Plos ONE: Reverse Korelacija med MicroRNA 145 in FSCN1 ki vplivajo Rak želodca migracije in Invasion

Povzetek

MicroRNAs (MIRS) igrajo pomembno vlogo pri modulaciji izražanje genov v procesih tumorigeneze in razvoj tumorjev. Prejšnje študije so pokazale, da je miR-145 navzdol urejeno v želodcu neoplazme in je povezano z migracijami tumorja in invazije. Vendar pa tako molekularni mehanizem in funkcijo miR-145 z rakom želodca, še vedno nejasna. Sedanja študija je prvi dokaz pomembnega zmanjšanjem števila miR-145 izražanja v infiltracijski raka želodca v primerjavi z razširitvijo raka želodca. Poleg tega analize korelacije je pokazala močne inverznih korelacije med miR-145 in stopnjah izražanja FSCN1 v infiltracijski rakom želodca. Poleg tega smo pokazali, da miR-145 neposredno namenjen FSCN1 in preprečuje migracijo celic in vdor v rakom želodca. Podreti izraz FSCN1 pripeljala do ukinitve migracije in invazije v želodčnih rakavih celic, in ponovno izraža FSCN1 v miR-145-s prekomerno ekspresijo celic spremenili svoje migracijske in invazijo napake. Tako smo ugotovili, da miR-145 ureja migracijo celic in invazijo na raka želodca predvsem usmerjena neposredno FSCN1

Navedba. Chen Jj, Cai Wy, Liu XW, Luo Qc, Chen G, Huang WF, et al . (2015) Reverse Korelacija med MicroRNA 145 in FSCN1 Vpliv na Rak želodca migracije in Invasion. PLoS ONE 10 (5): e0126890. doi: 10,1371 /journal.pone.0126890

Akademska Urednik: Chengfeng Yang, Michigan State University, UNITED STATES

Prejeto: 14. januar 2015; Sprejeto: 8. april, 2015; Objavljeno: 26. maj 2015

Copyright: © 2015 Chen et al. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Razpoložljivost podatkov: Vsi pomembni podatki so v papir in njene dodatne informacije datotek

Financiranje:. 1. National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81172283) SPO (http://www.nsfc.gov.cn/). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa. 2. Natural Science Foundation province Fujian (Grant No. 2012D037) SPO (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa

nasprotujočimi si interesi.. Avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

rak želodca ima eno najvišjih stopenj umrljivosti za maligne tumorje na svetu [1]. Izboljšana medicinske tehnologije lahko izboljšajo izid raka želodca. Vendar pa je rak želodca ostaja drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka [2], ki ga povzroča tumorske invazije in metastaz. Skupaj, invazija in metastaze tvorita proces, v katerem maligne tumorske celice prenesejo iz primarnega mesta na druga področja in nato tvorijo tumorje na oddaljenem mestu skozi limfni kanal, krvne žile ali telesno votlino [3]. Zato pojasnitev molekularne mehanizme, ki sodelujejo pri razvoju in invazivnosti raka želodca je potrebno.

Leta 1977, Ming razvrščeni želodčne karcinomov v razširitev in infiltracijsko vrste na podlagi njihovih vzorcev rasti in invazivnost [4]. Te vrste so jasno razpoznavna histološko. Širjenje karcinomov rastejo en masse in širitev povzroči nastanek diskretnih tumorskih gomoljev, ker imajo infiltracijsko karcinomov tumorske celice, da vdor posamično [5]. Od dveh vrst raka želodca, infiltracijsko želodčnega raka je bolj invazivna, kot širitev raka na želodcu. Takšna razvrstitev tako zagotavlja referenco za razlikovanje želodčne vzorcev raka klinično in lajša podrobne študije o molekularnih mehanizmov raka želodca.

MicroRNAs (MIRS) igrajo ključne vloge v številnih bioloških procesih, vključno s postopki z rakom, ki ga neposredno inhibicijo izraz ciljnih mRNA preko različnih molekularnih [6, 7]. Poleg tega MIRS opraviti zmotne ureditev med rakotvornosti in lahko delujejo bodisi kot onkogeni ali tumorskih razbijal [7]. Nedavne študije so pokazale, da je veliko MIRS vplivajo na proliferacijo in invazijo na raka želodca. miR-21 je reguliran na raka želodca in spodbuja tumorja orožja in vdor v raka želodca z usmerjanjem PTEN [8]. V nasprotju s tem, miR-145 je navzdol ureja človeškega raka želodca [9]. Poleg tega je raziskava pokazala, da lahko miR-145 zavirajo migracijo celic in invazijo z zaviranjem N-kadherina prevajanje beljakovin v želodčnih rakavih celic [10]. Vendar Kamikihara et al [11] odkrijejo ravni ekspresije N-kadherina pri 146 bolnikih z rakom želodca z imunohistokemijo, in rezultati so pokazali, da je imel samo 31 bolnikov (21%) N-kadherina pozitivni ekspresije. Zato lahko nekatere druge molekularne mehanizme miR-145 regulacijo migracije celic in vdora v rak želodca.

FSCN1 je 55-kDa aktina veže protein, ki je povezan z filopodia in temelji na aktina postavitev izboklino, in je spodbuja celično gibljivost, migracije in invazijo [12, 13]. FSCN1 izraz je odsoten ali nizka v običajnem epitelij, vendar FSCN1 je izraženi pri številnih karcinomov, vključno s kolorektalnim adenomov, epitelijskega raka na jajčnikih in požiralnika skvamoznega karcinoma [14-16]. Poleg tega so vrsto študij je pokazala, da izvrši FSCN1 izraz poveča proliferacijo in invazijo na jajčnikih in želodčnih rakavih celic [17, 18].

Nedavne študije so pokazale, da miR-145 funkcije kot zaviralnih in da miR-145 čezmernim zavira migracije in invazijo v rak prostate in rak mehurja z usmerjanjem FSCN1 [19, 20]. Poleg tega, miR-145 zavira migracije želodčni rak celic in vdor ciljanje N-kadherina. Vendar pa je pozitivna stopnja izraz N-kadherina v želodčnih tkivih rakom le 21% [10, 11]. Zato je določitev ključni ciljni gen miR-145 pri urejanju želodčne invazijo raka je potrebno.

V tej raziskavi smo najprej ugotovili, da je bil miR-145 izraz izredno navzdol urejeno v infiltracijski raka želodca v primerjavi s v širitev raka želodca. Poleg tega smo dokazali, da miR-145 zatreti migracijo celic in invazijo na raka želodca predvsem usmerjena neposredno FSCN1, v katerem je poudarila vlogo miR-145 in FSCN1 pri urejanju raka želodca malignih fenotipi.

Materiali in metode

klinični vzorci

Vsi klinični vzorci so bili zbrani s privolitvijo pacientov, ki je prestal želodca v bolnišnici Zhongshan Univerze Xiamen Xiamen (Fujian Province, Kitajska), od junija 2012 do oktobra 2013 . skupno je 160 parov zbranih kliničnih vzorcev, vključenih 80 neuvrščenih želodčne vzorcev raka, 40 infiltracijsko želodčni vzorcev raka in 40 širi želodčne vzorcev raka. Patološko vrsta tumorja je bila potrjena s pregledom patologijo in izravnana normalne želodčne sluznice so bili zbrani iz več kot 5 cm stran od tumorjev.

Etika izjava

Študijski protokoli so bili v skladu z etične smernice v Helsinški deklaraciji (1975) in je odobril Odbor za medicinsko etiko (št 20081012) bolnišnice Zhongshan Univerze Xiamen Xiamen (Fujian Province, Kitajska). Dobili smo pisne izjave soglasje vseh udeležencev v tej študiji.

Celične linije

MGC-803 in SGC-7901 človeške celične linije raka želodca so bile kupljene z Inštituta za biologijo celice (Shanghai , Kitajska, http://www.cellbank.org.cn). Človeška embrionalna ledvična celična linija 293T dobimo iz American Type Culture Collection (ATCC, MD, ZDA). MGC-803 in GSS-7901 celice smo vzdrževali v RPMI-1640 medij, medtem ko so 293T celice vzdržujejo v DMEM. Vsi mediji vsebuje 10% fetalnega govejega seruma (FBS), 100 U /ml penicilina in 100 mg /ml streptomicina (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA).

luciferaza novinar test

Celice smo transfekciji s luciferaza reporter genov, beta-galaktozidaza (β-gal) in miR-145 posnema ali miR-145 inhibitor (Guangzhou RiboBio) z Lipofectamine 2000 transfekcijske reagenta (Invitrogen). Merimo luciferazno aktivnost v 48 urah po transfekciji in učinkovitost transfekciji je normalizirana z notranjo aktivnost β-gal.

ekstrakcijo RNA in RT-qPCR

Celotna RNA je bila ekstrahirana z uporabo TRIzola reagenta (Invitrogen ) in povratne-prepisal z M-MuLV reverzne transkriptaze (Qiagen), da cDNA po protokolu proizvajalca. PCR v realnem času smo izvedli z detekcijo temelji Green SYBR v Rotor-Gene 6000 instrumenta (Corbett življenje Science) v skladu z navodili proizvajalca in s pomočjo parov oligonukleotidov, navedenih v tabeli 1. miR-145 in U6 primerji so bili pridobljeni iz Qiagen. GAPDH ali U6 endogeni kontrola je bila uporabljena kot interni standard, in rezultati so bili izračunani s pomočjo △△ CT (kjer je CT prag cikel) metodo.

plazmida gradnja

primerji, ki se uporabljajo za izgradnja luciferazni novinarji in plazmidov so navedene v tabeli 1. človeško FSCN1 3 'neprevedeno regijo (UTR) smo pomnožili s MGC-803 cDNA s PCR pomnoževanjem z LA Taq DNA polimerazo (Takara) in kloniran dolvodno od luciferazno kodiranja zaporedje v pMIR-POROČILO (Ambion) vektorja na restrikcijskih mestih SacI in MluI (Promega) za izgradnjo FSCN1-3'UTR-luciferazno novinar ljudi. Mutacije so bile uvedene v MIR-vezavnih mest z uporabo QuikChange mutagenezo Kit (TransGen). Za izražanje plazmidov MIR-145 in FSCN1 so sekvence pomnožili s PCR in klonirali v mestih SpeI /Nhel in XbaI /Ndel mest, v tem zaporedju, za PLV-cs.4.0-bazni vektor (Promega). Za plazmida v motenj FSCN1, sta bila dva para zaporedij razbeljenem in subklonirali v PLKO.1 po protokolu proizvajalca.

lentivirusni proizvodnja in transfekciji

HEK293T celice zasejemo na 6-kanalne vložka po 24 urah pred transfekcijo. Izraz plazmid miR-145, FSCN1 shRNA plazmid ali FSCN1 plazmidov je nato sočasno transfekciji s embalaže plazmidov (phr in pCMV-VSV-G) z transfekciji reagenta Lipofectamine 2000 (Invitrogen). Virusne supernatante zberemo v 48 urah po transfekciji, centrifugirali pri 3000 g 15 minut in filtrirali skozi 0,45 pm filtri (Millipore). Virusne titre določimo z transduciranja HeLa celic pri serijskih razredčitev in analiziranje GFP ekspresije s pomočjo pretočna citometrija. MGC-803 celice ali 7901 celic na 50-70% konfluentne bile okužene z virusnimi supernatantih, ki vsebujejo 10 mg /ml Polybrene 24 h. Sveže medij smo nato dodali v okuženih celicah, ki so bile kasneje izbranih z puromicina.

migracija celic ter invazija test

Cells (3x10 ^{5) smo nanesli na 8,0 mikrometrov pore velikosti Boyden komore (Transwell, Corning Life Sciences, Acton, MA, ZDA) ali prevlečeni z 10 ig Matrigel (BD Bioscience, Bedford, MA, ZDA) na vrtino (za invazijo teste) ali levo nepremazan (za migracijske teste) v serumu brez medij, ki vsebuje 10 g /L goveji serumski albumin. Medij, ki vsebuje 10% FBS služil kot chemoattractant v spodnjem prostoru. celice, ki niso iz preplavljajo smo odstranili z bombažnimi blazinicami po 36 h (za invazijo teste) ali 20 ur (za migracije teste). Napadel celice smo obarvali s hematoksilinom (HE) in prešteti. Podatki so predstavljeni kot povprečje ± SD od treh posameznih eksperimentov}

Western blotting

Proteine ​​smo ekstrahirali z eritrocitov liznega pufra (ELB;. 50 mM Tris, 140 mM NaCI, 0,5% NP 40 in 100 mM NaF (pH 7,6)), ki vsebuje 1 mM fen fluorid (PMSF, Sigma-Aldrich, ZDA). Vsak vzorec smo ločili na 10% SDS-PAGE gelu in nato prenesli na poliviniliden ditluoridne (PVDF) membrane. Membrane smo blokirali s 5% mleka in inkubirali s primarno kunčjega anti-humanega FSCN1 (1: 3000; Cell signalnega Technology, ZDA) ali miško anti-humana GAPDH (1: 5000; Sigma-Aldrich) protitelesa preko noči pri 4 ° C . Membrane smo nato inkubirali z ustreznim hrenovo peroksidazo (HRP) označenih s sekundarnih protiteles (Thermo Fisher Scientific). Pasovih so bili razviti s pomočjo povečano kemiluminescenca (ECL) sistem (Amersham bioznanosti, Buckinghamshire, UK). GAPDH protein smo uporabili kot kontrolo nalaganja.

Statistična analiza

Podatki so izraženi kot povprečje ± SD. Statistična značilnost je bila analizirana z t-test. Korelacija med stopnjami miR-145 in ravni FSCN1 mRNA /beljakovinskih izražanja v želodcu raka človeških je bila izračunana s korelacijo Spearman je. Vse statistične analize smo izračunali s pomočjo programske opreme GraphPad Prism statistiko (GraphPad Software). P
< 0.05 smo imeli statistično značilno (NS, ni pomembno; * P
< 0,05; ** P
< 0,01; *** P
. < 0,001)

Rezultati

Strong inverzno razmerje med izražanjem miR-145 in njegovega domnevnega cilja, FSCN1, v človeškega raka želodca infiltracijsko tipa

smo uporabili podatkovno bazo TargetScan (http://www.targetscan.org) identificirati 3 "UTRs posameznih ciljnih mRNA mir-145, ki lahko urejajo migracije in vdor želodčnih rakavih celic. Od vseh predvidenih mRNA, smo izbrali FSCN1, ki je bil prej vpletena v migracije tumorja in invazije. FSCN1 je tudi zelo ohranjena zaporedja na 3 'UTR, ki dopolnjujejo zaporedju semen miR-145.

Najprej smo raziskovali, ali bi korelacija miR-145 in FSCN1 klinično pomembno z merjenjem izražanje ravni /beljakovin miR-145 in FSCN1 mRNA v normalnem /tumorja paru vzorcev od 80 bolnikov z rakom želodca. Statistična analiza je pokazala pomembno inverzno povezavo med izražanjem miR-145 in izražanje FSCN1 mRNA /beljakovin v 80 parov kliničnih vzorcih (Slika 1A in 1B).

Ming razvrščeni želodčne karcinomov v širi tip in infiltracijsko tip na osnovi vzorcev rasti in invazivnost, in obstaja povezava med klasifikacijo Ming in klinično prognozo [5]. Zato smo izbrali 40 infiltracijsko želodca vzorcev raka in 40 širi želodčnih vzorci raka, kot je navedeno predstavnik HE obarvanjem (slika 2A). V tej razvrstitvi, celice razširjenega raka, ki jih zaradi njihove omejene prodorne moči, agregata in proizvajajo vezane mase v obliki polypoid in fungating poškodb. Nasprotno, celice infiltracijski karcinoma širijo periferno in široko, in masna tumorja ne tvori. Testirali smo ekspresijo miR-145 in FSCN1 mRNA raka želodca v primerjavi s sosednjo normalno želodčne sluznice, ki ga PCR v realnem času. miR-145 je izredno navzdol urejeno v infiltracijski raka želodca v primerjavi z razširitvijo raka želodca, medtem ko je izraz FSCN1 mRNA izjemno reguliran (slika 2B). Izbrali smo 10 infiltracijsko želodčni vzorcev raka in 10 širi želodčne vzorcev raka, skupaj z njihovimi sosednjimi zdravega tkiva za analizo izražanje qPCR in zahodni blot. Splošne ekspresijski nivoji miR-145 so bile nižje, zlasti v infiltracijski želodčnega raka vzorcih v primerjavi s sosednjo normalno želodčne sluznice. V nasprotju s tem pa so splošne ravni mRNA /proteinske FSCN1 višja v infiltracijski raka želodca (slika 2C). Zato je izraz miR-145 in njegovega domnevnega cilja FSCN1 imel močan inverzno razmerje v človeškega raka želodca infiltracijsko tipa, kar kaže, da so bistvene vloge miR-145 in FSCN1 želodčnega invazije raka.

MIR -145 neposredno namenjen FSCN1 v rakavih celicah želodca

če želite ugotoviti, miR-145 uravnava izražanje FSCN1 v želodčnih rakavih celic, najprej do reguliranih raven miR-145 v raka želodca 803 MGC celic s pomočjo ki temelji lentivirusni vektor. Nato smo izvedli qPCR, ki je razkrila, da miR-145 čezmernim občutno navzdol regulirano raven mRNA FSCN1 (slika 3A) in Western Blot poskusov je potrdila, da je bila raven beljakovin FSCN1 zatreti tudi v miR-145-s prekomerno ekspresijo celic (slika 3B ). Nasprotno pa je imelo za posledico rasklapanje miR-145 ravneh in z uporabo inhibitor miR-145 v bistveno povzroča FSCN1 mRNA /beljakovine izraz tako SGC-7901 in MGC-803 celic (slika 3c). Ustvarili smo kresnice luciferaza reporterski vektor, ki vsebuje FSCN1 3 'UTR in nato co-transfektiranih MGC-803 celic z miR-145 posnema ali inhibitor miR-145, da razišče, če FSCN1 je neposreden cilj miR-145. V lizati smo analizirali luciferazno aktivnost 24 h post-transfekciji. Luciferazni test je pokazal, da MIR-145 posnema povzročilo približno zmanjšanje za 55% dejavnosti, medtem ko je inhibitor miR-145 v MGC-803 celic v primerjavi z miR-negativne kontrole (slika 3D) se je povečala luciferazno aktivnost za 62%. Poleg tega smo mutirala tri glavne domnevna prepoznavanja elementov miR-145 (MREs) v "UTR preko QuikChange mutagenezo FSCN1 3 za uporabo v luciferazni test (slika 3D). Rezultati so pokazali, da so bili regulativni učinki miR-145 posnema ali miR-145 zaviralca predvsem odpravljeno, ki je potrdila, da so bile za dušenje zvoka učinki miR-145 na FSCN1 odpravijo do motenj interakcij miR-MRE (slika 3D). Kolektivno, te študije dala nesporne dokaze, da je FSCN1 neposreden cilj miR-145 v želodčnih rakavih celic.

je zatiranje FSCN1 potrebno za miR-145, da zavira migracije in vdor želodčnih rakavih celic

rak želodca MGC-803 in SGC-7901 celice stabilno transfektirali z dvema različnima FSCN1 shRNAs da zavira FSCN1, da bi bolje razumeli potencialno vlogo FSCN1 v miR-145-posredovano migracije tumorja in invazije. Učinkovitost interferenca FSCN1 shRNAs je potrdila zahodni blot analizo (slika 4A in 4B). Rezultati transwell Test je pokazal, da je sposobnost celic, da se selijo in zavzemanja zelo zatreti po podreti izražanje FSCN1 v MGC-803 in SGC-7901 celic v primerjavi z negativnimi kontrolnimi celicami (slika 4c in 4d), kar kaže na pomembno vlogo od FSCN1 v teh procesih.

miR-145 je znano, da zavirajo migracijo in vdor različnih vrst raka, vključno z rakom želodca [10, 19, 21]. Kot je bilo pričakovati, uveljavlja izraz miR-145 je povzročilo znatno zmanjšal migracije in invazijo stopnje v MGC-803 in SGC-7901 celic. Poleg tega, hkratno ponovno izraz FSCN1 ogrožena MIR-145-supressed migracijo celic in invazijo zmožnosti skoraj popolnoma v obeh miR-145-transfekciji MGC-803 in SGC-7901 celic (slika 5A in 5B). Nasprotno pa smo uporabili FSCN1 shRNA da zavira FSCN1 izraza v pokoj-145-zaviralcev transfekcije MGC-803 in SGC-7901 celic. Rasklapanje od FSCN1 popolnoma obrnilo miR-145-inhibitor povzročeno aktivacijo celični migraciji in invazije, kar kaže na pomembno vlogo FSCN1 v tem procesu (slika 5C in 5D). Kolektivno, zgoraj navedeni rezultati pokazali, da je zatiranje FSCN1 potrebno za miR-145, da zavira migracije in vdor želodčnih rakavih celic.

Pogovor

Deregulacija urada je bil vpleten v različne človeški raka, vključno z rakom človeške želodčne. Vendar pa molekularne mehanizme, s katerimi urada modulirajo proces karcinogenezi in obnašanje rakave celice niso bile popolnoma določena. Razlika miR izraz v tumorjih v primerjavi z njihovimi sosednjimi normalnih tkivih ali med skupinami vzorcev tumorjev, ki imajo ugodne ali slabo klinični izid je bil uporabljen za ustvarjanje MIR podpisov z možnostjo prognostičnih in /ali napovedno vrednost z nekaterimi vrstami raka. Kljub temu pa je udeležba odklonsko izraženih MIRS v človeškega raka želodca ostaja v veliki meri neraziskana. Predhodne študije so poročali, da je miR-145 navzdol urejeno v različnih človeških malignimi boleznimi, vključno z rakom dojke, pljučnim rakom in rakom želodca [9, 22, 23]. Lu et al [24] ugotovila, da miR-145 funkcije kot zaviralnih in je namenjen dvema onkogeni, in sicer ANGPT2 in NEDD9, v karcinomom ledvičnih celic. Druga študija je pokazala, da miR-145 zatira migracijo celic in invazijo z zaviranjem N-kadherina prevajanje beljakovin v želodčnih rakavih celic [10]. Vendar Kamikihara et al [11] je pokazala, da le 21% bolnikov z rakom želodca N-kadherina pozitivni izraz kot analizirali z imunohistokemijo. Zato je alternativa molekularni mehanizem, ki je podlaga MIR-145 sodeluje pri regulaciji celični migraciji in invazije na raka želodca.

V tej študiji smo potrdili, da je miR-145 navzdol urejeno v želodčnih tkivih raka v primerjavi v sosednjih zdravih želodčne sluznice, kar je v skladu s predhodnimi ugotovitvami [9]. V poskusu, da se opredelijo nove nadaljnjim ciljev miR-145, smo uporabili podatkovno bazo TargetScan za izvajanje presejalnih eksperimente. Od več kandidati, smo izbrali FSCN1 za nadaljnje poskuse, ker je bilo ugotovljeno, FSCN1, da igrajo pomembno vlogo pri migraciji tumorja in invazije. Več podatkov kaže, da je FSCN1 cilj neposredno dolvodno od pokoj-145. Prvič, vsebuje FSCN1 zelo ohranjena zaporedja na 3 'UTR, ki dopolnjujejo zaporedju semen miR-145. Drugič, inverzna korelacija med miR-145 in FSCN1 najdete v parnih vzorcih bolnikov z rakom želodca. Nazadnje, ko razvrščanje kliničnih vzorcev v širi vrsto in infiltracijsko tip, ki temelji na klasifikaciji Ming, smo ugotovili, da je miR-145 izredno navzdol urejeno v infiltracijski raka želodca v primerjavi z razširitvijo raka želodca. Medtem pa se je pojavil tudi močnejši inverzna korelacija med izražanjem miR-145 in FSCN1 v infiltracijski rakom želodca. Sedanja študija prinese nova spoznanja o povezavi med miR-145 in FSCN1 v infiltracijski rakom želodca. V prejšnji raziskavi, Lauren razdeljen želodčni rak v naslednjih dveh vrst: črevesne vrsto in razpršenega tipa [25]. Črevesnega raka tipa, je opisan kot žlez tumor spominja debelega karcinom in difuzna rak vrsta je sestavljena iz osamljenih ali majhnih skupin celic brez tvorbe žlez. Vrste tumor v klasifikaciji Lauren in Ming se tesno ujemale med seboj. Večina širi tumorji imajo značilnosti raka črevesnih tipa, in najbolj infiltracijsko tumorji so razpršeni tip raka [5]. Vendar pa je veliko število želodčnih karcinomov ni mogoče uvrstiti v črevesnem tipa ali razpršenega tipa, vključno nediferenciranih raka, ki ne nabirajo difuzno in žleznega raka, ki se nabirajo difuzne. Poleg tega je odkrivanje zgodnjega raka želodca uporablja razvrstitev Lauren je relativno težko, ker je v zgodnji fazi razpršenega raka tipa, po definiciji ni razpršeno. Vendar pa se lahko razvrstitev Ming reševanje teh problemov [5]. V razvrstitvi Ming, vzorci porazdelitve celic jasno kažejo na bistveno razliko v njihovem potencialu za rast, kot tudi moč penetracije in invazijo. Kot je infiltracijsko rak želodca bolj invazivna, kot širitev raka želodca, ti rezultati kažejo, da miR-145 in FSCN1 tako igrajo ključne vloge v želodcu invazije raka.

Čeprav je več poročil vpleteni ureditev FSCN1 ga urada v mnogih karcinomov [19, 20, 26], bi po našem najboljšem znanju, ne poročilu je predlagal, da je FSCN1 neposreden cilj miR-145 pri raku želodca. V tej študiji, smo potrdili, da miR-145 zatira FSCN1 izraz in se neposredno cilja na 3 'UTR od FSCN1 v želodčnih rakavih celic. Poleg tega, hkratno ponovno izraz FSCN1 ogrožena miR-145-supressed celične migracije in invazije zmožnosti skoraj popolnoma miR-145-transfektirane MGC-803 in SGC-7901 celic, ki so pokazali, da je zatiranje FSCN1 potrebno za miR -145 zavira migracije in vdor želodčnih rakavih celic. Zato FSCN1 je pomemben nadaljnji cilj miR-145 pri urejanju želodca invazijo raka.

Na kratko, ta študija je ugotovila, da je miR-145 predvsem navzdol urejeno v infiltracijski raka želodca ter da miR-145 izraz in FSCN1 izraz imajo močan inverzno povezavo v infiltracijski rakom želodca. Funkcionalno, smo dokazali, da miR-145 zavira migracijo celic in invazijo na raka želodca predvsem neposredno ciljanje FSCN1. Zato lahko, ponovno izražanje miR-145 je treba raziskati alternativne terapevtske strategije za boj proti raku želodca.

• Plos ONE: Atomic Vpogled v spremenjenih O6-metilgvanina-DNA methyltransferase Protein arhitekturo želodčnega raka
• Plos ONE: Zdravje vedenje korejskih želodčnega raka preživele s hipertenzijo: nagnjenost Analiza KNHANES III-V (2005-2012)