PLoS One: Fordított korrelációja microRNS-145 és FSCN1 befolyásoló gyomorkarcinóma Migráció és Invasion

absztrakt katalógusa

A mikroRNS (MIRS) fontos szerepet játszanak a génexpresszió folyamatok során tumorigenezis és a tumor fejlődését. Korábbi tanulmányok azt találták, hogy a miR-145 lefelé szabályozni a gyomorban daganatos és kapcsolatban van a tumor migrációs és behatolás. Azonban mind a molekuláris mechanizmusa és funkciója a miR-145 gyomorrákban továbbra sem tisztázott. A jelen tanulmány az első bemutató a jelentős leszabályozza a miR-145 expresszió infiltratív gyomorrák képest bővül gyomorrák. Emellett korreláció analízissel erős fordított korrelációt miR-145 és FSCN1 expressziós szinteket infiltratív gyomorrák. Továbbá kimutattuk, hogy a miR-145 közvetlenül célozza FSCN1 és elnyomja a sejtek migrációját és invázióját gyomorrákban. Leütéssel a kifejezése FSCN1 vezetett elnyomása migrációs és behatolás a gyomor rákos sejtek, és újra kifejező FSCN1 a miR-145-overexpresszáló sejtek megváltoztatta migrációs és behatolás hibák. Így arra a következtetésre jutottunk, hogy a miR-145 szabályozza a sejtek migrációs és behatolás gyomorrákban elsősorban közvetlenül megcélzó FSCN1. Katalógusa

Citation: Chen Jj, Cai WY, Liu XW Luo QC, Chen G, Huang Wf, et al . (2015) Fordított Korreláció microRNS-145 és FSCN1 befolyásoló gyomorkarcinóma migrációs és behatolás. PLoS ONE 10 (5): e0126890. doi: 10,1371 /journal.pone.0126890 katalógusa

Akadémiai Kiadó: Chengfeng Yang, Michigan State University, Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: január 14, 2015; Elfogadva: április 8, 2015; Megjelent: május 26, 2015 katalógusa

Copyright: © 2015 Chen et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra katalógusa

Az adatok elérhetősége: Minden lényeges adatot belül a papír és az azt támogató információs fájlokat. katalógusa

Forrás: 1. Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (Grant No. 81172283) KVB (http://www.nsfc.gov.cn/). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. 2. Természettudományi Alapítvány Fujian tartomány (Grant No. 2012D037) KVB (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a gyomorrák az egyik legmagasabb a halálozási aránynak rosszindulatú daganatok világszerte [1]. Továbbfejlesztett orvosi technológia javíthatja eredményét gyomorrák. Azonban, gyomor rák továbbra is a második leggyakoribb oka a rák összefüggő halálesetek [2], amely által okozott tumor invázió és metasztázis. Együtt, invázió és metasztázis alkotnak folyamat, amelyben a rosszindulatú tumorsejtek áthelyezése egy primer oldalon, hogy más területeken, majd alkotnak tumorokat a távoli oldalon keresztül a nyirok csatornán, a véredények vagy testüregbe [3]. Ezért tisztázása szerepet játszó molekuláris mechanizmusok fejlesztése és invazivitásának gyomorrák szükséges. Katalógusa

1977-Ming sorolt ​​gyomor carcinoma a bővülő és infiltratív típusok alapján a növekedés és invazív minták [4]. Ezek a típusok könnyen felismerhető szövettanilag. Bővítése karcinómák nőnek tömegesen és expanzió képződését eredményezi diszkrét tumor gócok, míg beszüremítette karcinómák tumorsejtek hogy megtámadják egyedileg [5]. A két típusú gyomorrák, infiltratív gyomorrák több invazív, mint a bővülő gyomorrák. Az ilyen osztályozás így olyan utalás, hogy megkülönböztessék gyomorrák mintákat klinikailag, és megkönnyíti a részletes tanulmányok kapcsolatos molekuláris mechanizmusok gyomorrák.

A mikroRNS (MIRS) kritikus szerepet játszanak számos biológiai folyamatban, köztük a rákos folyamatok, által közvetlenül gátolta a kifejezés a cél mRNS-ek a különböző molekuláris mechanizmusok [6, 7]. Továbbá, MIRS alávetni aberráns szabályozás alatt carcinogenesis és működhet, mint akár onkogének vagy tumorszupresszorok [7]. A legújabb kutatások kimutatták, hogy sok MIRS hatással proliferáció és invázió gyomorrákban. miR-21 up-szabályozott gyomorrák és elősegíti a tumor proliferáció és invázió gyomorrákban megcélozva PTEN [8]. Ezzel szemben, a miR-145 alulszabályozott humán gyomorrák [9]. A kutatások azt mutatják, hogy a miR-145 elnyomja a sejtek migrációját és invázióját gátlásával N-cadherin fehérjeszintézist gyomorrákban sejtekben [10]. Azonban Kamikihara munkatársai [11] kimutatható az expressziós szintek N-cadherin 146 gyomorrákos betegeknél immunhisztokémiai, és az eredmények azt mutatták, hogy csak a 31 beteg (21%) volt az N-kadherin-pozitív expressziót. Ezért néhány más molekuláris mechanizmusai miR-145 lehet szabályozni sejt migrációs és behatolás gyomorrákban.

FSCN1 egy 55 kDa-os aktin-kötő fehérje, amely együtt jár filopódiumok és az aktin-alapú kiemelkedés kialakulását, és ez elősegíti a sejtek motilitását, migrációs és behatolás [12, 13]. FSCN1 kifejezés hiányzik, vagy alacsony normál hámban, de FSCN1 overexpresszálódik sok rosszindulatú daganatai, beleértve a colorectalis adenomák, epithelialis petefészekrák és nyelőcső laphámrák [14-16]. Ezen kívül, egy sor vizsgálatok jelezték, hogy végrehajtható FSCN1 expressziója növeli a proliferációt és invázió a petefészek és gyomor rákos sejtek [17, 18].

A legújabb vizsgálatok azt találták, hogy a miR-145 működik, mint egy tumor szupresszor és hogy miR-145 túltermelése elnyomja migrációs és behatolás a prosztatarák és a húgyhólyagrák célzott FSCN1 [19, 20]. Ezen túlmenően, a miR-145 elnyomja gyomorrák sejt migrációs és behatolás célzásával N-cadherin. Azonban a pozitív expresszióját aránya az N-kadherin a gyomorrák szövetekben csak 21% [10, 11]. Ezért meghatározó legfontosabb cél gén a miR-145 szabályozásában gyomorrák invázió van szükség. Katalógusa

A jelen tanulmányban azt találták, hogy az első miR-145 expressziója jelentősen lefelé szabályozni infiltratív gyomorrák képest bővülő gyomorrák. Sőt, azt bizonyították, hogy a miR-145 elnyomott sejt migrációs és behatolás gyomorrákban elsősorban közvetlenül megcélzó FSCN1, amely kiemelte a miR-145 és FSCN1 szabályozásában gyomorrák malignus fenotípus. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

klinikai minták katalógusa

Minden klinikai mintát vettünk a tájékozott beleegyezés átesett betegek gastrectomián a Zhongshan Kórház Xiamen Egyetem Xiamen (Fujian tartomány, Kína) 2012 júniusától az október 2013 . Összességében a 160 pár összegyűjtött klinikai minták 80 osztályozatlan gyomorrák mintából 40 beszüremítette gyomorrák mintákat és 40 bővülő gyomorrák mintákat. A tumor patológiai típus megerősítette patológia vizsgálata, és az egyező normál gyomor nyálkahártyája gyűjtöttünk több mint 5 cm-re a tumorokat. Katalógusa

Etikai nyilatkozat katalógusa

A vizsgálati protokollok voltak összhangban etikai irányelvei Helsinki nyilatkozat (1975) és hagyta jóvá az orvosi etikai bizottság (No. 20081012) Zhongshan Kórház Xiamen Egyetem Xiamen (Fujian tartomány, Kína). Kaptunk írásos beleegyezése nyilatkozatokat minden résztvevő részt vesz ebben a vizsgálatban. Katalógusa

sejtvonalak

Az MGC-803, SGC-7901 humán gyomorrák sejtvonalak vásárolt Institute of Cell Biology (Shanghai Kína, http://www.cellbank.org.cn). A 293T humán embrionális vese sejtvonalat az American Type Culture Collection (ATCC, MD, USA). MGC-803, SGC-7901 sejteket tartottunk fenn RPMI-1640 közegben, míg a 293T-sejteket tartottunk fenn DMEM tápközegben. Minden média tartalmazott 10% magzati borjúszérumot (FBS), 100 egység /ml penicillinnel és 100 ng /ml sztreptomicint (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).

luciferáz riporter assay

A sejteket transzfektáltuk luciferáz riporter gént, β-galaktozidáz (β-gal) és miR-145 utánozza, vagy miR-145 inhibitor (Guangzhou RiboBio) Lipofectamine 2000 transzfekciós reagenssel (Invitrogen). A luciferáz aktivitást mértük 48 órával a transzfekció után, és a transzfekciós hatékonyság normalizáltuk belső β-gal-aktivitást.

RNS extrakció és RT-qPCR

Teljes RNS-t extraháltunk TRIzol reagens (Invitrogen ) és reverz átírt M-MuLV reverz transzkriptáz (Qiagen), hogy cDNS-szerint, a gyártó protokollja szerint. Real-time PCR-t SYBR Green-alapú kimutatási egy Rotor-Gene 6000 eszköz (Corbett Life Science) alkalmazásával a gyártó utasításai és a primer párok az 1. táblázatban felsorolt ​​miR-145 és U6 primereket nyert Qiagen. GAPDH vagy U6 endogén kontrollt használunk belső standardként, és az eredményeket kiszámított △△ CT (ahol Ct az küszöb ciklus) módszerrel.

plazmidszerkezetben

alkalmazott primerek az építőiparban a luciferáz riporter és plazmidokat az 1. táblázatban felsorolt ​​az emberi FSCN1 3 'nem transzlálódó régiót (UTR) amplifikáltuk MGC-803 cDNS-t PCR-amplifikálással, az LA-Taq DNS-polimerázt (TaKaRa) és klónozzuk downstream az luciferázt kódoló sorrendben a pMIR-JELENTÉS (Ambion) vektor a SacI és MluI restrikciós helyek (Promega) megépíteni a humán FSCN1-3'UTR-luciferáz riporter. Mutációkat vittünk be a miR-kötőhelyek segítségével QuikChange mutagenezis készlet (TransGen). A miR-145 és a FSCN1 expressziós plazmidok, szekvenciákat PCR-rel amplifikáltuk, és beklónoztuk a Spel /Nhel oldalak és Xbal /Ndel oldalak, rendre a PLV-cs.4.0-alap vektor (Promega). A FSCN1 interferencia plazmidot, két pár szekvenciákat illesztjük és szubklónoztuk PLKO.1 szerint a gyártó utasításai szerint.

lentivírus termelés és transzfekciós

HEK293T sejteket oltottunk 6 mérőhelyes Insert 24 óra a transzfekció előtt. A miR-145 expressziós plazmidot, FSCN1 shRNS plazmidot vagy FSCN1 expressziós plazmidot ezután együtt transzfektálunk csomagolás plazmidok (PHR és pCMV-VSV-G) a Lipofectamine 2000 transzfekciós reagenssel (Invitrogen). Vírusos felülúszókat összegyűjtöttük 48 órával a transzfekció után, centrifugáltuk 3000 g-vel 15 percig, és szűrjük át 0,45 um szűrőket (Millipore). Vírusos titereket transzdukáló HeLa sejtek sorozathígításait és elemzése GFP expresszió áramlási citométer segítségével. MGC-803 sejtek vagy 7901 sejteket 50-70% -os összefolyásig fertőztünk virális felülúszóval, amely 10 mg /ml polibrént 24 órán át. Friss tápközeget adtunk a fertőzött sejteket, melyeket később kiválasztott puromicin.

-migráció és inváziós vizsgálati eljárás

A sejteket (3x10 ^{5) vittünk rá 8,0 jim pórusméretű Boyden kamrák (Transwell, Corning Life Sciences, Acton, MA, USA) vagy bevontuk 10 ng Matrigel (BD Bioscience, Bedford, MA, USA) lyukanként (invázió vizsgálatok) vagy balra bevonat nélküli (a migráció esszék) szérummentes közegben, amely 10 g /l szarvasmarha szérum albumint tartalmaz. Tápközeg, amely 10% FBS-t szolgált kemoattraktáns az alsó kamrában. Nem behatoló sejteket eltávolítottuk pamuttörlővel után 36 óra (az invázió vizsgálatok) vagy 20 óra (migrációs assay). Megtámadta sejteket megfestettük hematoxilinnel (HE) és megszámoljuk. Az adatokat átlag ± SD három egyes kísérleteket.}

Western blot

A fehérjéket extraháljuk eritrocita lízis pufferrel (ELB; 50 mM Tris, 140 mM NaCl, 0,5% NP- 40 és 100 mM NaF (pH = 7,6)), amely 1 mM fenil-metánszulfonil-fluorid (PMSF, Sigma-Aldrich, USA). Mindegyik mintát választottunk el 10% -os SDS-PAGE gélen, majd átvisszük polivinilidén-difluorid (PVDF) membránokra. A membránokat blokkoltuk 5% tejjel és inkubáltuk primer nyúl anti-humán FSCN1 antitestet (1: 3000; Cell Signaling Technology, USA), vagy az egér anti-humán GAPDH (1: 5000; Sigma-Aldrich) ellenanyag egy éjszakán át 4 ° C-on . A membránokat ezután inkubáljuk a megfelelő torma peroxidázzal (HRP) konjugált szekunder antitestekkel (Thermo Fisher Scientific). A sávokat előhívjuk olyan fokozott kemilumineszcencia (ECL) rendszerrel (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, Egyesült Királyság). A GAPDH fehérje használtunk terhelési kontrollként.

Statisztikai analízis

Az adatokat fejezzük ki az átlag ± SD. A statisztikai szignifikanciát analizáltuk a Student-féle t-próba. A korreláció a miR-145 szintek és FSCN1 mRNS /fehérje expressziós szintjeit a humán gyomor rák úgy számítottuk ki, Spearman-féle korrelációs. Minden statisztikai analízist számított GraphPad Prism statisztikai szoftver (GraphPad Software). P katalógusa < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikáns (NS, nem szignifikáns, * P katalógusa < 0,05; ** P &katalógusa 0,01; *** P katalógusa < 0,001). katalógusa

Eredmények katalógusa

Erős inverz összefüggés a kifejezése miR-145 és feltételezett cél, FSCN1, az emberi beszüremítette típusú gyomorrák katalógusa

használtuk TargetScan adatbázis (http://www.targetscan.org), hogy azonosítsa a 3 'UTRs specifikus cél mRNS miR-145, amely szabályozza a migrációs és behatolás a gyomor rákos sejteket. Az összes megjósolt mRNS-ek, mi kiválasztott FSCN1, amelyet korábban már összefüggésbe a tumor migráció és invázió. FSCN1 is már erősen konzervált szekvenciák a 3 'UTR, amelyek kiegészítik a miR-145 mag sorrendben. Katalógusa

Először azt vizsgáltuk, hogy az összefüggés a miR-145 és FSCN1 lehet klinikailag releváns mérésével kifejezése miR-145 és FSCN1 mRNS /fehérje szint normál /tumor párosított minták 80 gyomorrákos betegeknél. A statisztikai elemzés kimutatta, egy szignifikáns fordított korreláció az expresszió a miR-145 és a kifejezés a FSCN1 mRNS /fehérje a 80 pár klinikai minta (ábra az 1A és 1B).

Ming sorolt ​​gastricus karcinómák be bővülő típus és infiltratív típusa alapján a növekedés és invazív minták és korreláció áll fenn Ming besorolás és a klinikai prognózis [5]. Ezért 40 beszüremítette gyomorrák mintákat és a 40 bővülő gyomorrák mintákat választottuk, ahogy azt a reprezentatív HE festés (2A ábra). Ebben a besorolási, a sejtek bővülő carcinoma, fogva korlátozott átütő ereje, összesített és készítsen egy körülírt tömeg formájában polypoid és fungating elváltozások. Ezzel szemben, a sejtek a infiltrativ karcinóma elterjedt perifériásan és széles körben, és a tumor tömege nem képez. Megvizsgáltuk a expresszióját miR-145 és FSCN1 mRNS gyomorrák, mint a szomszédos normál gyomornyálkahártya real-time PCR-rei. miR-145-ben jelentősen lefelé szabályozni infiltratív gyomorrák képest bővül gyomorrák, miközben a kifejezés FSCN1 mRNS figyelemreméltóan felfelé szabályozott (2B). Kiválasztottunk 10 infiltratív gyomorrák mintákat és 10 bővülő gyomorrák minták mellett a szomszédos normál szövetben elemezni expresszió qPCR és western blot. A teljes expressziós szintje a miR-145 alacsonyabbak voltak, különösen a infiltrativ gyomorrák mintákat összehasonlítva a szomszédos normál gyomor nyálkahártyáját. Ezzel ellentétben, a teljes mRNS /fehérje szintje FSCN1 magasabb volt a infiltrativ gyomorrák (2C ábra). Következésképpen a kifejezés a miR-145 és a feltételezett cél FSCN1 volt egy erős fordított összefüggés a humán infiltratív típusú gyomorrák, ezzel azt sugallva, hogy az alapvető szerepét a miR-145 és FSCN1 vannak gyomorrák invázió. Katalógusa

miR -145 közvetlenül célozza FSCN1 a gyomorrák sejtek

Annak meghatározására, hogy a miR-145 expresszióját szabályozza FSCN1 gyomor rákos sejtekben, akkor először fel szabályozott szintje miR-145 a gyomorrák MGC-803 sejtek használatával egy lentivírus-alapú vektorban. Ezután végre qPCR, amely feltárta, hogy a miR-145 túltermelése jelentősen leszabályozott mRNS szintje FSCN1 (3A ábra), és Western blot kísérletek igazolták, hogy a fehérje szintje FSCN1 is elnyomta a miR-145-overexpresszáló sejtek (3B ábra ). Ezzel szemben, kiütése miR-145 szintek segítségével a miR-145 inhibitor következtében lényegesen indukált FSCN1 mRNS /fehérje expressziót mind SGC-7901 és MGC-803 sejtek (3C). Mi generált szentjánosbogár luciferáz riporter vektor, amely a FSCN1 3 'UTR, majd ko-transzfektált MGC-803 sejtek miR-145 utánozza, vagy egy miR-145 inhibitor, hogy vizsgálja meg, ha FSCN1 közvetlen cél a miR-145. A lizátumokat analizáltuk luciferáz aktivitást 24 órával a transzfekció. A luciferáz esszé azt mutatta, hogy a miR-145 utánozza eredményezte megközelítőleg 55% -kal csökkent aktivitást, míg a miR-145 inhibitor növelte a luciferáz aktivitást 62% -kal az MGC-803 sejtek összehasonlítva a miR-negatív kontroll (ábra 3D). Sőt, mi mutált három fő feltételezett miR-145 felismerés elemek (MRes) a FSCN1 3 'UTR keresztül QuikChange mutagenezis használható a Luciferase Assay (ábra 3D). Az eredmények azt mutatták, hogy a szabályozó hatásai miR-145 utánozza, vagy a miR-145 inhibitor elsősorban megszüntette, amely megerősítette, hogy a hangtompító hatása a miR-145 a FSCN1 eltörölte a zavar a miR-MRE kölcsönhatások (ábra 3D). Együttesen ezek a vizsgálatok alapján meggyőző bizonyíték arra, hogy FSCN1 közvetlen célpontja a miR-145 gyomorrákban sejtekben. Katalógusa

elnyomása FSCN1 szükséges miR-145 gátolja a migrációs és behatolás a gyomorrák sejtek katalógusa

a gyomorrák MGC-803, SGC-7901 sejteket stabilan transzfektált két különböző FSCN1 shRNS gátlására FSCN1, hogy jobban megértsék a lehetséges szerepét FSCN1 a miR-145-közvetített tumor migrációs és behatolás. Az interferencia hatékonyságát FSCN1 shRNS megerősítette a Western blot analízis (ábra 4A és 4B). Transwell vizsgálati eredmények azt mutatták, hogy képes a sejtek vándorlását és megszállják nagyra elfojtott után bontani expresszióját FSCN1 a MGC-803, SGC-7901 sejtek összehasonlítva a negatív kontroll sejtek (4c, 4d), ezzel arra utal, alapvető szerepet a FSCN1 ezekben a folyamatokban.

miR-145 ismert, hogy elnyomják a migráció és invázió sok ráktípus, köztük gyomorrák [10, 19, 21]. Ahogy az várható volt, az erőszakos kifejezése miR-145 következtében lényegesen csökkent migrációs és behatolás aránya MGC-803, SGC-7901 sejtek. Ezenkívül egyidejű újbóli expresszióját FSCN1 sérül a miR-145-elnyomva sejt migrációs és behatolás képességét, szinte teljesen mindkét miR-145-transzfektált MGC-803, SGC-7901 sejtek (5A és 5B). Fordítva, szoktuk FSCN1 shRNS gátlására FSCN1 kifejezést miR-145 inhibitor transzfektált MGC-803, SGC-7901 sejtek. Kiütése FSCN1 teljesen megfordult a miR-145 gátló-közvetített aktiválását sejt migrációt és inváziót, ami arra utal, az alapvető szerepét FSCN1 ebben a folyamatban (ábra 5c és 5d) A. Együttesen a fenti eredmények igazolták, hogy az elnyomás FSCN1 szükséges miR-145 gátolja a migrációs és behatolás a gyomor rákos sejteket.

Discussion

A dereguláció MIRS hozták összefüggésbe különféle emberi rákos megbetegedések, beleértve az emberi gyomorrák. Azonban a molekuláris mechanizmusok, amelyek MIRS modulálják a folyamat a karcinogenezis és a viselkedését a rákos sejtek nem határozták meg teljesen. Differenciális miR expresszió daganatokban képest a közeli normál szövetekhez vagy a csoportok között a tumor minták kedvező vagy kedvezőtlen klinikai kimenetel arra használták, hogy generálni miR aláírásokat potenciális prognosztikai és /vagy prediktív érték bizonyos ráktípusok. Mindazonáltal, a részvétel a abnormálisan expresszált MIRS humán gyomorrák, nagyrészt feltáratlan. Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy a miR-145 alulszabályozott különféle emberi daganatok, beleértve a mellrák, a tüdőrák és a gyomorrák [9, 22, 23]. Lu és munkatársai [24] megállapította, hogy a miR-145 működik, mint egy tumor szuppresszor és célok két onkogének, nevezetesen ANGPT2 és NEDD9, a vesesejtes karcinóma. Egy másik tanulmány azt mutatta, hogy a miR-145 elnyomja a sejtek migrációját és invázióját gátlásával N-cadherin fehérjeszintézist gyomorrákban sejtekben [10]. Azonban Kamikihara munkatársai [11] megállapította, hogy csak 21% gyomorrákos betegek N-cadherin-pozitív kifejeződése által elemzett immunhisztokémia. Ezért egy alternatív molekuláris mechanizmusa a miR-145 szabályozásában vesz részt a sejtek migrációját és invázióját a gyomorrák. Katalógusa

A jelen tanulmányban azt megerősítette, hogy a miR-145 lefelé szabályozni a gyomorrák szövetekben képest a szomszédos normál gyomornyálkahártya, ami összhangban van a korábbi eredmények [9]. Arra törekszik, hogy azonosítsa az új downstream célpontok a miR-145, használtuk a TargetScan adatbázis screening kísérletek. Több jelölt, mi kiválasztott FSCN1 a további kísérletekhez, mivel FSCN1 azt találtuk, hogy fontos szerepet játszanak a tumor migráció és invázió. Számos bizonyíték arra utal, hogy FSCN1 a közvetlen downstream célpontja miR-145. Először is, FSCN1 tartalmaz erősen konzervált szekvenciák a 3 'UTR, amelyek komplementerek a miR-145 mag szekvencia. Másodszor, fordított korrelációt miR-145 és FSCN1 találtak a párosított mintákban gyomorrákos betegek. Végül, amikor minősítette klinikai mintákat széthúzása és infiltratív típus alapján Ming besorolását, azt találtuk, hogy a miR-145 rendkívül lefelé szabályozni infiltratív gyomorrák képest bővül gyomorrák. Közben egy erősebb fordított összefüggést is kimutattak között miR-145 és FSCN1 expressziós szinteket infiltratív gyomorrák. A jelen tanulmány új fényt vetnek a korreláció miR-145 és FSCN1 az infiltratív gyomorrák. Egy korábbi tanulmány, Lauren osztva gyomorrák a következő két típusa van: a bél típusa és a diffúz típusú [25]. Intesztinális típusú rák van leírva, mint egy mirigyes tumor hasonlító vastagbél-karcinóma, és diffúz típusú rák áll magányos vagy kis sejtcsoportok képződése nélkül mirigyek. A daganat típusok in Lauren és Ming besorolás szorosan megfelelnek egymásnak. A legtöbb bővülő daganatok jellemzői intesztinális típusú rák, és a legtöbb infiltratív tumor diffúz típusú rákok [5]. Ugyanakkor jelentős számú gyomor carcinoma nem sorolhatók be a bél típusú vagy diffúz típusú, beleértve a differenciálatlan rákokat, amelyek nem hatolnak diffúz és mirigyes rák, hogy beszivárog diffúz. Ezen túlmenően, az észlelési korai gyomorrák segítségével Lauren besorolás viszonylag nehéz, mert a korai szakaszban a diffúz típusú rák, definíció szerint, nem diffúz. Azonban Ming osztályozás megoldja ezeket a problémákat. [5] Ebben Ming besorolás, a mintákat a sejt eloszlás egyértelműen jelzik egy alapvető különbség a növekedési potenciál, valamint a hatalom és a penetráció invázió. Ahogy infiltratív gyomorrák sokkal invazív, mint a bővülő gyomorrák, ezek az eredmények arra utalnak, hogy a miR-145 és FSCN1 egyaránt döntő szerepet játszanak a gyomorrák invázió. Katalógusa

Bár több jelentések játszik a szabályozás FSCN1 által MIRS sok carcinoma [19, 20, 26], hogy a legjobb tudásunk, sem a jelentés azt javasolta, hogy FSCN1 közvetlen célpontja a miR-145 gyomorrákban. Ebben a tanulmányban azt megerősítette, hogy a miR-145 elnyomja FSCN1 kifejezés és közvetlenül célozza meg a 3 'UTR FSCN1 a gyomor rákos sejteket. Ezen túlmenően, a szimultán re-expresszálásához FSCN1 sérül a miR-145-elnyomva sejt migrációs és behatolás képességét, csaknem teljesen miR-145-transzfektált MGC-803, SGC-7901 sejteket, ami azt jelezte, hogy a elnyomása FSCN1 szükséges miR -145, hogy gátolja a migrációs és behatolás a gyomor rákos sejteket. Ezért FSCN1 fontos downstream célpontja miR-145 szabályozásában gyomorrák invázió. Katalógusa

Összefoglalva, a jelen vizsgálat megállapította, hogy a miR-145 elsősorban lefelé szabályozni infiltratív gyomorrák és miR-145 expresszió és FSCN1 kifejezés erős inverz korrelációt infiltratív gyomorrák. Funkcionálisan kimutattuk, hogy a miR-145 elnyomja a sejtek migrációját és invázióját gyomorrákban elsősorban közvetlenül megcélzó FSCN1. Ezért helyreállítása a kifejezés a miR-145 is meg kell vizsgálni, mint alternatív terápiás stratégia ellen gyomorrák. Katalógusa

• PLoS One: Atomic Betekintés a megváltozott O6-metilguanin-DNS Methyltransferase Protein Architecture gyomorrákban
• PLoS One: egészségviselkedésekre koreai gyomorkarcinóma Túlélők hypertonia: A Hajlandóság elemzése KNHANES III-V (2005-2012)