PLoS ONE: Reverse Correlatie tussen MicroRNA-145 en FSCN1 invloed maagkanker Migratie en Invasion

Abstract

MicroRNA (miRs) spelen een belangrijke rol bij het moduleren van genexpressie tijdens de processen van tumorvorming en de ontwikkeling van tumoren. Eerdere studies hebben aangetoond dat miR-145 wordt neerwaarts gereguleerd in de maag neoplasma en is gerelateerd aan de tumor migratie en invasie. Zowel het moleculaire mechanisme en functie van miR-145 in maagkanker onduidelijk. De huidige studie is de eerste demonstratie van de aanzienlijke neerwaartse regulatie van miR-145 expressie in infiltratieve maagkanker in vergelijking met het uitbreiden van maagkanker. Daarnaast correlatie analyses bleek sterke inverse correlaties tussen miR-145 en FSCN1 expressie niveaus in infiltratieve maagkanker. Verder hebben we aangetoond dat miR-145 rechtstreeks richt FSCN1 en onderdrukt cel migratie en invasie bij maagkanker. Neerhalen van de expressie van FSCN1 leidde tot de onderdrukking van de migratie en invasie in maagkanker cellen, en opnieuw tot expressie FSCN1 in miR-145-overexpressie cellen omgekeerd hun migratie en invasie gebreken. Zo hebben we geconcludeerd dat miR-145 reguleert cel migratie en invasie bij maagkanker in de eerste plaats door direct targeting FSCN1

Visum:. Chen Jj, Cai Wy, Liu Xw, Luo Qc, Chen G, Huang Wf, et al . (2015) omgekeerde correlatie tussen MicroRNA-145 en FSCN1 invloed maagkanker Migratie en invasie. PLoS ONE 10 (5): e0126890. doi: 10.1371 /journal.pone.0126890

Academic Editor: Chengfeng Yang, Michigan State University, VERENIGDE STATEN

Ontvangen: 14 januari 2015; Aanvaard: 8 april 2015; Gepubliceerd: 26 mei 2015

Copyright: © 2015 Chen et al. Dit is een open toegang Artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Data Beschikbaarheid: Alle relevante gegevens zijn binnen het papier en de Ondersteunende informatie bestanden

Financiering:. 1. National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81172283) JCC (http://www.nsfc.gov.cn/). De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript. 2. Natural Science Foundation van de provincie Fujian (Grant No. 2012D037) JCC (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript

Competing belangen:.. De auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Maagkanker is een van de hoogste sterftecijfers van kankertumoren wereldwijd [1]. Verbeterde medische technologie kan de uitkomst van maagkanker te verbeteren. Blijft echter maagkanker de tweede belangrijkste oorzaak van kankersterfte [2], die wordt veroorzaakt door tumorinvasie en metastase. Samen invasie en metastase vormen een proces waarbij kwaadaardige tumorcellen brengen van een primaire locatie naar andere gebieden en vormen dan tumoren op een afgelegen site via de lymfatische kanaal, bloedvaten of lichaamsholte [3]. Daarom verduidelijkt de moleculaire mechanismen die betrokken zijn bij de ontwikkeling en invasiviteit van maagkanker is noodzakelijk.

In 1977, ingedeeld Ming maagcarcinomen in de uitbreiding en infiltratieve vormen op basis van hun groei en invasiviteit patronen [4]. Deze types zijn gemakkelijk herkenbaar histologisch. Uitbreiding carcinomen groeien massaal en expansie resulteert in de vorming van afzonderlijke tumoren, terwijl infiltratieve carcinomen tumorcellen die individueel binnendringen [5]. Van de twee vormen van maagkanker, infiltratieve maagkanker is invasief dan uitbreiden maagkanker. Een dergelijke kwalificatie verschaft aldus een verwijzing naar maagkanker monsters klinisch onderscheiden en maakt gedetailleerde studies over de moleculaire mechanismen van maagkanker.

MicroRNAs (miRs) spelen cruciale rol in vele biologische processen, waaronder kanker processen, door direct remmen de expressie van doelwit mRNA via verschillende moleculaire mechanismen [6, 7]. Bovendien miRs ondergaan afwijkende regulering tijdens carcinogenese en kan fungeren als zowel oncogenen of tumor suppressors [7]. Recente studies hebben aangetoond dat veel miRs invloed proliferatie en invasie bij maagkanker. miR-21 is opgereguleerd bij maagkanker en bevordert tumor proliferatie en invasie bij maagkanker doelwit PTEN [8]. Daarentegen wordt miR-145 neerwaarts gereguleerd in menselijke maagkanker [9]. Bovendien heeft onderzoek aangetoond dat miR-145 celmigratie en invasie kan onderdrukken door het remmen van N-cadherine eiwit vertaling bij maagkanker cellen [10]. Echter, Kamikihara et al [11] merken op dat de expressie van N-cadherine bij 146 patiënten met maagkanker door immunohistochemie, en de resultaten toonden aan dat slechts 31 patiënten (21%) hadden N-cadherine-positieve expressie. Daarom kan een andere moleculaire mechanismen van miR-145 celmigratie en invasie bij maagkanker regelen.

FSCN1 is een 55-kDa-actine-bindend eiwit dat is geassocieerd met filopodia en actine gebaseerde kratervorming, en bevordert de cel beweeglijkheid, migratie en invasie [12, 13]. FSCN1 expressie afwezig is of laag is in normaal epitheel, maar FSCN1 tot overexpressie wordt gebracht in vele carcinomen, met inbegrip van colorectale adenomen, epitheliale eierstokkanker en oesofageale plaveiselcelcarcinoom [14-16]. Bovendien is een aantal studies hebben aangetoond dat gedwongen FSCN1 expressie verhoogt de proliferatie en invasie van eierstokkanker en maagkanker cellen [17, 18].

Recente studies hebben aangetoond dat miR-145 functioneert als een tumor suppressor en dat miR-145 overexpressie onderdrukt migratie en invasie bij prostaatkanker en blaaskanker doelwit FSCN1 [19, 20]. Bovendien, miR-145 onderdrukt maagkanker cel migratie en invasie door zich te richten N-cadherine. De positieve expressiesnelheid van N-cadherine bij maagkanker weefsels slechts 21% [10, 11]. De bepaling van de belangrijkste doelgen van miR-145 in het reguleren van maagkanker invasie noodzakelijk.

In de onderhavige studie hebben we eerst gevonden dat miR-145 expressie werd opmerkelijk downgereguleerd in infiltratieve maagkanker vergeleken met die in uitbreiding maagkanker. Bovendien hebben we aangetoond dat miR-145 onderdrukt cel migratie en invasie bij maagkanker in de eerste plaats door direct targeting FSCN1, waarin de rol van miR-145 en FSCN1 in de regulatie van maagkanker kwaadaardige fenotypes gemarkeerd.

Materialen en methoden

klinische monsters

Alle klinische monsters werden verzameld met de geïnformeerde toestemming van de patiënten die gastrectomie ondergingen in het Zhongshan ziekenhuis van Xiamen University in Xiamen (provincie Fujian, China) van juni 2012 tot oktober 2013 . In totaal heeft de 160 paren van de verzamelde klinische monsters die 80 niet-geclassificeerde maagkanker monsters, 40 infiltratieve maagkanker monsters en 40 uitbreiding van maagkanker monsters. De tumor pathologische soort werd bevestigd door de pathologie onderzoek, en de bijbehorende normale maag slijmvliezen werden verzameld van meer dan 5 cm afstand van de tumoren.

Ethics statement

De studie protocollen waren in overeenstemming met de ethische richtlijnen van de Verklaring van Helsinki (1975) en goedgekeurd door de medisch ethische Commissie (nr 20081012) van Zhongshan ziekenhuis van Xiamen University in Xiamen (provincie Fujian, China). We verkregen schriftelijke toestemming verklaringen van alle bij dit onderzoek betrokken deelnemers.

Cellijnen

Het MGC-803 en SGC-7901 humane maagkanker cellijnen werden aangekocht van het Institute of Cell Biology (Shanghai , China, http://www.cellbank.org.cn). De 293T menselijke embryonale niercellijn werd verkregen van de American Type Culture Collection (ATCC, MD, USA). MGC-803 en SGC-7901-cellen werden gehandhaafd in RPMI-1640 medium, maar 293T-cellen in DMEM gehandhaafd. Alle media die 10% foetaal runderserum (FBS), 100 U /ml penicilline en 100 ug /ml streptomycine (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).

Luciferase reporter assay

De cellen werden getransfecteerd met luciferase reporter genen, β-galactosidase (β-gal) en miR-145 bootst of miR-145 remmer (Guangzhou RiboBio) met gebruik van Lipofectamine 2000 transfectiereagens (Invitrogen). Luciferase activiteit werd gemeten 48 uur na transfectie en transfectie-efficiëntie werd genormaliseerd interne β-gal-activiteit.

RNA-extractie en RT-qPCR

Totaal RNA werd geëxtraheerd met behulp van TRIzol reagens (Invitrogen ) en reverse getranscribeerd met M-MuLV reverse transcriptase (Qiagen) om cDNA te produceren volgens het protocol van de fabrikant. Real-time PCR werd uitgevoerd met SYBR Green-gebaseerde detectie in een Rotor-Gene 6000 instrument (Corbett Life Science) volgens de instructies van de fabrikant en met de primerparen in Tabel 1 miR-145 en U6 primers werden verkregen van Qiagen vermeld. GAPDH of U6 endogene controle werd gebruikt als interne standaard, en de resultaten werden berekend met de △△ CT (CT wanneer de drempelcyclus) methode.

Plasmideconstructie

De primers die voor de constructie van de luciferase reporters en plasmiden zijn opgesomd in Tabel 1. de menselijke FSCN1 3 'onvertaalde gebied (UTR) werd uit MGC-803 cDNA geamplificeerd door PCR amplificatie met de LA Taq DNA polymerase (TaKaRa) en gekloneerd stroomafwaarts van de luciferase coderende sequentie in de PMIR-REPORT (Ambion) vector in de SacI en Mlul-restrictieplaatsen (Promega) voor het menselijk FSCN1-3'UTR-luciferase reporter construct. Mutaties werden geïntroduceerd in de miR-bindende sites die gebruik maken van een QuikChange Mutagenese Kit (andere genen). Voor de miR-145 en FSCN1 expressieplasmiden, werden sequenties geamplificeerd door PCR en gekloneerd in de Spel /NheI en XbaI plaatsen /NdeI-plaatsen van respectievelijk de Plv-cs.4.0-basisvector (Promega). Voor de FSCN1 interferentie plasmide, werden twee paar sequenties gekoppeld en gesubkloneerd in PLKO.1 volgens het protocol van de fabrikant.

Lentivirale productie en transfectie

HEK293T-cellen werden gezaaid op een 6-well insert op 24 uur voor transfectie. Het miR-145 expressieplasmide, FSCN1 shRNA plasmide of FSCN1 expressieplasmide werd vervolgens gecotransfecteerd met plasmiden verpakking (PHR en pCMV-VSV-G) met de Lipofectamine 2000 transfectiereagens (Invitrogen). Virale supernatanten werden verzameld op 48 uur na transfectie, gecentrifugeerd bij 3000 g gedurende 15 minuten en gefiltreerd door 0,45 urn filters (Millipore). Virale titers werden bepaald door het transduceren van HeLa-cellen in seriële verdunningen en analyse GFP expressie met behulp van flowcytometrie. MGC-803 cellen en 7901 cellen bij 50-70% confluentie geïnfecteerd met virale supernatanten bevattende 10 mg /ml polybreen gedurende 24 uur. Vers medium werd toegevoegd aan de geïnfecteerde cellen, die later werden geselecteerd met puromycine.

Cel migratie en invasie assay

Cells (3x10 ^{5) werden uitgeplaat op 8,0 urn poriegrootte Boyden kamers (Transwell, Corning Life Sciences, Acton, MA, USA) gecoat met 10 ug Matrigel (BD Bioscience, Bedford, MA, USA) per putje (voor invasie assays) of links ongecoat (migratie assays) in serumvrij medium dat 10 g /l runderserumalbumine. Medium dat 10% FBS diende als een chemoattractant in de Tweede Kamer. Niet-binnendringende cellen werden verwijderd met wattenstaafjes na 36 uur (voor de invasie assays) of 20 uur (voor de migratie assays). Binnengedrongen cellen werden gekleurd met hematoxyline (HE) en geteld. De gegevens worden weergegeven als het gemiddelde ± SD van drie afzonderlijke experimenten}

Western blotting

Eiwitten werden met erytrocyten lysisbuffer (ELB;. 50 mM Tris, 140 mM NaCl, 0,5% NP 40 en 100 mM NaF (pH 7,6)) met 1 mM fenylmethaansulfonylfluoride (PMSF, Sigma-Aldrich, USA). Elk monster werd gescheiden op een 10% SDS-PAGE gel en overgebracht op polyvinylideen (PVDF) membranen. De membranen werden geblokkeerd met 5% melk en geïncubeerd met primair konijnen anti-humaan FSCN1 antilichaam (1: 3000, Cell Signaling Technology, USA) of muis-anti-humaan GAPDH (1: 5000, Sigma-Aldrich) antilichaam overnacht bij 4 ° C . De membranen werden vervolgens geïncubeerd met de geschikte mierikswortelperoxidase (HRP) geconjugeerde secundaire antilichamen (Thermo Fisher Scientific). De banden werden ontwikkeld met een verbeterde chemiluminescentie (ECL) systeem (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK). De GAPDH-eiwit werd gebruikt als beladingscontrole.

Statistische analyse

De gegevens zijn uitgedrukt als het gemiddelde ± SD. Statistische significantie werd geanalyseerd met de t-test van Student. De correlatie tussen de miR-145 niveaus en FSCN1 mRNA /eiwit expressie niveaus in maagkanker werd berekend door correlatie Spearman. Alle statistische analyses werden berekend met behulp van GraphPad Prism statistische software (GraphPad Software). P Restaurant < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant (NS, niet significant; * P Restaurant < 0,05; ** P Restaurant < 0,01; *** P
. < 0,001)

Resultaten

Sterke inverse relatie tussen de expressie van miR-145 en haar vermeende doel, FSCN1, in menselijke infiltratieve soort maagkanker

We gebruikten de TargetScan database (http://www.targetscan.org) aan de 3 'UTR's van specifieke doelwit mRNA van miR-145 die de migratie en invasie van maagkanker cellen worden vereenvoudigd. Van alle voorspelde mRNA, selecteerden we FSCN1, die eerder is betrokken bij tumor migratie en invasie. FSCN1 ook zeer geconserveerde sequenties aan de 3 'UTR die complementair zijn aan de miR-145 seed sequentie.

Ten eerste werd onderzocht of de correlatiewaarde van miR-145 en FSCN1 klinisch relevant kunnen zijn door het meten van de expressie van miR-145 en FSCN1 mRNA /eiwit niveaus in normale /tumor gepaarde monsters van 80 patiënten met maagkanker. De statistische analyse toonde een significante omgekeerde correlatie tussen de expressie van miR-145 en de expressie van mRNA FSCN1 /eiwit in de 80 paren klinische monsters (figuur 1A en 1B).

Ming ingedeeld maagcarcinomen in de uitbreiding Type en infiltratieve het type op basis van de groei en invasiviteit patronen, en een correlatie bestaat tussen de indeling Ming's en de klinische prognose [5]. Daarom 40 infiltratieve maag kankermonsters en 40 uitbreiding maagkanker monsters werden gekozen zoals aangegeven door de representatieve HE kleuring (figuur 2A). In deze classificatie, de cellen van een expanderende carcinoom, vanwege hun beperkte indringende kracht, aggregaat en produceren een omschreven massa in de vorm van polypoid en fungating laesies. In tegenstelling tot de cellen van perifeer infiltratieve carcinoom en wijd verspreid en een tumormassa vormt geen. Testten we de expressie van miR-145 en FSCN1 mRNA bij maagkanker opzichte van de aangrenzende normale maagslijmvlies door real-time PCR. miR-145 was opmerkelijk down-gereguleerd in infiltratieve maagkanker in vergelijking met het uitbreiden van maagkanker, terwijl de expressie van FSCN1 mRNA was opvallend up-gereguleerd (figuur 2B). Wij selecteerden 10 infiltrative maag monsters kanker en 10 uitbreiding van maagkanker monsters samen met hun aangrenzende normale weefsels tot expressie te analyseren door qPCR en western blotting. De totale expressie van miR-145 lager, met name in de infiltratieve maagkanker monsters vergeleken met de aangrenzende normale maagslijmvlies. In tegenstelling, de totale mRNA /eiwit niveaus FSCN1 waren hoger in de infiltratieve maagkanker (figuur 2C). Bijgevolg de expressie van miR-145 en de vermeende doel FSCN1 een sterke omgekeerde relatie in menselijke infiltratieve soort maagkanker, waarmee het suggereert dat de essentiële rol van miR-145 en FSCN1 zijn bij maagkanker invasie.

miR -145 rechtstreeks richt FSCN1 bij maagkanker cellen

Om te bepalen of miR-145 regelt de expressie van FSCN1 bij maagkanker cellen, we eerst up-gereguleerd het niveau van miR-145 bij maagkanker MGC-803 cellen met behulp van een lentivirus-gebaseerde vector. We vervolgens uitgevoerd qPCR, waaruit bleek dat miR-145 overexpressie significant neerwaarts gereguleerd het mRNA niveau van FSCN1 (figuur 3A) en western blot experimenten bevestigd dat het eiwitgehalte van FSCN1 ook werd onderdrukt in miR-145-overexpressie cellen (Fig 3B ). Omgekeerd, knock-down van miR-145 levels met behulp van een miR-145 remmer resulteerde in een significant geïnduceerd FSCN1 mRNA /eiwit expressie in zowel SGC-7901 en MGC-803 cellen (figuur 3C). We genereerden een vuurvlieg luciferase reporter vector die het FSCN1 3 'UTR en vervolgens gecotransfecteerd MGC-803 cellen met miR-145 bootst of miR-145 remmer om te onderzoeken of FSCN1 is een direct doelwit van miR-145. De lysaten werden geanalyseerd op luciferase-activiteit 24 uur na transfectie. De luciferase assay bleek dat de miR-145 bootst resulteerde in een ongeveer 55% afname van de activiteit, terwijl de miR-145 remmer van de luciferase-activiteit met 62% in MGC-803 cellen toegenomen in vergelijking met de miR-negatieve controle (Figuur 3D). Bovendien gemuteerde we drie belangrijke vermeende miR-145 herkenningselementen (MREs) in FSCN1 3 'UTR via QuikChange mutagenese voor gebruik in de luciferase assay (Figuur 3D). De resultaten toonden aan dat de regulerende effecten van de miR-145 bootst of miR-145-remmer in de eerste plaats werden afgeschaft, waaruit bleek dat de silencing effect van miR-145 op FSCN1 werden afgeschaft door de verstoring van de miR-MRE interacties (figuur 3D). Gezamenlijk zijn deze studies leverden overtuigend bewijs dat FSCN1 is een direct doelwit van miR-145 bij maagkanker cellen.

Onderdrukking van FSCN1 nodig is voor miR-145 aan de migratie en invasie van maagkanker cellen te remmen

Maagkanker MGC-803 en SGC-7901-cellen werden stabiel getransfecteerd met twee verschillende FSCN1 shRNAs tot FSCN1 remmen beter inzicht in de mogelijke rol van FSCN1 in miR-145 gemedieerde tumor migratie en invasie. De interferentie efficiëntie van FSCN1 shRNAs werd bevestigd door western blot analyse (figuur 4A en 4B). De transwell analyseresultaten toonden aan dat het vermogen van cellen om te migreren en binnendringen sterk werd onderdrukt na neerhalen van de expressie van FSCN1 in MGC-803 en SGC-7901-cellen in vergelijking met de negatieve controle cellen (Figuur 4C en 4D), waarbij een essentiële rol suggereert van FSCN1 in deze processen.

miR-145 is bekend dat de migratie en invasie van vele soorten kanker, met inbegrip van maagkanker [10, 19, 21] te onderdrukken. Zoals verwacht, gedwongen expressie van miR-145 resulteerde in aanzienlijk afgenomen migratie en invasie prijzen voor MGC-803 en SGC-7901-cellen. Bovendien, gelijktijdige re-expressie van FSCN1 gecompromitteerd de miR-145-onderdrukt cel migratie en invasie vermogen bijna volledig in beide miR-145-getransfecteerde MGC-803 en SGC-7901-cellen (Fig 5A en 5B). Omgekeerd, gebruikten we FSCN1 shRNA om FSCN1 expressie te remmen in miR-145-remmer getransfecteerde MGC-803 en SGC-7901-cellen. Knockdown van FSCN1 volledig omgekeerd de miR-145-remmer gemedieerde activering van de cel migratie en invasie, zo suggereert de essentiële rol van FSCN1 in dit proces (figuur 5C en 5D). Gezamenlijk de bovenstaande resultaten blijkt dat de onderdrukking van FSCN1 noodzakelijk voor miR-145 op de migratie en invasie van maagkanker inhiberen.

Discussie

De deregulering van miRs is geïmpliceerd in diverse menselijke kankers, waaronder humane maagkanker. De moleculaire mechanismen die miRs moduleren het proces van carcinogenese en het gedrag van kankercellen niet volledig gedefinieerd. MiR differentiële expressie in tumoren in vergelijking met de aangrenzende normale weefsels of tussen groepen tumormonsters met een gunstig of slechte klinische uitkomst is gebruikt om miR handtekeningen potentiële prognostische en /of prognostische waarde heeft bij bepaalde kankersoorten genereren. Toch is de betrokkenheid van de afwijkende uitgedrukt miRs in menselijke maagkanker blijft grotendeels onontgonnen. Eerdere studies hebben gemeld dat miR-145 wordt neerwaarts gereguleerd in verschillende menselijke tumoren, waaronder borstkanker, longkanker en maagkanker [9, 22, 23]. Lu et al [24] bleek dat miR-145 functioneert als een tumor suppressor en richt zich op twee oncogenen, namelijk ANGPT2 en NEDD9, bij niercelcarcinoom. Een andere studie heeft aangetoond dat miR-145 onderdrukt celmigratie en invasie door remming van N-cadherine eiwittranslatie bij maagkanker cellen [10]. Echter, Kamikihara et al [11] blijkt dat slechts 21% maagkanker patiënten hebben N-cadherine-positieve expressie zoals geanalyseerd door immunohistochemie. Daarom is een alternatieve moleculaire mechanisme dat miR-145 betrokken zijn bij de regulatie van celmigratie en invasie van maagkanker.

In deze studie, bevestigden we miR-145 wordt neerwaarts gereguleerd bij maagkanker weefsels vergeleken de aangrenzende normale maagslijmvlies, die in overeenstemming met eerdere bevindingen [9]. In een poging om nieuwe benedenstroomse targets van miR-145 te identificeren, gebruikten we de TargetScan database screening experimenten. Van meerdere kandidaten, selecteerden we FSCN1 voor verdere experimenten omdat FSCN1 is gevonden om een ​​belangrijke rol te spelen in de tumor migratie en invasie. Verschillende lijnen van bewijs suggereren dat FSCN1 is de directe downstream doelwit van miR-145. Ten eerste bevat FSCN1 zeer geconserveerde sequenties aan de 3 'UTR die complementair zijn aan de miR-145 seed sequentie. Ten tweede, een omgekeerde correlatie tussen miR-145 en FSCN1 werd in de gepaarde monsters van patiënten met maagkanker. Tot slot, bij de indeling van de klinische monsters in de uitbreiding type en infiltrative soort gebaseerd op rangschikking van Ming's, vonden we dat miR-145 is opmerkelijk down-gereguleerd in infiltratieve maagkanker in vergelijking met het uitbreiden van maagkanker. Ondertussen werd een sterkere omgekeerde correlatie ook gedetecteerd tussen miR-145 en FSCN1 expressie niveaus in infiltratieve maagkanker. De huidige studie een nieuw licht werpen op de correlatie tussen miR-145 en FSCN1 in infiltratieve maagkanker. In een eerdere studie, Lauren verdeeld maagkanker in de volgende twee soorten: intestinale type en diffuse Type [25]. Intestinale kankersoort is beschreven als een glandular tumor lijkt coloncarcinoom en diffuse soort kanker bestaat uit solitair of kleine clusters van cellen zonder de vorming van klieren. De typen tumor in de indeling Lauren's en Ming's nauw met elkaar overeenkomen. De meeste groeiende tumoren hebben eigenschappen van intestinale-type kanker en de meeste infiltratieve tumoren diffuse soort kanker [5]. Echter, een aanzienlijk aantal maagcarcinomen niet worden ingedeeld in intestinale type of diffuse type en ongedifferentieerde kankers die niet diffuus kan infiltreren en glandular kanker die diffuus infiltreren. Daarnaast is de detectie van vroege maagkanker behulp classificatie Lauren is relatief moeilijk omdat het beginstadium van diffuse kankersoort, per definitie, niet diffunderen. Echter, Ming's indeling van deze problemen op te lossen [5]. In de indeling Ming's, de patronen van cel distributie duidelijk aan een fundamenteel verschil in hun groeipotentieel evenals de macht van de penetratie en de invasie. Zoals infiltratieve maagkanker is meer invasief dan het uitbreiden van maagkanker, deze resultaten suggereren dat miR-145 en FSCN1 beide spelen een cruciale rol bij maagkanker invasie.

Hoewel verschillende rapporten van de regulering van FSCN1 hebben geïmpliceerd door miRs in vele carcinomen [19, 20, 26], om het beste van onze kennis, geen rapport heeft gesuggereerd dat FSCN1 is een direct doelwit van miR-145 bij maagkanker. In deze studie hebben we bevestigd dat miR-145 onderdrukt FSCN1 expressie en is rechtstreeks gericht op de 3 'UTR van FSCN1 bij maagkanker cellen. Bovendien, de gelijktijdige re-expressie van FSCN1 gecompromitteerd de miR-145-onderdrukt celmigratie en invasie vermogen bijna volledig in miR-145-getransfecteerde MGC-803 en SGC-7901 cellen, wat aangaf dat de onderdrukking van FSCN1 noodzakelijk is voor miR -145 de migratie en invasie van maagkanker cellen te remmen. Daarom FSCN1 is een belangrijke downstream doelwit van miR-145 in het reguleren van maagkanker invasie.

Kortom, de huidige studie vastgesteld dat miR-145 is voornamelijk down-gereguleerd in infiltratieve maagkanker en dat miR-145 expressie en FSCN1 expressie hebben een sterke inverse correlatie in infiltratieve maagkanker. Functioneel, hebben we aangetoond dat miR-145 onderdrukt cel migratie en invasie bij maagkanker in de eerste plaats door direct targeting FSCN1. Vandaar dat het herstel van de expressie van miR-145 kan worden verkend als een alternatieve therapeutische strategie tegen maagkanker.

• PLoS ONE: Atomic Inzicht in de Altered O6-methylguanine-DNA-methyltransferase Protein Architectuur bij maagkanker
• PLoS ONE: gezondheid gedrag van de Koreaanse maagkanker Overlevenden met hypertensie: een neiging analyse van KNHANES III-V (2005-2012)