PLoS ONE: odsutnost Claudin-11 povezan je s povećanom invazivnosti želudac stanica raka

Sažetak pregled

Pozadina pregled

Claudins su membranski proteini koji imaju kritičnu ulogu u čvrsti spoj (TJ) nastajanju i funkcioniranju. Članovi claudin obitelji gena su pokazali da se nenormalno regulirana, te da sudjeluju u patogenezi raznih karcinoma u ljudi. U ovom istraživanju, možemo izvijestiti da claudin-11 ( CLDN11 pregled) je ušutkao kod raka želuca preko
Hipermetilacija njegove promotorske regije. Pregled

Metodologija /glavnih nalaza

Razine CLDN11 pregled metilacije i mRNA izmjerene su u osnovnim želučanog tkiva raka, noncancerous želučane sluznice, te staničnim linijama želučanog podrijetla pomoću kvantitativne metilacija specifičan PCR (qMSP) i kvantitativni RT-PCR (QRT-PCR), respektivno. Analize uparenih želučanog raka i susjednih normalnih želučanog tkiva pokazala Hipermetilacija od CLDN11 pregled promotorske regije u želučanog karcinoma, a to Hipermetilacija značajno povezana sa smanjenom od CLDN11 pregled izraz vs
normalnog tkiva. CLDN11 pregled promotorska regija je također hypermethylated u svim želučanih staničnim linijama karcinoma ispitanih u odnosu na besmrtnih normalne želuca epitelnim stanicama. Štoviše, CLDN11 pregled ekspresija mRNA je obrnuto povezana s razinom metilacije. Liječenje CLDN11 pregled -nonexpressing želučane stanice raka s 5-aza-2'-deoksicitidina obnovljena CLDN11 pregled izraz. Štoviše, siRNA posredovane obaranje CLDN11 pregled izraz u normalnim želučanog epitela povećala njihova pokretljivost i invazivnost. Pregled

Zaključci /Značaj pregled

Ovi podaci ukazuju na to da Hipermetilacija od CLDN11 pregled, što dovodi do regulirani izraza, doprinosi želučane karcinogeneze povećanjem staničnog pokretljivost i invazivnost. Daljnje razumijevanje mehanizme ulogu claudin proteine ​​u želučanom karcinogeneze vjerojatno će pomoći u identifikaciji nove pristupe u dijagnostici i terapiji karcinoma želuca pregled

Izvor:. Agarwal R, Mori Y, Cheng Y, Jin Z, Olaru AV, Hamilton JP, et al. (2009) odsutnost Claudin-11 povezan je s povećanom invazivnosti želudac stanica raka. PLoS ONE 4 (11): e8002. doi: 10,1371 /journal.pone.0008002 pregled

Urednik: Fatah Kashanchi, George Washington University School of Medicine, United States of America pregled

Primljeno: 3. kolovoz 2009; Prihvaćeno: 23. listopada 2009; Objavljeno: 24. studenog 2009 pregled

Copyright: © 2009 Agarwal i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo je podržan od strane United States National Institutes of Health daje CA085069, CA138677 i CA146799 za SJ Meltzer. U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

rak želuca (GC) i dalje drugi najveći-najčešći uzrok smrti od raka diljem svijeta. To je jedan od najsmrtonosnijih zloćudnih bolesti i vodeći uzrok smrti od raka u zemljama u razvoju, s ukupnim postotkom preživljavanja pet godina ispod 20% [1], [2]. Pregled

Studije GCS i njihova preneoplastic prekursora lezije su identificirali nekoliko genetske i Epigenetske promjene, uključujući mikrosatelitne nestabilnosti, točkastih mutacija i gubitka heterozigotnosti (LOH) koje utječu na tumor supresor gena (TSGs) [3] - [6]. Ipak, molekularna patogeneza GC je još uvijek nedovoljno razjašnjeni. Pregled

Epigenetske promjene su vrlo važni u razvoju i progresiji karcinoma [7]. Transkripcijski inaktivacija tumor supresor gena putem abcrantnog promotora Hipermetilacija CpG otoka, uzrokujući trajna utišavanja gena, je jedan od glavnih epigenetičko mehanizam TSG inaktivacije. Pregled

Ranije studije su objavljeni na promotora Hipermetilacija u GCS i njihove premalignih prekursora [ ,,,0],8] - [10]. p16INK4a i p15INK4B su među prvim genima pokazati Hipermetilacija u GCS [11]. Naša grupa, a drugi kasnije otkrio Hipermetilacija o mismatch popravka gena hMLH1 DNA u GCS pokazuje česte mikrosatelitne nestabilnosti (MSI-H) [12] - [14]. Također smo pokazali da Hipermetilacija od E-kadherina (CDH1) gen često se javlja u GCS [15]. pregled

genoma širom search pilot mikropostrojima bazi provode naše grupe, obavlja kako bi se otkrili novi epigenetically prigušivačem gena u želuca karcinogeneze, identificiran claudin-11 ( CLDN11 pregled), široka čvorište (TJ) proteina, kao potencijalni cilj epigenetičke inaktivacije u želučanog karcinoma (neobjavljeni podaci). pregled

Claudin-11 spada porodici claudin proteina, koji sadrži više od 23 članova. Članovi obitelji claudin izraženi na način vrlo tkivno specifični u različitim normalnim i tkivima neoplastičnih [16]. Claudins su transmembranski proteini koji imaju ključne uloge u nastajanju i funkcioniranju TJ. TJS su međustanične veze kritična u paracellular transport otopljenih tvari, kao iu održavanju stanične polarnosti. Stanice tumora obično pokazuju strukturne i funkcionalne nedostatke u njihovom TJ [17]. Pregled

U posljednjih nekoliko godina, brojne studije su pokazale neprirodni izraz claudin proteina u različitim vrstama raka [18], [16]. Nekoliko od tih studija pronašao deregulacija izražavanja claudin proteina preko
promotora Hipermetilacija. Hipermetilacija inducirana odsutnost claudin-7 ekspresije prethodno je bio prijavljen u grudima [19] i debelog [20] karcinoma. Claudin-6 je također epigenetically ušutkao kod raka dojke [21], dok claudins -3 i -4 su epigenetically regulirana u stanicama jajnika [22], [23]. Pregled

Trenutni Studija identificira i izvješća, na naše znanje po prvi put, da je CLDN11 pregled promotorska regija hypermethylated u GC tkivima i stanicama. Osim toga, dok je CLDN11 pregled mRNA ekspresionirana je u svim osnovnim netumorskih želučane sluznice, kao i u besmrtne normalnom želučane epitelnih stanica linije, je ušutkao sve GC tkiva i stanične linije ispituje. Zanimljivo je da siRNA posredovana regulacija CLDN11
u CLDN11
-eksprimirajući želučane stanice također je povezana s fenotipskih promjena vezanih za rak, posebno povećane pokretljivosti stanica i invazivnosti. Pregled

Materijali i postupci pregled

staničnim linijama i Clinical Tissue Uzorci pregled

besmrtne humane normalne želučanih epitelne stanice (HFE145) dobiveni su od Dr. Duane T. Smoot (Howard University) i GC stanične linije AGS, SIIA, MKN28, KATOIII i SNU-1 dobiveni su od ATCC. Sve stanične linije uzgojene su i održavani u RPMI 1640 mediju obogaćenom s 10% fetalnog goveđeg seruma i 1% otopina antibiotik antimikotika (Invitrogen). Pregled

Spareni primarni želudca normalnim i tumorskim tkivima prikupljeni su Johns Hopkins Hospital ( JHH). Uzorci snap-smrznuto odmah nakon resekcije. Pregled

Etika Izjava pregled

Johns Hopkins University (JHU) Institutional Review Board (IRB) odobrava dobiven je za sve slučajeve uključeni u studiju. Slučajevi su dobiveni iz JHU kirurške patologije pod JHU IRB-odobrenog izuzeća 02-07-19-05e prema pravilu 45 CFR 46,101 (b), koja odriče zahtjeva za dobivanje suglasnosti pacijenta. Pregled

Čišćenje i priprema genomske DNK Ukupna RNA i pregled

Genomska DNA bila je ekstrahirana iz snap-smrznuto, uzorci tkiva ili stanične linije pomoću DNeasy krv & Tkiva Kit (QIAGEN, Valencia, CA), sukladno protokolu proizvođača. Ukupna RNA se ekstrahira sa TRIZOL reagensom (Invitrogen). Izolirana DNK i RNK su kvantificirani pomoću NanoDrop ND-1000 spektrofotometar (NanoDrop, Wilmington, DE). Pregled

kvantitativni Metilacija-specifična PCR (qMSP) za Claudin-11

genomska DNA su dobivene iz 36 uzorci za pacijenta koji sadrži 18 GC i 18 podudarne noncancerous želuca sluznice (NS) tkiva, kao i od različitih staničnih linija karcinoma želuca, podvrgnuti su qMSP. qMSP je izveden kako je prethodno opisano, sa manjim modifikacijama [24]. Ukratko, bisulfit liječenje genomskih DNA je provedeno pomoću EpiTect bisulfit tretman Kit (QIAGEN, Valencia, CA). MSP produkt amplifikacije i TaqMan sonda za otkrivanje potpuno metiliran DNA su dizajnirani da uključuje više CpG mjesta u 5'-UTR regije CLDN11 pregled gena. CLDN11 pregled specifičnih Početnice i sonda sekvence koristi su: prednji primer 5 'CGCGATTGGTCGGCGCGTTTC 3'; Obrnuti primer 5 'GACGAAAACAACAACGCTACT 3'; TaqMan 5'TCGGAGTCGCGGGGTTTAAAGAG sonda 3 '. CpGenome Universal Metilirani DNA (Chemicon International, Temecula, CA) je poslužio kao pozitivna kontrola, a serijska razrjeđenja tome su korišteni za zemljište standardne krivulje. qMSP s TaqMan sonde su provedena na iQ5 termalni ciklički uređaj (BioRad, Hercules, CA) korištenjem iQ Mix ( Ibid.
). Pedeset ciklusa PCR amplifikacije sa 50 ng bisulfita tretirane genomske DNA su izvedeni u triplikatu, u skladu s uputama proizvođača. Duplex PCR s β-aktina (ACTB) primera i proba sekvenci koji ne sadrže nikakve CpGs je provedena za normalizaciju. Na primer, sonda sekvence korištene su kako je ranije [24] objavljena. Normalizirana metilacije vrijednost (NMV) definirana je na sljedeći način: NMV = ( CLDN11-S pregled / CLDN11-FM pregled) /( ACTB-S pregled / ACTB -FM pregled) * 100, gdje je CLDN11-s pregled i CLDN11-FM
predstavljaju CLDN11 pregled razina metilacije u uzorku i potpuno metilni DNA, respektivno, dok ACTB-s pregled i ACTB-FM
odgovaraju P-aktin Netlogu u uzorku i potpuno metilnim DNA, respektivno. Cijelog genoma umnožena DNA (WGA) je korišten kao unmethylated negativna kontrola. Pregled

Kvantitativna reverznom transkripcijom PCR analiza pregled

CLDN11 pregled RT-PCR produkt amplifikacije je osmišljen kako bi se preklapaju intron-egzonske granice u svrhu uključuju genomske DNA ( g pregled DNA) pojačanje. Sekvencijama su kako je objavljeno ranije [18]. Jedan korak QRT-PCR kao što je prethodno opisano [24] pomoću Quantitect SYBRA RT-PCR kit (QIAGEN, Valencia, CA), u skladu s uputama proizvođača. CLDN11 pregled, izraz lica bio normaliziran na P pregled aktin izražavanja. Ukupna RNA iz HFE145 stanica je korišten za određivanje standardne krivulje. ( CLDN11-S pregled / CLDN11-C pregled) /( ACTB-S pregled / ACTB-C pregled), gdje je CLDN11- S pregled i CLDN11-C pregled predstavljati CLDN11 pregled razine ekspresije mRNA u uzorak za ispitivanje i kontrolu mRNA, odnosno, dok je ACTB-S
i ACTB -C pregled odgovaraju P-aktin
razini izražaja ispitni uzorak i kontrole mRNA, respektivno.

5-aza-2'-deoksicitidin (5-aza-DC) liječenje pregled

AGS je GC stanična linija manifestira Hipermetilacija na CLDN11 pregled promotora u suradnji s odsutnom CLDN11 pregled mRNA ekspresije. 5-aza-2'-deoxycitidine (5-aza-dC) tretiranje stanica je izvedena kao što je ranije opisano [24]. Ukratko, stanična linija GC AGS (ATCC kataloški broj CRL-1739.) zasijana gustoćom od 2 x 10 ^{5 stanica /ml u T-75 tikvici. Dvadeset i četiri sata kasnije, stanice su tretirane s 1 uM 5-aza-dc 72 sata. Medij koji sadrži 5-aza-DC je zamijenjen sa svježe pripremljenim mediju svakih 24 sati. Stanice su zatim sakupljene na ukupnoj RNA ekstrakciju. Ukupne RNA iz AGS stanica prije i nakon 5-aza-DC liječenja bili su podvrgnuti kvantitativnoj realnom vremenu RT-PCR analize. Pregled}

Mali ometa RNA obaranje Eksperimenti pregled

CLDN11 pregled specifična siRNA oligonukleotidima su kupljeni od Ambion, Inc (Austin, TX). Stanična linija HFE145, što je CLDN11 pregled pozitivan, izabran je za proučavanje utjecaja claudin-11 obaranje na migraciju i invaziju svojstva stanica želuca. Eksperimenti su provedeni kao što je prethodno opisano (Agarwal et al. Pregled, 2005). Stanice uzgojene u ploče sa 6 jažica su transficirane siRNA parova pomoću lipofektamina 2000 (Invitrogen), u skladu s uputama proizvođača. Nacrti transfekcije i nespecifični siRNA duplekse, korišteni su kao negativne kontrole. Stanice su tretirane 48 do 72 sati, kako bi se omogućilo maksimalno obaranje, nakon čega su bilo bere za Western blot analize ili koristiti za migracije i pokusima invazije. Pregled

Western blot analiza Claudin-11 u želučanom staničnim linijama

Konfluentne kulture stanica su isprane sa HBSS (Invitrogen) i staničnom lizatu su napravljene pomoću pufera za lizu: 62.5 mmol /L Tris-HCl (pH 6,8), 10% glicerola, te 2% SDS. Koncentracija proteina je određena pomoću bicinkroniničnoj kiselini (BCA) assay kit (Pierce, Rockford, IL). Dvadeset mikrograma ukupnih proteina su odijeljeni od 10% do 20% SDS-PAGE na tris-glicin gelu (Invitrogen) i prenese u polivinilidenfluorid membrane (Millipore Corp, Bedford, MA). Membrane su blokirane s 5% nemasnim suhim mlijekom, isprana u TBST puferom i inkubiraju s anti-claudin-11 antitijela (Zymed, San Francisco, CA). Blotovi su zatim isprane i inkubirane u peršin peroksidazu- konjugiranih sekundarnih antitijela (anti-zečjim IgG: 1:10,000; Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ). Za detekciju, kemiluminiscencija se provodi korištenjem hemiluminiscencija kita (Amersham Pharmacia Biotech). Pregled

Cell invazije i migracije test pregled

invazivnost siRNA-transficiranim stanicama određena Matrigelom obložene invazijskoj komori umetaka (24-i-format s 8-ĩm pore, BD Biosciences) pomoću modificiranog Boyden komore testa [25]. Stanice su kultivirane do približno 80% konfluencije i izgladnjelih preko noći. Na dan ispitivanja, stanice su tripsinizirane i izvediv stanice su izbrojane. Otprilike 50,000 stanica su stavljene na vrh svakog od svakog filtera u mediju bez seruma. Jednaki volumen istog medija koji sadržava 20% FCS se stavi u donju komoru ( tj. Pregled je daleko ispod filtra) djelovati kao kemoatraktant. Pokusne pločice se inkubiraju na 37 ° C, tijekom do 48 sati. Stanice koje nisu migrirale ili napadaju kroz pore Transwell umecima ručno uklonjene pamučnom krpom. Stanice prisutni na dnu membrane su fiksirani u hladnim metanolom tijekom 10 min, a zatim obojeni sa 0,01% kristalno ljubičastog u 20% -tnom etanolu. Nakon 10 minuta inkubacije, filteri su temeljito ispere vodom i suspendira u 200 uL 5% octene kiseline i 5% metanola. Kolorimetrijska očitanje na OD _{595. Eksperimenti su ponovljeni najmanje tri puta, s triplikatu u svakom mjerenju. Za procjenu migracije stanica, testovi su provedeni u biti kako je gore navedeno, osim što stanice su stavljene na vrh nezaštićenih (Matrigel-free) umetaka. Pregled}

Statistička analiza

Statističke analize su provedene korištenjem Studentovog t -test (SPSS, verzija 16), s p pregled. < 0,05 smatrala se statistički značajna pregled

Rezultati i rasprava pregled

prvi put smo testirali našu hipotezu da je CLDN11 pregled promotor hypermethylated i da je to Hipermetilacija obrnuto srazmjerna CLDN11 pregled mRNA ekspresije u osnovne GC tkiva. Paru primarni želučani zdravih i tumorskih tkiva se skupljaju u Hopkins bolnici Johns (JHH). Uzorci su dobiveni neposredno nakon resekcije te su brzo smrznuti do upotrebe. Samo predmeti dobiveni informiranog pristanka je odobrio Institutional Review Board (IRB) su uključene u ovaj projekt. Genomske DNA su dobivene od 36 kliničkih uzoraka, koji se sastoji 18 GC i 18 podudarne noncancerous želučane sluznice (NS) tkiva. CLDN11 pregled razine promotor metilacije u ovim uzorcima analizirani su pomoću kvantitativne realnom vremenu metilacija specifičan PCR (qMSP). Slika 1A prikazuje normalizirani metilacija vrijednost (NMV), tj. Pregled, omjer metiliranog vrijednosti CLDN11 pregled promotorske regije u svaki uzorak u potpuno metiliranog kontrolne DNK. CLDN11 pregled NM Vs Netlogu bila je značajno viša u GC primjeraka nego u njihove odgovarajućih NS tkiva ( P izvoznici < 0,001). Kako procijeniti je li CLDN11 pregled promotor Hipermetilacija u GCS je bio povezan s odsutnost CLDN11 pregled izražavanja, CLDN11 pregled količine bile su izmjerene pomoću kvantitativne stvarnom vremenu (QRT-PCR) u RNA izvađeni iz 36 primjeraka koji se koriste za metilacije analize. Kao što je pokazano na slici 1B, normalizirane izraz vrijednosti (NEVs) od CLDN11 pregled u GC uzoraka bile su značajno niže nego u uparenih uzoraka NS ( P izvoznici < 0,001). Ovi podaci utvrdi da CLDN11 pregled promotor Hipermetilacija korelaciji sa smanjenim ili prigušivačem CLDN11 pregled mRNA ekspresije u osnovnoj GCS.

Dalje, mi ocjenjuje CLDN11 pregled promotor metilacije a izraz u staničnim linijama želuca. Besmrtne ljudske normalne želučani epitelne stanice (HFE145) i GC stanične linije AGS, SIIA, MKN28, KATOIII i SNU-1 su proučavali. Svi GC ispitanih staničnih linija (AGS, SIIA, MKN28, KATOIII i SNU-1) pokazao promotor Hipermetilacija, dok ne metilacije zabilježena je u besmrtnih normalnim HFE145 stanica (Slika 2a). CLDN11 pregled razine mRNA određene su pomoću QRT-PCR na RNA se pročisti iz staničnih linija, a claudin-11 ekspresija proteina je analiziran pomoću Western blot-a. Kao što je prikazano na slici 2B, sve 5 linija raka ne pokazuje mjerljivu izražavanje CLDN11 pregled mRNA ili proteina, dok HFE145 stanice očituje visokim CLDN11 pregled razine ekspresije. Ovaj nalaz utvrđuje da CLDN11 pregled je koordinirano hypermethylated i regulirani u GC stanične linije u odnosu na normalne želuca epitelnih stanica (NGECs). Pregled

Kako bi dodatno potvrdili odsutnost CLDN11 pregled izražavanja Hipermetilacija, tretira se na GC stanične linije AGS s demethylating sredstva, 5-aza-2-deoksicitidin (5-aza-dC, 1 uM), za različite vremenske intervale. Ukupno RNA izvađeni prije vs.
Nakon liječenja bili su podvrgnuti QRT-PCR za CLDN11 pregled. Kao što se vidi na slici 3, u svakom trenutku, CLDN11 pregled mRNA postala ponovno izrazio nakon tretmana s 5-aza-DC, potvrđujući da je CLDN11 pregled se prigušuje promotora Hipermetilacija u AGS . GC stanice pregled

Članovi claudin obitelji proteina su uključeni u regulaciji stanične adhezije, invazije i migraciju stanica raka [25] - [27]. Stoga, sljedeći istraživali da li CLDN11 pregled utjecaja pokretljivost stanica ili invazivnosti. HFE145 stanice, koje izražavaju izobilju CLDN11 pregled, izabrani su za proučavanje učinaka CLDN11 pregled, obaranje na invazivne i migracijskih svojstava želučanog epitela. Prolazni siRNA transfekcije provedene su pomoću CLDN11-
specifične siRNA dupleksa. Transfekciju CLDN11 pregled specifičnim siRNA duplekse učinkovito potisnuti claudin-11 proteina nivoi prema > 90%, dok je ekspresija je ostala nepromijenjena na mock- ili kontrolnim stanicama siRNA liječenih (slika 4A). Testovi stanične pokretljivosti i invazija su provedena na siRNA transfektirane stanice primjenom modificirane sustav Boyden komore testu [25]. Zanimljivo, kao što je prikazano na slikama 4B i 4C, inhibicije CLDN11 pregled ekspresija u stanicama HFE145 značajno povećao selica i invazivne potencijala tih stanica, respektivno. Pregled

Trenutni studija na taj način potvrđuje hipotezu da CLDN11 pregled, široka čvorišta protein, je ušutkan u GC preko promotora Hipermetilacija, a ti podaci podupiru uključivanje CLDN11
u kontroli GC invazije stanice i migracije. pregled

Promotor Hipermetilacija je poznato da je povezan s transkripcije odsutnost određenih gena. DNA metilacije može ometati vezivanje transkripcijskih faktora čije vezanje stranice sadrže CpG dinukleotida. Korištenje TFSEARCH softverski program, skeniraju se CLDN11 pregled slijed naći će se hypermethylated u želučanim tkiva raka i staničnim linijama, tj pregled., The qMSP produkt amplifikacije (-104 do četiri baze u odnosu na transkripcijski startno mjesto za CLDN11 pregled). Ovo skeniranje identificirati pretpostavljena mjesta za vezanje SP1 i Gata-1 i Gata-2. Prethodne studije su pokazale da Hipermetilacija od promotora DNA doprinosi odsutnost CLDN3 pregled i CLDN4 pregled u staničnim linijama jajnika, djelomično preko
metilacije-induciranog poremećaja vezanja SP1 za njihov srodan veznog mjesta (22, 23). Osim toga, članovi obitelji Gata su pokazala da su pozitivni regulatori CLDN11 pregled transkripcija [28]. Daljnje studije su sada opravdano procijeniti da li Hipermetilacija od tih stranica ometa vezanje transkripcijskih faktora, te kako se takav poremećaj može utjecati na CLDN11 pregled transkripciju gena. Pregled

Stanice tumora obično pokazuju strukturne i funkcionalne nedostatke u TJ [17]. Ovi nedostaci su povezane sa gubitkom polariteta i diferencijacije. Još jedna važna poveznica između TJ i raka je gubitak TJ integriteta, a kao posljedica propuštanja ili prijevoz pro-tumorskih tvari (kao što su faktori rasta ili hranjivih tvari) u razvoj stanica tumora primordia, promovira rast tumora [29]. Osim toga, gubitak polariteta, diferencijaciju i adhezivnih svojstava povezanih s oštećenjem TJ funkcija u raku mogu biti kritični za dobivanje metastatske fenotip [30]. Studije sugeriraju da anomalije u TJ-povezanih proteina može predstavljati prijelaz epitela-mezenhimalnih (EMT), čime se mijenjaju invazivnost i pokretljivost stanica karcinoma. Pregled

modulacija ekspresije TJ-povezanih proteina, osobito claudin proteina, imaju Pokazalo se u nekoliko vrsta raka. Nedavne studije kod nas i drugi su pokazali promjene u claudin regulacije proteina u različitim epitelnih karcinoma [18]. Članovi obitelji gena claudin izraženi na način vrlo tkivno specifični, te vrlo razvojnom stadiju specifične,. Osim toga, ovisno o tipu karcinoma, ekspresija claudin proteina može biti upregulated i regulirani u stanicama karcinoma. Na primjer, nekoliko claudin proteini reguliran u debelog crijeva, jajnika, gušterače i prostate, a neki regulirani na rak dojke i rak glave i vrata [16], [18] pregled

Istraživanja su ranije izvijestili promjene u ekspresiji profili članova claudin obitelji da je povezan s GC. Serijski analiza ekspresije gena (kadulja) identificirao CLDN18 pregled gen kao regulirani u GCS posjeduju crijevne fenotip [31]. CLDN23 pregled gen također regulirani u intestinalni tipa GCS [32]. S druge strane, Cunningham i sur.
Izvijestio CLDN4 pregled, izraz koji se povećao u intestinalne metaplazije i želučanog epitela displazije, identificira taj gen kao pokazatelj GC prekursora lezija [33]. U trenutnoj studiji, pronašli smo CLDN11 pregled, izraz koji se regulirani ili ušutkani u GC preko
Hipermetilacija njegove promotorske regije. Osim toga, otkrili smo da za razliku od CLDN18 pregled i CLDN23 pregled, CLDN11 pregled ekspresija regulirani primjercima GC pacijenata, kao iu staničnim linijama, bez obzira na difuznu vs .
crijevne podvrstu. pregled

Claudin-11, također poznat kao oligodendrocitne specifičnih proteina, prvi put identificiran se specifično eksprimiraju u čvrsti spoj nitima oligodendrocita u mozgu i u Sertolijevim stanicama štakora i miševa [ ,,,0],34], [35]. Gubitak claudin-11 izražavanja, što dovodi do narušavanja TJ barijere, povezana s neurološkim i reproduktivnog deficita [36]. Nedavna studija izvijestio ekspresiju i mislocalization CLDN11 pregled iz krvi testisa barijera u Sertolijeve stanice biti povezan s testisa intraepitelne neoplazije kod muškaraca [37]. Podaci u istraživanju utvrdi da CLDN11 pregled izražava se u normalnim želučanog tkiva i ovjekovječio NGECs. Međutim, njegova kompletna funkcije u normalnom želudac, kao i u želučani karcinogeneze ostaju nejasni. Pregled

U pokušaju da istražuje moguću uključenost CLDN11 pregled u GC, proučavali smo fenotipske promjene povezane s odsutnost CLDN11 pregled izraz u CLDN11-
izražavaju želučanog epitela (HFE145). Vrlo zanimljivo, siRNA posredovane obaranje CLDN11 pregled rezultiralo povećanjem pokretljivosti stanice i invaziju. Pregled

Prethodne studije su izvijestili raka specifične fenotipske promjene biti povezane s modulacijama u claudin izražavanja u različitim vrstama raka , Prekomjerna ekspresija claudin-3 i claudin-4 proteina u jajnicima staničnim linijama karcinoma rezultira povećanom invazije ovim stanicama [25]. U raka debelog crijeva, povećana ekspresija claudin-1 je bio prijavljen, a promjene u claudin-1 ekspresije vrše značajan utjecaj na rast ksenografta tumora i metastaza u atimičnih golih miševa [27]. S druge strane, claudin-7 regulacija na rak dojke je povezana s povećanom staničnom discohesion i sposobnost stanica raka dojke za širenje [19]. Osim toga, pokusi na staničnim linijama gušterače pokazala je da ekspresija claudin-4 dovodi do smanjene invazivnosti tumorogenosti i metastatskog potencijala tih stanica [38]. Razlozi za ove razlike u snazi ​​su trenutno nejasna, ali se mogu odnositi na tkivno specifične razlike u claudin funkciji ili čak do varijacije u odgovoru različitih staničnih linija. Jasno je da članovi claudin obitelji se zna da se izražava na način tkivno specifični i mogu ostvariti različita efekte. Pregled

Iako je u posljednjih nekoliko godina postalo je jasno da je TJ-a TJ-povezane proteini imaju opsežan i raznolik funkcionalna i fiziološke aktivnosti u normalnim i kancerogenih stanja, molekularni mehanizmi u podlozi ove aktivnosti ostaju nejasni. TJ su sofisticirani međustaničnih uređaji koji mogu regrutiranje signalnih proteina, čime reguliraju različite stanične procese uključujući i stanični rast, diferencijaciju i tumorigenezu [39], [40]. Claudin proteina direktno povezati s diskretnim putevima prijenosa signala interakcijom sa signalnim molekulama, kao što je atipični protein kinaze C i p proteina, kao i s drugim proteinima domenu PDZ tvari. Kod raka jajnika, claudins mijenjati invazija tumora reguliranjem MMP aktivnost [25]. Pregled

Ukratko, podaci iz trenutne studije utvrditi CLDN11 pregled kao metu epigenetičke modifikacije, kao obećavajući biomarker za rak želuca rano otkrivanje, dijagnostiku i terapiju. Ovi rezultati također ukazuju na uključenost CLDN11 pregled regulacija u karcinogeneze preko
promicanju stanične invazije i pokretljivosti. Mehanizmi za ovaj fenomen predmet su daljnje istrage. Pregled

Izvori pregled

Zahvaljujemo Dr. Duane T Smoot za njegovu velikodušnu daru HFE145 stanica. Pregled

• PloS Genetics: Mir-218 Sprječava invazije i metastaziranja raka želuca ciljanjem Robo1 Receptor
• PloS Genetics: Onkogeni stazu Kombinacije predvidjeti kliničkom prognozom u želučanom Cancer