PLoS ONE: Klinische und prognostische Association of Transcription Factor SOX4 in Gastric Cancer

Abstrakt

Magenkrebs (GC) ist eine der häufigsten bösartigen Krebserkrankungen weltweit. Es ist jedoch wenig über die molekularen Verfahren bekannt, durch die diese Krankheit entwickelt und fortschreitet. Diese Studie untersuchte Korrelationen zwischen der Expression von nuklearen Transkriptionsfaktor SOX4 und verschiedenen klinisch-pathologische Parameter sowie das Überleben der Patienten. Die Expressionsniveaus von Kern SOX4 wurden durch Immunhistochemie analysiert; die Daten Magengewebe von 168 Patienten mit GC besteht. Gepaart t wurden
Tests verwendet, um die Unterschiede in der Kern SOX4 Ausdruck zwischen Tumor und Nicht-Tumorgewebe von jedem Patienten zu analysieren. Zweischwänziges Χ ^{2 Tests wurden durchgeführt, um festzustellen, ob die Unterschiede in der Kern SOX4 Expression und klinisch-pathologische Parameter waren signifikant. Time-to-Event-Endpunkte für klinisch-pathologische Parameter wurden mit der Methode nach Kaplan-Meier aufgetragen, und die statistische Signifikanz wurde mit univariaten Log-Rank-Tests bestimmt. Cox Proportional Hazard Modell wurde für multivariate Analyse verwendet, um die Unabhängigkeit der prognostische Wirkung von Kern SOX4 Ausdruck zu bestimmen. Die Überexpression von Kern SOX4 war signifikant mit der Tiefe der Invasion korreliert ( P
< 0,0001), Lymphknotenstatus ( P
= 0,0055), Fernmetastasen ( P
= 0,0195 ), Stufe ( P
= 0,0003) und Gefäßinvasion ( P
= 0,0383). Patienten, die hohe Expressionsniveaus von Kern SOX4 erreicht eine deutlich schlechtere krankheitsfreie Überlebensrate im Vergleich zu Patienten mit niedrigem SOX4 Expressionsniveaus ( P
= 0,003) angezeigt. Univariate Cox Regressionsanalyse zeigte, dass die Überexpression von Kern SOX4 eine klare prognostischer Marker für die GC war ( P
= 0,004). Überexpression von Kern SOX4 können als Marker verwendet werden, um die Ergebnisse von Patienten mit GC vorherzusagen}

Citation. Fang C-L, Hseu Y-C, Lin Y-F, Hung S-T, Tai C, Uen Y-H, et al. (2012) Klinische und prognostische Association of Transcription Factor SOX4 in Magenkrebs. PLoS ONE 7 (12): e52804. doi: 10.1371 /journal.pone.0052804

Editor: Anthony WI. Lo, The Chinese University of Hong Kong, Hong Kong

Empfangen: 12. September 2012; Akzeptiert: 21. November 2012 um; Veröffentlicht: 20. Dezember 2012

Copyright: © 2012 Fang et al. Dies ist eine Open-Access-Artikel unter den Bedingungen der Lizenz Creative Commons, die uneingeschränkte Nutzung erlaubt, die Verteilung und Vervielfältigung in jedem Medium, vorausgesetzt, der ursprüngliche Autor und Quelle genannt werden

Finanzierung:. Diese Arbeit wurde von zwei Stipendien (CMFHR10020 und CMFHR10064) von Chi Mei Medical Center (www.chimei.org.tw) unterstützt. Die Geldgeber hatten keine Rolle in Studiendesign, Datenerfassung und Analyse, Entscheidung oder Vorbereitung des Manuskripts zur Veröffentlichung

Konkurrierende Interessen:.. Die Autoren haben erklärt, dass keine Interessenkonflikte bestehen

Einführung

die Häufigkeit von Magenkrebs (GC) verringerte sich zwischen den 1940 s und den 1980 s in der westlichen Welt, aber GC bleibt extrem weit verbreitet in der ganzen Welt. Es wirkt sich auf etwa eine Million Menschen pro Jahr und ist die zweithäufigste Ursache für Krebstod [1], [2]. Eine große Veränderung in der Häufigkeit ist offensichtlich über die Kontinente [1]. In Asien und Teilen von Südamerika, ist GC die häufigste epitheliale Bösartigkeit und ist eine führende Ursache der durch Krebs verursachten Todesfälle. In Taiwan Regierung im Jahr 2011 ausgegebenen Statistiken Platz GC als sechste am häufigsten bösartigen Erkrankung diagnostiziert, was zu mehr als 2000 Todesfälle pro Jahr (http://www.doh.gov.tw/statistic/index.htm). Erhebliche Fortschritte wurden in der chirurgischen Techniken und Chemotherapie gemacht, die die Behandlung von GC verbessert haben, aber die Heilungsrate für fortgeschrittene Fälle weiterhin niedrig und die Morbidität bleibt hoch [3], [4]. Ein besseres Verständnis der Pathogenese und biologischen Merkmale der Krankheit ist notwendig, um weitere Methoden der Behandlung zu verbessern.

Unter den prognostische Marker nun für GC, das wichtigste ist, das American Joint Committee on Cancer (AJCC) Stufe bestimmt durch die Tiefe der Invasion, die Beteiligung der Lymphknoten und Fernmetastasen. Allerdings variiert die Prognose auch bei Patienten auf der gleichen Stufe. Somit ist die Suche nach bestimmten biologischen Markern zu Untergruppen von Patienten zu identifizieren, die geeignet sind, einen besonders aggressiven Krankheitsverlauf zu erleben ist noch nicht abgeschlossen [5]. In den letzten Jahrzehnten haben mehrere Studien vorgeschlagen, dass genetische Veränderungen eine Rolle bei der Entwicklung und Progression von GC spielen kann [6]. Studien in der molekularen Pathologie kann die Pathogenese der Erkrankung beim Verständnis helfen und auch nützliche prognostische molekulare Marker offenbaren könnten. Einige schlugen vor, biologische Prognosemarker umfassen die Überexpression von Proteinkinase CK2, VAV3, Mesothelin und epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor [7] - [11].

Beim Menschen ist die geschlechtsbestimmenden Region Y (SRY) Box-Familie, auch als SOX Familie bezeichnet, umfasst 20 hochTranskriptionsFaktoren erhalten, die eine wichtige Rolle in der Entwicklung spielen. Diese Transkriptionsfaktoren sind durch eine konservierte Signatursequenz in der Hochmobilitätsgruppe (HMG) DNA-Bindungsdomäne (DBD) [12], [13] definiert. SOX4 ist ein 47-kDa-Protein, das von einem einzigen Exon-Gen kodiert wird, die hoch in Wirbeltieren konserviert ist. Bei Mäusen ist SOX4 speziell im Ovar, Hoden, Brustdrüse und Thymus und in Maus-T und Prä-B-Lymphozytenzelllinien [14] zum Ausdruck gebracht. Darüber hinaus ist SOX4 essentiell für die Entwicklung des Herzens, Lymphozyten und Thymozyten und SOX4-null-Mäuse sterben Herzfehler [15]. Die proliferative Kapazität von B-Zell-Vorläufern wird in Zellen von SOX4 Knockout-Mäusen [16] stark verringert.

Die klinische Bedeutung von SOX4 hat sich die Aufmerksamkeit in den letzten Jahren gewonnen Erhöhung mit zahlreichen Berichten, dass SOX4 was darauf hindeutet, zu Tumor beitragen kann Progression. Drei unabhängige Studien Screening für wichtige Onkogene zeigten, dass SOX4 häufig durch Einfügungen retrovirale verändert wird [17] - [19]. Die Maus-Leukämie-Virus gezielt typischerweise SOX4 und stabilisiert die SOX4 Nachricht B-Zell-Lymphomen zu produzieren, die SOX4 Nachricht Stufen erhöht angezeigt [19]. Erhöht SOX4 Expression mit Tumoren der Blase, der Prostata und des Dickdarms verbunden sind, und mit nicht-kleinzelligem Lungentumoren [20] - [23]. Jedoch ist die Rolle von SOX4 in solchen Tumoren nicht vollständig verstanden, und die berichteten Daten haben gewisse Widersprüche gezeigt. Während SOX4 Knockdown bei der Apoptose von ACC3 adenoidzystische Karzinom-Zellen führte, förderte SOX4 Überexpression Zellzyklusarrest und Apoptose von Krebszellen HCT116 Kolon [24], [25]. Die microRNA (miRNA) miR-335 inhibiert metastatischen Zellinvasion und gehandelt hat, zumindest teilweise durch Targeting Sox4
und seine vermeintlichen Ziel TNC
, die eine extrazelluläre Matrixkomponente kodiert in der Zelle beteiligt Migration [26]. Im Gegensatz dazu, je höher das Niveau der SOX4 Ausdruck, desto besser ist die Prognose für Patienten mit Medulloblastom und anderen Tumorarten [27]. So je nach dem Zusammenhang SOX4 könnten unterschiedliche Wirkungen auf Tumorzellen ausüben und primäre Transformationsmechanismus; sind weitere Untersuchungen gerechtfertigt diese Frage zu klären.

Bis heute hat die prognostische Bedeutung der Kern SOX4 Expressionsniveaus in der menschlichen GC nicht nachgewiesen. Diese Studie untersuchte die Zusammenhänge zwischen Kern SOX4 Expression und klinisch-pathologische Parameter und ausgewertet, um die Bedeutung der Kern SOX4 in der Prognose für Patienten mit GC vorherzusagen.

Materialien und Methoden

Ethik Statement

die Institutional Review Board an Chi Mei Medical Center genehmigt das Gewebe Akquisitionsprotokoll für die immunhistochemischen und Immunoblotting Studie. Eine schriftliche Einverständniserklärung wurde von jedem Teilnehmer vor dem Gewebe Erwerb erhalten.

Die Teilnehmer und die Proben

Die Patientenkohorte umfasste 168 aufeinander folgenden GC Fälle von 1997 bis 2004 pathologischen und klinischen Faktoren und die klinischen Ergebnisse zu dokumentieren. Alle Fälle in dieser Studie erhielten radikale Gesamt oder subtotale Gastrektomie mit D2 oder D3 Lympknotendissektion. Die Vollständigkeit der chirurgischen Resektion wurde in allen Fällen erreicht, und die pathologische Untersuchung ergab keinen Tumor Beteiligung der Resektionsrändern in chirurgischen Proben (als R0 klassifiziert: keine Resttumor basierend auf R Kategorie in AJCC-Klassifikation). Keiner unserer Studie Patienten hatten eine präoperative Chemotherapie und /oder Strahlentherapie erhalten. Der Nicht-Tumor-Teil wurde aus grob normalen Magenschleimhaut, getrennt von dem Tumor in reseziert Magen Probe erhalten. Clinicopathologic Parameter des GCs wurden nach der AJCC Klassifikation bestimmt. Die Follow-up-Dauer für das krankheitsfreie Überleben wurde als die Zeit zwischen dem Betrieb Datum und Tag der Rückfall definiert, entsprechend der Tabelle des Patienten. Für jeden Patienten analysierten wir ein Paar von Tumor und Nicht-Tumor-Magengewebe die Kern SOX4 Ausdruck zu bestimmen.

immunhistochemischen Analyse

Nuclear SOX4-Expression wurde durch Immunhistochemie analysiert. Paraffin-eingebettete Gewebeblöcke wurden auf 5 mm geschnitten und auf Mikroskop-Objektträger übertragen (Muto Pure Chemicals Co. Ltd., Tokyo, Japan). Brustgewebe wurde eine positive Kontrolle für SOX4 verwendet. Die negative Kontrolle zur Folge Auslassung des primären Antikörpers und die Inkubation mit Phosphatpuffer-Salzlösung. Die Schnitte wurden mit Xylol, gefolgt von Rehydratisierung in abgestuften Alkoholen entwachst. Entparaffiniert wurden die Schnitte für 40 min bei 95 ° C in pH 6,0 Citratpuffer inkubiert auf einer Heizplatte Antigene zu erhalten. Weitere Antigen-Blockierung wurde für 5 min mit Dako REAL Peroxidasehaltige Blocking Solution (Dako North America Inc., Carpinteria, CA) durchgeführt. polyklonale anti-SOX4 (Lebensdauer, Victoria, Canada) für 1 Stunde bei Raumtemperatur, bei einer Verdünnung von 1:400: Die Objektträger wurden anschließend mit primärem Antikörper inkubiert. Detektion der immunoreaktiven Färbung wurde das Avidin-Biotin-Peroxidase-Komplex-Verfahren gemäß den Anweisungen des Herstellers durchgeführt. Eine empfindliche Dako REAL EnVision Detection System (Dako North America Inc., Carpinteria, CA) verwendet. Nach Inkubation mit Diaminobenzidin für 5 Minuten, mit Hämatoxylin und montiert in Dako Faramount Wässrige Mounting Medium (Dako North America Inc., Carpinteria, CA) für die mikroskopische Auswertung wurden die Schnitte gegengefärbt. Als Transkriptionsfaktor wurde nur Kern SOX4 erzielt. Semi-quantitative Scoring der Intensität (0, keine Färbung; 1, schwache Färbung, 2, starke Färbung) und Anteil an positiven Krebszellen (0, keine Färbung; 1, weniger als die Hälfte, 2, mehr als die Hälfte) durchgeführt wurde [22]. Das Endergebnis wurde für jede Probe berechnet, indem die Intensität multipliziert und den Prozentsatz der Immunfärbung: 0, keine Färbung; 1, schwache Färbung; 2, moderate Färbung; 4, eine starke Färbung. Abschnitte mit einer Punktzahl von 0 oder 1 angezeigt geringe Expression von SOX4, während diejenigen, die 2 oder 4 erzielt wurden als mit hoher Expression oder Überexpression von SOX4 definiert. Klinische Datenerfassung und immunhistochemischen Analyse wurden unabhängig voneinander durchgeführt, in einem Forscher-verblindete Studie.

RNA-Extraktion und cDNA-Synthese

Nach den Anweisungen des Herstellers, Gesamt-RNA aus 10 Tumor und nicht -tumor Paare von Magengewebe wurde unter Verwendung eines RNA-Extraktions-Kits (Sigma, St. Louis, MO) isoliert. RNA-Qualität wurde unter Verwendung von Agilant 2100 Bioanalyzer analysiert. Die RIN-Werte aller 20 Proben wurden über 7 cDNA-Synthese wurde in unserer früheren Studie [28] beschrieben, durchgeführt. Synthetisierte cDNA wurde bei -20 ° C bis zur Verwendung gelagert.

Primer und Sonden

Taqman Gene Expression Assays einschließlich Primern und Sonden von SOX4 und β-Actin, eine interne Kontrolle wurden von Applied gekauft Biosystems. Die Assay-Zahlen von SOX4 und β-Aktin waren Hs00268388_s1 und Hs99999903_m1 sind.

Quantitative Real-time PCR

Die Expressionsniveaus der Zielgene wurden mittels quantitativer Echtzeit-PCR gemessen in der ABI Prism 7300 Sequence Detection System (Applied Biosystems), wie in unserer früheren Studie beschrieben [28]. Schwellenzyklus ( C _{t
) ist der Bruchzykluszahl, bei der die Fluoreszenz erzeugt durch Spaltung der Sonde über der Basislinie einen festen Wert überschreitet. Für eine gewählte Schwelle, eine kleinere Ausgangskopienzahl führt zu einer höheren C t
Wert. Die Menge an SOX4 mRNA in Tumor oder Nicht-Tumorgewebe, standardisiert gegen die Menge von β-Actin-mRNA wurde als Δ C Tumor oder in Δ C Nicht-Tumor exprimiert
= C t
(SOX4.) - C t
(β-Aktin)}

Zellkultur

Human normal (Hs738.St/Int) und GC-Zelllinien (AGS und NCI-N87) wurden von der American Type Culture Collection (ATCC; Manassas, VA, USA) erhalten. Die Zelllinien wurden von der ATCC Zellbiologie Programm authentifiziert und wurden nicht mehr als 6 Monate agierten, bevor neue Zellen aus dem gefrorenen Zustand oder eine neue Zelle aliquoten gebracht wurden, wurde von ATCC gekauft. Zellen wurden in DMEM (Hs738.St/Int), F-12K (AGS) oder RPMI-1640 (NCI-N87) Medium mit 10% fötalem Rinderserum, 100 Einheiten /ml Penicillin G, 100 ug /ml Streptomycin Sulfat und 250 ng /ml Amphotericin B.

Kernproteinpräparates

Kernproteine ​​wurden mit NE-PER Nuclear Extraction Reagent (Pierce Biotechnology, Rockford, IL) extrahiert, entsprechend den Anweisungen des Herstellers . Die Proben wurden bei -80 ° C bis zur Verwendung gelagert. Die Proteinkonzentration wurde unter Verwendung eines BCA Protein Assay Kit (Pierce Biotechnology) mit Rinderserumalbumin als Standard bestimmt.

Immunoblotting

denaturierte Proteinproben wurden auf 12% SDS-PAGE unterzogen. Proteine ​​wurden auf Nitrocellulosemembranen übertragen und blockiert Blots bei 4 ° C inkubiert wurden über Nacht mit anti-SOX4 polyklonalen Antikörper (1:1000 Verdünnung). TATA-Bindungsprotein wurde als interne Kontrolle für gleiche Proteinbeladung verwendet. Die Zelle wurde durch Fraktionierung β-Actin bestätigt die Möglichkeit einer Kontamination auszuschließen. Blots wurden weiter mit Sekundärantikörper, konjugiert mit Peroxidase (Sigma, St. Louis, MO) für 1 h bei Raumtemperatur inkubiert. Sie wurden dann mit Supersignal West-Femto Maximun Sensitivity Substrat (Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL) inkubiert und ausgesetzt einer Fuji medizinischen Röntgenfilm (Fuji Photo Film Co., Tokyo, Japan). Bildverarbeitung wurde unter Verwendung von Fuji Bildkaliber-Software.

Statistische Analyse

Gekoppelte t
Tests wurden verwendet, um den Unterschied in der Kern SOX4 Ausdruck zwischen Tumor und Nicht-Tumorgewebe zu bewerten für jeden Patienten. Wir untersuchten mehrere klinisch-pathologische Parameter: Alter, Geschlecht, Tiefe der Invasion, Lymphknotenstatus, Fernmetastasen, Stadium, Grad der Differenzierung und Gefäß Permeation. Die Korrelation zwischen Kern SOX4 Ausdruck und jeder klinisch-pathologische Parameter wurde mit sucht χ ^{2-Test. Die Time-to-Event-Endpunkte für alle klinisch-pathologische Parameter wurden von der Kaplan-Meier-Methode, und der Grad der Bedeutung aufgetragen wurde von der univariaten Log-Rank-Test berechnet. Parameter, die als signifikant ( P
≤0.05) in univariaten Analyse eingegeben wurden als Variablen in der multivariaten Cox-Regressionsmodell und Hazard Ratio (HR) und die Unabhängigkeit der prognostische Bedeutung entstanden könnte auf eine schrittweise rückwärts Art und Weise bestimmt werden. Die Daten wurden mit SPSS Software-Version 14 (SPSS, Chicago, IL) analysiert. A P
Wert von < 0,05 wurde als signifikant angesehen}

Ergebnisse |

Grunddaten

An dieser Studie nahmen 168 Patienten mit GC, 104 von ihnen waren. Männer und 64 Frauen waren (Tabelle 1). Das Alter der Patienten von 34 bis 88 Jahren bei der ersten Diagnose lag (Mittelwert 64,9 Jahre). Auf der Grundlage der Klassifizierung AJCC, 45 Patienten im Stadium I waren, 45 waren in der Stufe II, waren 54 in der Stufe III und 24 waren in der Stufe IV. Die Follow-up-Periode für alle Patienten von 0 bis 136,2 Monate reichten (Mittelwert 21,4 Monate). Während des Follow-up, starben 86 Patienten von GC.

Nuclear SOX4 Expression wurde nach oben reguliert und Verbunden mit Clinicopathologic Parameter in GC

Wir haben immunhistochemische Analyse der Expression von Kern SOX4 in Geweben von erhalten zu untersuchen unserer Studie Patienten (Figuren 1A bis C). Nuclear SOX4 Expression war signifikant höher in Tumorgewebe als bei Nicht-Tumorgewebe ( P
< 0,001). Überexpression von Kern SOX4 (Noten von 2 oder 4) wurde in 90 der 168 Patienten (53,5%) beobachtet. Western-Blot-Analyse zeigte auch, dass die Expression von SOX4 wesentlichen in Magenkrebszellen und Gewebe erhöht wurde im Vergleich zu normalen Zellen und Geweben (Figur 1D). Zusätzlich quantitative Echtzeit-PCR-Analyse zeigte, dass die Expression von mRNA SOX4 wesentlichen in Tumorgewebe erhöht war im Vergleich zu nicht-Tumorgeweben (Tabelle 2). Wie in Tabelle 3 dargestellt ist, korreliert die Überexpression von Kern SOX4 signifikant mit den folgenden Parametern: Tiefe der Invasion ( P
< 0,0001), Lymphknotenstatus ( P
= 0,0055), Fernmetastasen ( P
= 0,0195), Stufe ( P
= 0,0003) und Gefäßinvasion ( P
= 0,0383). Kein signifikanter Zusammenhang entstand zwischen Überexpression von Kern SOX4 und Alter oder Geschlecht.

Die Überexpression von Nuclear SOX4 als prognostischer Marker für die GC

Die Korrelationen der klinischen Ergebnisse mit nuklearen SOX4 Ausdruck sind in Abbildung 2 dargestellt. Die Überexpression von Kern SOX4 war signifikant mit kürzeren krankheitsfreien Überleben ( P
= 0,003). Patienten mit hohem Expressionsniveaus von Kern SOX4 erreicht eine 5-Jahres krankheitsfreie Überlebensrate von 45,6% im Vergleich zu 66,5% bei Patienten mit niedrigen Expressionsniveaus. Weiterhin Hoch Stufe GC (Stadium III und IV) wurde verwendet, um die Wirkung der Kern SOX4 Überexpression auf die Prognose erfahren. Allerdings ist der Zusammenhang zwischen Überexpression von Kern SOX4 und das krankheitsfreie Überleben nur grenzwertig signifikant war ( P
= 0,102, Abbildung 3).

Die Ergebnisse der univariaten Analyse der prognostischen Marker für GC sind in Tabelle 4 krankheitsfreie Überleben signifikant gezeigt mit jedem der folgenden korreliert: Lymphknotenstatus ( P
< 0,001), Fernmetastasen ( P
< 0,001), Stufe ( P
< 0,001), Gefäßinvasion ( P
< 0,001), und die Überexpression von Kern SOX4 ( P
= 0,004). Allerdings war der Zusammenhang zwischen Überexpression von Kern SOX4 und das Überleben nicht signifikant nach für andere bekannte prognostische Marker in der multivariaten Analyse Steuerung ( P
= 0,186, Tabelle 5). In der multivariaten Analyse der Tiefe der Invasion (Hazard Ratio (HR) = 2,091, 95% Konfidenzintervall (CI) = 1,073-4,077, P
= 0,030), Lymphknotenstatus (HR = 3,901, 95% CI = 1,589-9,580, P
= 0,003), Fernmetastasen (HR = 15,453, 95% CI = 6,419 bis 37,114, P
< 0,001) und Gefäßinvasion (HR = 1,849, 95 CI% = 1,058-3,229, P
= 0,031) waren prognostisch unabhängig.

Diskussion

Magenkrebs bleibt ein großes Problem der öffentlichen Gesundheit weltweit [1]. Die chirurgische Resektion ist in der Regel die beste Behandlung in Betracht gezogen, die Prognose zu verbessern, wenn eine frühzeitige Diagnose von GC erfolgreich ist [29]. Leider sind die meisten Fälle von GC diagnostiziert spät, bei einer lokal fortgeschrittenen Stadium. Patienten mit fortgeschrittenen Tumoren erleiden oft radikale Gastrektomie, die zu einem hohen Maß an Morbidität führt und das Risiko eines erneuten Auftretens nicht [30] zu verringern. Eine bessere Kenntnis der molekularen Mechanismen, die Entwicklung dieser tödlichen Neoplasie zugrunde liegenden ist erforderlich, wenn neue Strategien zur Vorbeugung und Behandlung GC entwickelt werden. Insbesondere Identifizierung von Molekülen, die wertvolle Werkzeuge bei Krebs Initiierung und Progression geändert werden als prognostische Marker oder therapeutische Ziele zur Verfügung stellen kann.

Die Expression von SOX4 in der menschlichen Krebsarten variiert je nach Krebsart. Die SOX4 Ebene ist in zahlreichen menschlichen Krebserkrankungen erhöht, einschließlich der Blase, Prostata, Endometrium und Leber, während es in Melanom und Gallenblasenkrebs verringert wird [20], [21], [31] - [34]. Unsere Literaturrecherche nur eine Studie identifiziert, die die Expression von SOX4 in menschlichen GC untersucht hatte. Diese Studie, die von Shen et al., Zeigten, dass SOX4 in GC-Patienten überexprimiert wurde [35]. In der vorliegenden Studie untersuchten wir die Expressionsniveaus von Kern SOX4 im Magengewebe von 168 Patienten mit GC erhalten. Unsere Ergebnisse waren mit denen von Shen et al konsistent. und zeigte, dass die Kern SOX4 Expression in Magentumorgewebe im Vergleich zu nicht-Tumor-Magengewebe erhöht wurde. Die Immunoblotting Ergebnisse bestätigten, dass die Kern SOX4 Expression war höher bei GC-Zellen als in normalen Zellen des Magens.

Unsere Ergebnisse zeigten auch, dass die Überexpression von Kern SOX4 in GC Geweben wurde eng mit der Tumorinvasion und Metastasierung korreliert. Der Mechanismus, durch den SOX4 seine invasive und metastatische Aktivität ausübt, bleibt unklar. In der ersten Zeile von Beweismitteln wurden miRNAs (kleine nicht-kodierende RNAs mit regulatorischen Funktionen) gezeigt mit Tumorinvasion und Metastasierung assoziiert zu sein [36] - [38]. Frühere Arbeiten von Tavazoie et al. zeigten, dass miR-335 Metastasierung durch Herunterregulierung der SOX4 [26] unterdrückt. Dieses Ergebnis legt nahe, dass SOX4 zu Tumoraggressivität verbunden ist.

Die zweite Zeile der Beweise durch Studien über epitheliale-mesenchymale Transition (EMT) vorgesehen, die ein wichtiger Schritt während der Embryonalentwicklung ist [39]. deutet darauf hin, dass eine unangemessene Nutzung von EMT könnte eine Komponente der Invasion von vielen Tumoren epithelialen Geweben sein. Zelleigenschaften sind stark während EMT, was zu Änderungen an Zell-Zell- und Zell-Matrix-Wechselwirkungen, Zellmotilität und Invasivität [40], [41] berührt. Kürzlich durchgeführte Studie von Zhang et al. zeigten, dass Brustepithelzellen in menschlichen Überexpression von SOX4 auf den Erwerb von mesenchymalen Züge geführt und eine verbesserte Zellmigration und Invasion. Weiterhin SOX4 positiv auf die Expression von bekannten EMT Induktoren reguliert und aktiviert, um die TGF-β-Weg zu EMT beizutragen. Die Expression von SOX4 wurde durch TGF-β induziert und war notwendig für TGF-β-induzierte EMT. Diese Ergebnisse zeigen, dass SOX4 spielt eine wichtige Rolle bei der Progression von Brustkrebs, von EMT orchestriert [42]. Diese Studien teilweise für die Vereinigung der Überexpression von Kern SOX4 mit Tumorinvasion und Metastasierung verantwortlich sein kann.

genaue Vorhersage des Risikos eines erneuten Auftretens bei der Minimierung der negativen Auswirkungen der GC unterstützen würde und die therapeutische Wirkung der Behandlung zu maximieren. Von den verfügbaren prognostische Marker für GC ist das AJCC Stadium am wichtigsten. Allerdings variiert die Prognose sogar bei Patienten, bei der gleichen Krankheitsstadium; daher werden alternative prognostische Marker gesucht. Nur wenige Studien haben den prognostischen Wert SOX4 Proteine ​​untersucht. Jafarnejad et al. haben gezeigt, dass eine starke Assoziation zwischen reduzierter SOX4 Ausdruck und schlechten Überleben der Patienten [33] gab es in Melanom-Patienten. Ebenso Kim et al. zeigten, dass mit hepatozellulärem Karzinom bei Patienten eine Überexpression von SOX4 Protein mit einer verbesserten Patientenergebnissen [32] verbunden war. Zusätzlich Aaboe et al. haben gezeigt, dass eine starke Assoziation zwischen erhöhter SOX4 Ausdruck gegeben und das Überleben der Patienten in Fällen von Blasenkrebs [20] erhöht. Wir haben keine Berichte veröffentlicht die prognostische Bedeutung von SOX4 in menschlichen GC zu diskutieren. Die Ergebnisse dieser Studie zeigten, dass die Kern SOX4 Überexpression invers mit dem Überleben der Patienten korreliert; Dieser Befund widersprach den zuvor berichteten positive Korrelationen. Unsere Studie war die erste zu zeigen, dass die Überexpression von nuklearen SOX4 schlechtere Ergebnisse für Patienten mit GC vorhersagen kann. Überexpression von Kern SOX4 erscheint ein nützlicher Marker zur Vorhersage Ergebnisse bei Patienten mit GC zu sein, die chirurgische Resektion des Tumors erhalten haben. So können Patienten mit GC, die eine Überexpression von Kern SOX4 Anzeige sollte sorgfältig verfolgt werden. Da unsere Patientengruppe klein war, sollten künftige Studien umfassen eine größere GC Patientengruppe, die prognostische Bedeutung der Kern SOX4 bei dieser Krankheit aufzuklären.

Insgesamt ist diese Studie Beweise bei Patienten für die klinische Bedeutung von überexprimiert SOX4 bereitgestellt mit GC. Unsere Ergebnisse zeigen, dass SOX4 Targeting könnte eine neue therapeutische Modalität für die Behandlung von GC zur Verfügung stellen.

Acknowledgments

Die Autoren möchten sich Jung-Chin Hsu für ihre hervorragende technische Unterstützung zu danken.

• PLoS ONE: Synergistic Rolle zwischen p53 und JWA: prognostische und prädiktive Biomarker in Magenkrebs
• PLoS ONE: Leistung verschiedener Gastric Cancer Screening-Methoden in Korea: Eine Population-Based Study