быть сделано, чтобы уточнить сигнальные пути, лежащие в основе этих биологических явлений.
Веганская диета может увеличить количество кишечных микробов, которые способствуют снижению веса
Новое исследование может помочь предотвратить смертельные инфекции у младенцев
Микробы кишечника могут быть связаны с депрессией
Недавно обнаруженные крупные фаги стирают границу между жизнью и неживой
Повышение рисков биозащиты, создаваемых синтетической биологией
Диета и питание влияют на микробиом слизистой оболочки толстой кишки
Секвенирование РНК позволяет по-новому взглянуть на микробиом
Исследователи из Чикагского университета разработали революционную стратегию изучения активности микробиома кишечника - с помощью высокопроизводительного секвенирования тРНК. Альфа Тельца
Исследование описывает исходную базовую базу данных здорового кишечного микробиома и профиль численности
Исходная базовая база данных здорового кишечного микробиома и профиль численности описаны в исследовании, опубликованном 11 сентября. 2019 в журнале открытого доступа PLOS ONE Чарльза Хэдли Кинга из М
Антиоксиданты в рационе могут повысить риск рака кишечника.
новое исследование показывает Польза антиоксидантов в пище для здоровья доказана в значительной части научной литературы. Теперь, новое исследование показывает, что слишком много хорошего может оказат