PLOS NËMMEN: Réckproduktioun Korrelatioun tëscht MicroRNA-145 an FSCN1 Auswierkungen Gastric Cancer Migratioun an Invasion

Wat VerfÜgung

MicroRNAs (miRs) Leeschtung wichteg Roll an der Gentherapie Ausdrock Entwécklung während dem Oflaf vun tumorigenesis an entholl modulating. Virdrun Studien hun fonnt dass Mir-145-reegelen Ugrëff ass an de Mo Patient an ass ze entholl Wanderung an Invasioun dinn. Allerdéngs, souwuel de molekulare rechtlechen a Funktioun vum Mir-145 zu gastric Kriibs bleiwen onkloer. Déi heiteg Etude ass déi éischt Demo vun de groussen Ugrëff-Regulatioun vum Mir-145 Ausdrock vun infiltrative gastric Kriibs Verglach zu gastric Kriibs ausgebrannt. Zousätzlech Analysë Korrelatioun staark ëmgedréit, et gesäit kennenzeléieren tëscht Mir-145 an FSCN1 Ausdrock Niveauen am infiltrative gastric Kriibs verroden. Doriwwer eraus, hien huet mir dat Mir-145 FSCN1 direkt Ziler an Hien Zell Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs. Sax verwandelt Nerve den Ausdrock vun FSCN1 fir d'Ennerdréckung vun Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs Zellen, an du-ausdrécken FSCN1 zu Mir-145-overexpressing Zellen réckgängeg hirer Wanderung an Invasioun Mängel. Sou, deen mir dat Mir-145 Zell Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs reguléieren allem duerch direkt FSCN1 gezielt VerfÜgung

Fro:. Chen JJ, Cai em, Liu Xw, Luo QC, Chen G, Huang Wf, et al . (2015) Réckproduktioun Korrelatioun tëscht MicroRNA-145 an FSCN1 Auswierkungen Gastric Cancer Migratioun a Missiounen. PLoS NËMMEN 10 (5): e0126890. Doi: 10.1371 /journal.pone.0126890 VerfÜgung

Akademesch Redakter: Chengfeng Yang, Michigan State University, USA VerfÜgung

Arnaque: 14. Januar 2015; Akzeptéiert: Abrëll 8, 2015; Publizéiert: Mee 26, 2015 VerfÜgung

Copyright: © 2015 Chen et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung

Data Disponibilitéit: All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung

Funding:. 1. National Natural Science Foundation of China (Grant Nr 81172283) JCC (http://www.nsfc.gov.cn/). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren. 2. Natural Science Foundation vun Fujian Province (Grant Nr 2012D037) JCC (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs huet ee vun den héchste Doud Tariffer fir malignant erhéijen weltwäit [1]. Verbessert medezinesch Technik kann d'Resultat vun gastric Kriibs verbesseren. Allerdéngs bleift gastric Kriibs d'zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll [2], déi vun entholl Invasioun an Metastasen ëmmer ass. Zesumme, Iwwerfall a Metastasen engem Prozess Form an deem malignant entholl Zellen aus enger Primärschoul Site zu anere Beräicher Transfert an duerno duerch de lymphatic Kanal, Blutt kritt oder Kierper Discours [3] erhéijen op enger wäiter Site Form. Dofir, Équipe der molekulare Mechanismen klären an d'Entwécklung an invasiveness vun gastric Kriibs ass néideg. VerfÜgung

1977, Ming séiert gastric carcinomas an den Ausbau an infiltrative Zorte baséiert op hire Wuesstem an invasiveness Musteren [4]. Dës Zorte sinn erhale erkennbar histologically. Ausbau carcinomas wuessen en masse a vum Ausbau vun der Opstellung vun diskret entholl noverfollegt doraus hierkommen infiltrative carcinomas entholl Zellen hunn, dass individuell violéieren [5]. Vun den zwou Zorte vu gastric Kriibs, ass infiltrative gastric Kriibs méi invasiv wéi gastric Kriibs ausgebrannt. Esou enger Klassifikatioun also stellt eng Referenz Echantillon gastric Kriibs ze z'ënnerscheeden klinesch an erliichtert detailléiert Studien iwwert d'molekulare Mechanisme vun gastric Kriibs. VerfÜgung

MicroRNAs (miRs) Leeschtung kritescher Rollen an vill biologesch Prozesser, dorënner Kriibs Prozesser, déi direkt inhibiting den Ausdrock vun der Zil- mRNAs duerch verschidde molekulare Mechanismen [6, 7]. Ausserdeem, hi miRs aberrant Regulatioun während carcinogenesis a kann als entweder oncogenes oder entholl suppressors Akt [7]. Rezent Studien hun gewisen, dass vill miRs Prolifératioun an Invasioun an gastric Kriibs betreffen. Mir-21 ass bis-reglementéiert gastric Kriibs an ënnerstëtzt entholl Prolifératioun an Invasioun an gastric Kriibs vun PTEN gezielt [8]. Am Géigesaz, ass Mir-145 verwandelt-reglementéiert Mënsch gastric Kriibs [9]. Desweideren, Fuerschung huet gewisen, datt Mir-145 Zell Migratioun oofgesinn kann an Invasioun vun inhibiting N-cadherin FAQ Iwwersetzung an gastric Kriibs Zellen [10]. Allerdéngs fonnt Kamikihara et al [11] den Ausdrock Niveau vun N-cadherin zu 146 Patienten mat gastric Kriibs vun immunohistochemistry, an d'Resultater weisen, datt nëmmen 31 Patienten (21%) an N-cadherin-positiven Ausdrock. Dofir, vläicht e puer aner molekulare Mechanisme vum Mir-145 Zell Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs regléieren. VerfÜgung

FSCN1 ass en 55-kDa actin-verbindlech FAQ datt mat filopodia an actin-baséiert Buerg Opstellung verbonnen ass, an et ënnerstëtzt Zell motility, Migratioun an Invasioun [12, 13]. FSCN1 Ausdrock ass feelen oder niddreg zu normal epithelia, mä FSCN1 ass op ville carcinomas overexpressed, dorënner colorectal adenomas, epithelial spillt Kriibs an esophageal squamous Zell carcinoma [14-16]. Ausserdem, hun eng Serie vun Etuden uginn dass FSCN1 Ausdrock erhéigt d'Verbreedung an Invasioun vun spillt an gastric Kriibs Zellen [17, 18]. VerfÜgung

rezent Studien duerchgefouert hunn, datt Mir-145 Funktiounen als entholl suppressor fonnt dass Mir-145 overexpression Hien Wanderung an Invasioun an Aarbecht Kriibs a BBC Kriibs duerch gezielt FSCN1 [19, 20]. Zousätzlech, Hien Mir-145 gastric Kriibs Zell Wanderung an Invasioun vun N-cadherin gezielt. Allerdéngs ass de positiven Ausdrock Taux vun N-cadherin zu gastric Kriibs Stoffer nëmmen 21% [10, 11]. Dofir, de Schlëssel Zil- Bestëmmung Gentherapie vum Mir-145 gastric Kriibs Invasioun an Regulatioun ass néideg. VerfÜgung

Am Moment studéieren, mir hunn éischt dass Mir-145 Ausdrock war bemierkenswäert verwandelt-reglementéiert infiltrative gastric Kriibs am Verglach zu där zu gastric Kriibs ausgebrannt. Ausserdem gëtt et Beweiser, datt Mir-145 Zell Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs Trupen allem duerch direkt FSCN1 gezielt, deen d'Roll vum Mir-145 an FSCN1 zu der Regelung vun gastric Kriibs malignant phenotypes beliicht. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Séminairen Echantillon VerfÜgung

All Medeziner Echantillon waren mat der Awëllegung vun Patienten gesammelt déi gastrectomy um Zhongshan Hospital vun Xiamen University zu Xiamen (Fujian Province, China) vu Juni 2012 bis Oktober 2013 mécht am Ganzen., dorënner der 160 Puer gesammelt Medeziner Echantillon 80. Klass gastric Kriibs Echantillonen, 40 infiltrative gastric Kriibs Echantillonen an 40 gastric Kriibs Echantillon ausgebrannt. D'entholl agebousst Typ gouf duerch wirklech Ënnersichung bestätegt, an de reagéiert normal gastric mucosae sech aus méi wéi 5 cm ewech vum erhéijen gesammelt. VerfÜgung

IFLA- Ausso VerfÜgung

D'Etude Ëmwelt- sech am Aklang mat der ethesch Normen vun der Deklaratioun vun Helsinki (1975) an huet sech duerch d'medezinesch Ethik Comité (Nr 20081012) vun Zhongshan Hospital vun Xiamen University zu Xiamen (Fujian Province, China) abruecht. Mir kritt an dëser Etude Équipe Zoustëmmung Aussoen aus all Participanten geschriwwen. VerfÜgung

Zell Linnen VerfÜgung

D'MGC-803 an SGC-7901 Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen vum Institut vun Zell Biologie kaaft huet (Shanghai , China, http://www.cellbank.org.cn). D'293T mënschlech embryonal Nier Zell Linn war vun der American Type Kultur Collection (ATCC, MD, USA) kritt. MGC-803 an SGC-7901 Zellen sech am RPMI-1640 mëttelfristeg haten, iwwerdeems 293T Zellen zu DMEM haten goufen. All Medien aus 10% An et Bovine serum (FBS), 100 U /ml penicillin an 100 μg /ml streptomycin (Invitrogen, Karlsbad CA, USA). VerfÜgung

Luciferase reporter assay VerfÜgung

BTS sech transfected mat luciferase reporter Genen, β-galactosidase (β-Meedchen) an Mir-145 mimics oder Mir-145 inhibitor (lousoihong RiboBio) benotzt Lipofectamine 2000 transfection reagent (Invitrogen). Luciferase Aktivitéit war um 48 h der transfection gemooss, an der transfection Effizienz war normalized fir intern β-Meedchen Aktivitéit. VerfÜgung

RNS erauszéien an RT-qPCR VerfÜgung

Total RNS ofgebaut gouf benotzt TRIzol reagent (Invitrogen ) an ëmgedréint-ausserdeem mat M-MuLV transcriptase ëmgedréint (QIAGEN) cDNA laut den Hiersteller d'Protokoll ze produzéieren. Real-Zäit Hinnen alleguer war mat SYBR Green-baséiert erkennen an engem Rotor-Gene 6000 Instrument (Corbett Life Science) standing laut den Hiersteller d'Uweisungen an mat der primer Puer opgezielt an Table 1. Mir-145 an U6 primers sech aus QIAGEN kritt. GAPDH oder U6 endogenous Kontroll war wéi eng intern Norm ginn, an d'Resultater sech mat der △△ CT berechent Method (wou CT der loung Zyklus ass). VerfÜgung

Plasmid Konstruktioun VerfÜgung

D'benotzt primers fir de Bau vun der luciferase gemellt a plasmids sinn an Table 1. de Mënsch FSCN1 3 'untranslated Regioun (UTR) war Implikatioune vun MGC-803 cDNA vun Hinnen alleguer amplification mat der LA Taq DNA Polymerase (TaKaRa) an gekloonten afgerappt vun der luciferase coding opgezielt Haaptrei am pMIR-Pressematdeelung (Ambion) Vecteure um SacI an MluI Restriktioun Siten (Promega) de Mënsch FSCN1-3'UTR-luciferase reporter ze bauen. Kennen sech an de Mir-verbindlech Siten agefouert engem QuikChange Mutagenesis Kit (TransGen) benotzt. Fir de Bord-145 an FSCN1 Ausdrock plasmids, huet e Message vun Hinnen alleguer Kick an gekloonten an der Viuuulenza /NheI Siten an XbaI /NdeI Siten, respektiv, vun der Plv-cs.4.0-Basis Vecteure (Promega). Fir d'FSCN1 Amëschen plasmid, waren zwee Puer Message genannt an subcloned an PLKO.1 no de Protokoll d'Hiersteller. VerfÜgung

Lentiviral Produktioun an transfection VerfÜgung

HEK293T Zellen op enger 6-gutt Neiegkeet géint sech um 24 h virun transfection. De Mir-145 Ausdrock plasmid, FSCN1 shRNA plasmid oder FSCN1 Ausdrock plasmid war dann mat Verpackungen plasmids (pHR an pCMV-VSV-G) mat der Lipofectamine 2000 transfection reagent (Invitrogen) Co-transfected. Haren supernatants waren um 48 h der transfection gesammelt, an 3000 g fir 15 min centrifuged, an Filter duerch 0,45 μm Filter (Millipore). Haren titers sech duerch transducing Hela Zellen bei Serien dilutions alles an GFP Ausdrock analyséiert cytometry benotzt stréimen. MGC-803 Zellen oder 7901 Zellen bei 50-70% confluency sech mat Haren supernatants Krankheet mat 10 mg /ml Polybrene fir 24 h. Frësch mëttelfristeg war dann notéiert zu der Krankheet Zellen, déi spéider mat puromycin ausgewielt goufen. VerfÜgung

Zell Wanderung an Invasioun assay VerfÜgung

BTS (3x10 5) huet sech op 8.0 μm pore Gréisst Boyden plated CHAMBERS (Transwell, Corning Life Sciences, Acton, MA, USA) entweder bedeckt mat 10 μg vun Matrigel (BD Bioscience, Bedford, MA, USA) pro gutt (fir Invasioun assays) oder uncoated lénks (fir Migratioun assays) zu serum-gratis mëttel- 10 g /L Bovine serum albumin mat. Mëttel- wouvun 10% FBS als chemoattractant am ënneschten Chambre zerwéiert. Non-hypothetesch Zellen sech mat Kotteng Spuren no 36 h geläscht (fir Invasioun assays) oder 20 h (fir Migratioun assays). Iwwerfale Zellen sech mat hematoxylin (HIEN) a gezielt Kierchefënster. D'Donnéeë sinn als mengen ± Fils vum dräi eenzel Experimenter virgestallt VerfÜgung

Western blotting VerfÜgung

Proteinen sech mat erythrocyte lysis gefiermt Quecksëlwer (ELB;. 50 mm Tris, 140 mm NaCl, 0,5% NP- 40 an 100 mm NaF (pH 7.6)) mat 1 mm phenylmethanesulfonyl fluoride (PMSF; Fläch-Aldrich, USA). All Prouf war op engem 10% SDS-PAGE gelies getrennt an duerno op polyvinylidene difluoride (PVDF) Schläimhait transferéiert. D'Schläimhait sech mat 5% Mëllech blockéiert a mat der Primärschoul Kanéngchen anti-Mënsch FSCN1 antibody incubated (1: 3000; Zell sécher Technology, USA) oder Maus anti-Mënsch GAPDH (1: 5000; Fläch-Aldrich) antibody Nuecht op 4 ° C . D'Schläimhait sech da mat de passenden horseradish peroxidase (HRP) incubated -conjugated Secondaire antibodies (Thermo Fisher Wëssenschaftlech). D'Bande huet mat enger verstäerkter chemiluminescence (ECL) System (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK) entwéckelt. D'GAPDH FAQ war als Luede Kontroll benotzt. VerfÜgung

statistique Analyse VerfÜgung

D'Donnéeë sinn als mengen ± Fils ausgedréckt. Statistique Bedeitung war mat Student d'T-Test analyséiert. D'Korrelatioun tëscht Mir-145 Niveauen a FSCN1 mRNA /FAQ Ausdrock Niveauen am mënschleche gastric Cancers war vun Spearman d'Korrelatioun berechent. All Statistik analyséiert goufen berechent GraphPad Prism Statistiken Software (GraphPad Software) benotzt. P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 war statistesch relevant considéréiert (NS, bedeitendst net; * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05; ** P VerfÜgung &Si besteet; 0,01; *** P VerfÜgung &Si besteet;. 0.001) VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Strong ëmgedréit, et gesäit Relatioun tëscht den Ausdrock vun Mir-145 a sengem putative Zil, FSCN1, gastric Kriibs am mënschleche infiltrative Typ VerfÜgung

Mir ginn de TargetScan Datebank (http://www.targetscan.org) den 3 'UTRs vun spezifeschen Zil mRNAs vum Mir-145 ze identifizéieren, datt d'Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen regléieren kann. Vun all virausgesot mRNAs, ausgewielt mir FSCN1, déi zu entholl Wanderung an Invasioun virdrun agebonne gouf. FSCN1 huet och héich Message bei der 3 'UTR conserved datt de Bord-145 Som Haaptrei ergänzen. VerfÜgung

Éischt, mir propagéieren ob der Korrelatioun vun Mir-145 an FSCN1 konnt duerch Miessunge vum Ausdrock klinesch relevant sinn vun Mir-145 an FSCN1 mRNA /FAQ Niveauen an normal /entholl vläit Echantillon vun 80 Patiente mat gastric Kriibs. Statistesch Analyse réischt e wesentleche ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëscht dem Wëllen vum Mir-145 an den Ausdrock vun FSCN1 mRNA /FAQ am 80 Puer Medeziner Echantillon (Lalumi 1A an 1B). VerfÜgung

Ming séiert gastric carcinomas an Ausbau Typ an infiltrative Typ baséiert op Wuesstem a invasiveness Musteren, an eng Korrelatioun tëscht Ming d'Klassifikatioun an d'Medeziner hätt [5]. Dofir, 40 infiltrative gastric Kriibs Echantillonen an 40 Ausbau Echantillon gastric Kriibs sech duerch d'Vertrieder wéi uginn gewielt HIEN staining (Lalumi 2A). An dëser Klassifikatioun, d'Zellen vun en Ausbau carcinoma, déi opgrond vun hirer limitéiert andeems Muecht, ugesammelt an enger gét Mass a Form vun polypoid an fungating lesions produzéieren. Am Géigesaz, verbreet d'Zellen vun infiltrative carcinoma peripherally an dicht, an engem entholl Mass Form net. Mir getest den Ausdrock vun Mir-145 an FSCN1 mRNA zu gastric Kriibs am Verglach zu der bascht normal gastric mucosa vun real-Zäit Hinnen alleguer. Mir-145 war bemierkenswäert verwandelt-reglementéiert infiltrative gastric Kriibs Verglach zu gastric Kriibs ausbreet, iwwerdeems den Ausdrock vun FSCN1 mRNA bemierkenswäert war bis-reegelen (Lalumi 2B). Mir ausgewielt 10 infiltrative gastric Kriibs Echantillonen an 10 gastric Kriibs Echantillon Ausbau zesumme mat hire bascht normal Stoffer Ausdrock vun qPCR a westlech blotting ze analyséieren. Déi gesamt Ausdrock Niveau vun Mir-145 huet méi niddreg, besonnesch am infiltrative gastric Kriibs Echantillon am Verglach zu der bascht normal gastric mucosa. Am Géigesaz, huet de globale mRNA /FAQ Niveau vun FSCN1 héich am infiltrative gastric Kriibs (Lalumi 2C). Suite no dem Wëllen vun Mir-145 a sengem putative Zil- FSCN1 eng staark ëmgedréit, et gesäit Relatioun zu Mënsch infiltrative Typ gastric Kriibs, doduerch suggeréiert datt de wesentleche Rollen vun Mir-145 an FSCN1 zu gastric Kriibs Invasioun sinn. VerfÜgung

Mir -145 Ziler direkt FSCN1 zu gastric Kriibs Zellen VerfÜgung

fir erauszefannen, ob mir-145 der Ausdrock vun FSCN1 zu gastric Kriibs Zellen reguléieren, mir éischt de Niveau vum mir-145 zu gastric Kriibs MGC-803 Zellen up-reglementéiert mat engem lentivirus-baséiert Vecteure. Mir standing dann qPCR, déi Teamchef Mir-145 overexpression bedeitend-verwandelt reegelen der mRNA Niveau vun FSCN1 (Lalumi 3A), a westlech blot Experimenter bestätegt, datt d'FAQ Niveau vun FSCN1 och zu Mir-145-overexpressing Zellen (Lalumi 3B opgeléist gouf ). Ëmgedréit, knockdown vum Mir-145 Niveauen engem Mir-145 inhibitor mat schéinen vill FSCN1 mRNA /FAQ Ausdrock vun zwou SGC-7901 an MGC-803 Zellen (Lalumi 3C) entschlof. Mir entsteet eng Liichtkäfer luciferase reporter Vecteure der FSCN1 3 'UTR mat an dann Co-transfected MGC-803 Zellen mat Mir-145 mimics oder engem Mir-145 inhibitor ze ermëttelen wann FSCN1 engem direkten Zil vum Mir-145 ass. D'lysates sech fir luciferase Aktivitéit 24 h Post-transfection analyséiert. D'luciferase assay gewisen, datt de Bord-145 mimics an en ongeféieren 55% Ofsenkung Aktivitéit virgedroen, Coursë vum Mir-145 inhibitor der luciferase Aktivitéit vun 62% vun MGC-803 Zellen am Verglach mat der Mir-negativ Kontroll (Lalumi 3D) fräi. Desweideren, mutated mir dräi grouss putative Mir-145 Unerkennung Elementer (MREs) an der FSCN1 3 'UTR via QuikChange mutagenesis fir Benotzung vun der luciferase assay (Lalumi 3D). D'Resultater weisen, datt de reglementaresche Effekter vun der Raumstatioun-145 mimics oder Mir-145 inhibitor sech haaptsächlech abrogated, dee confirméiert datt den silencing Auswierkunge vum Mir-145 op FSCN1 vun de Stéierungen vun der Raumstatioun-MRE Interaktioune (Lalumi 3D) ofgeschaf goufen. Zesummen, gëtt dës Studien zwéngen Beweiser datt FSCN1 engem direkten Zil vum Mir-145 zu gastric Kriibs Zellen ass. VerfÜgung

Repressioun vun FSCN1 fir néideg ass Mir-145 der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen ze inhibit VerfÜgung

Gastric Kriibs MGC-803 an SGC-7901 Zellen sech stably mat zwou verschiddene FSCN1 shRNAs transfected FSCN1 zu inhibit fir besser ze verstoen d'Potential Roll vun FSCN1 zu Mir-145-mediated entholl Wanderung an Invasioun. D'Amëschen Effizienz vun FSCN1 shRNAs war déi westlech blot Analyse (Lalumi 4A an 4B) confirméiert. D'transwell assay Resultater gewisen, datt d'Kapazitéit vun Zellen héich der Sax verwandelt Trupen zu opgeholl a violéieren war dem Wëllen vun FSCN1 zu MGC-803 an SGC-7901 Zellen am Verglach zu negativ Kontroll Zellen (Lalumi 4C an 4D), domat eng wesentlech Roll suggeréiert vun FSCN1 an dës Prozesser. VerfÜgung

Mir-145 ass bekannt der Migratioun an Invasioun vu ville Kriibs Zorten, dorënner gastric Kriibs [10, 19, 21] zu oofgesinn. Wéi erwaart, kréie Ausdrock vu Mir-145 schéinen Wanderung an Invasioun Tariffer vun MGC-803 an SGC-7901 Zellen vill rofgaang ass. Ausserdeem, kompromettéiert gläichzäiteg du-Ausdrock vun FSCN1 der Mir-145-supressed Zell Wanderung an Invasioun Fähegkeet bal komplett an zwee Mir-145-transfected MGC-803 an SGC-7901 Zellen (Lalumi 5A an 5B). Ëmgedréit, déi mir FSCN1 shRNA FSCN1 Ausdrock an Mir-145 inhibitor-transfected MGC-803 an SGC-7901 Zellen ze inhibit. Knockdown vun FSCN1 réckgängeg misst de Bord-145 inhibitor-mediated Aktivatioun vun Zell Wanderung an Invasioun, also déi wesentlech Roll vun FSCN1 an dësem Prozess (Lalumi 5C an 5D) suggeréiert. Zesummen, hien huet de genannte Resultat datt d'Repressioun vun FSCN1 fir néideg ass Mir-145 der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen ze inhibit. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

D'Dereguléierung vum miRs huet an verschiddenen agebonne ginn Mënsch Cancers, dorënner Mënsch gastric Kriibs. Allerdéngs hunn de molekulare Mechanismen déi miRs de Prozess vun carcinogenesis an d'Behuele vun Kriibs Zellen well net komplett definéiert goufen. Ënnerscheed Mir Ausdrock vun erhéijen Verglach mat hirem bascht normal Stoffer oder tëschent Gruppe vun entholl Echantillon mat engem gutt oder schlecht Medeziner Resultat huet benotzt gouf Mir Ënnerschrëfte mat Potential prognostic an /oder predictive Wäert zu bestëmmte Kriibs Zorte ze generéieren. Trotzdem, bleift d'Bedeelegung vun der aberrantly ausgedréckt miRs zu Mënsch gastric Kriibs schiddene onerfuerschten. Virdrun Studien hu bericht, dass Mir-145-reegelen verwandelt ass zu verschiddenen Mënsch malignancies, dorënner Broscht Kriibs, haett Kriibs an gastric Kriibs [9, 22, 23]. Lu et al [24] fonnt dass Mir-145 Funktiounen als entholl suppressor an Ziler zwee oncogenes, nämlech ANGPT2 an NEDD9, an keen Auto Zell carcinoma. Aner Etude huet gewisen, datt Mir-145 Zell Wanderung an Invasioun Hien vun N-cadherin FAQ Iwwersetzung an gastric Kriibs Zellen inhibiting [10]. Allerdéngs fonnt Kamikihara et al [11], datt nëmmen 21% gastric Kriibs Patienten hunn N-cadherin-positiven Ausdrock wéi vun immunohistochemistry analyséiert. Dofir, eng Alternativ molekulare Mechanismus Mir-145 Basisdaten zu der Regelung vun der Zell Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs betraff ass. VerfÜgung

Am Moment studéieren, confirméiert mir dat Mir-145 ass erof-reglementéiert gastric Kriibs Stoffer Verglach fir d'bascht normal gastric mucosa, déi mat virdrun Conclusiounen [9] konsequent ass. Opgeraf Roman afgerappt Ziler vum Mir-145 ze identifizéieren, déi mir de TargetScan Datebank Duerchmusterung Experimenter ze maachen. Vun e puer Kandidaten, ausgewielt mir FSCN1 fir weider Experiment well FSCN1 fonnt gouf wichteg Roll an entholl Wanderung an Invasioun ze spillen. Puer Zeilen Beweiser hindeit, datt FSCN1 der direkt matgeholl Zil vum Mir-145 ass. Eischtens, enthält FSCN1 héich Message um UTR "3 conserved datt de Bord-145 Som Haaptrei ergänzen. Zweetens, huet en ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëscht Mir-145 an FSCN1 an der vläit Echantillon vun gastric Kriibs Patienten fonnt. Schlussendlech, wann d'Medeziner Echantillonen an Typ an infiltrative Typ op Ming d'Klassifikatioun baséiert Ausbau classifying, hunn mer dat Mir-145 ass bemierkenswäert verwandelt-reglementéiert infiltrative gastric Kriibs Verglach zu gastric Kriibs ausgebrannt. Mëttlerweil, war e staark ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun och tëscht Mir-145 an FSCN1 Ausdrock Niveauen am infiltrative gastric Kriibs festgestallt. Déi heiteg Etude datts neie Liicht op d'Korrelatioun tëscht Mir-145 an FSCN1 zu infiltrative gastric Kriibs. An enger viregter studéieren, ënnerdeelt Lauren gastric Cancers an de folgenden zwou Zorten: intestinal Typ an diffusen Zort [25]. Intestinal Zort Kriibs ass als glandular entholl Mooss colonic carcinoma beschriwwen, an diffusen Zort Kriibs ass vun eenzel oder kleng Stärekéip vun Zellen ouni d'Équipe vun Glands komponéiert. D'entholl Zorte vun Lauren d'Ming d'Klassifikatioun sëlwecht enk mateneen. Déi meescht Ausbau erhéijen hunn Charakteristike vun intestinal-Typ Kriibs, an déi meescht infiltrative erhéijen sinn diffusen Typ Cancers [5]. Allerdéngs kann eng bedeitend Unzuel vun gastric carcinomas net an intestinal Typ oder diffusen Typ klassifizéiert ginn, dorënner Strenz Cancers datt infiltrate net diffusely an glandular Cancers datt diffusely infiltrate. Zousätzlech, Klassifikatioun der Detektioun vun fréi gastric Kriibs benotzt Lauren d'ass relativ schwéier, well de fréie Phase vun diffusen Zort Kriibs, vun Definitioun, diffusen ass net. Allerdéngs, Klassifikatioun d'Ming kann dës Problemer léisen [5]. An Ming d'Klassifikatioun, gitt weg d'Musteren vun Zell Verdeelung kloer eng fundamental Differenz vun hire Wuesstem Potential souwéi Muecht vun Pénétratioun an Invasioun. Als infiltrative gastric Kriibs méi invasiv wéi Ausbau gastric Kriibs ass, proposéiere dës Resultater dass Mir-145 an FSCN1 zwee wichteg Roll an gastric Kriibs Invasioun Leeschtung. VerfÜgung

Obwuel verschidde Rapporten hunn d'Regulatioun vun FSCN1 vun miRs zu vill carcinomas agebonne [19, 20, 26], fir déi bescht vun eisem Wëssen, huet kee Rapport ugeholl, datt FSCN1 engem direkten Zil vum mir-145 zu gastric Kriibs ass. An dëser Etude, confirméiert mir dat Mir-145 FSCN1 Ausdrock an direkt Ziler der 3 'UTR vun FSCN1 zu gastric Kriibs Zellen represses. Zousätzlech, kompromettéiert gläichzäiteg du-Ausdrock vun FSCN1 der Mir-145-supressed Zell Wanderung an Invasioun Fähegkeet bal komplett zu Mir-145-transfected MGC-803 an SGC-7901 Zellen, déi uginn, datt d'Repressioun vun FSCN1 fir Mir néideg ass -145 der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen ze inhibit. Dofir, ass FSCN1 eng wichteg afgerappt Zil vum Mir-145 gastric Kriibs Invasioun an dreiwen. VerfÜgung

Am Resumé, déi heiteg Etude identifizéiert dass Mir-145 allem zu infiltrative gastric Kriibs verwandelt-reglementéiert ass an datt Mir-145 Ausdrock an FSCN1 Ausdrock hunn eng staark ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun zu infiltrative gastric Kriibs. System, hien huet mir dat Mir-145 Zell Wanderung an Invasioun an gastric Kriibs Hien ass virun allem duerch direkt FSCN1 gezielt. Dofir, Staatsfinanzen den Ausdrock vun Mir-145 kann als eng Alternativ therapeutesch Strategie géint gastric Kriibs ginn lant. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: Atomenergie Abléck an der verännerter O6-Methylguanine-DNA Methyltransferase Protein Architecture zu Gastric Cancer
• PLOS NËMMEN: Gesondheet Verhaalen vun Koreanesch Gastric Cancer Iwwerliewenden mat finanzéieren: Eng Propensity Analys vun KNHANES III-V (2005-2012)