PLoS ONE: Aberantna CCR4 Expression je uključen u tumorskoj invaziji limfnog čvora-negativnih ljudskih Želučani Cancer

Sažetak pregled

Cellular kemotaksije je najpoznatiji funkcija kemokin receptora koji su usko povezani s tumorskih metastaza. U stvari, pozitivni izraz kemokinskih receptora mogu također biti identificirani i kod nekih pacijenata bez metastatskih tumora, dok je klinički značaj ovih podataka nije u potpunosti uspostavljen. Naša istraživanja su dizajnirani kako bi se pojasnile profile ekspresije CCR4 i istraživati ​​svoju potencijalnu ulogu u histološki čvor-negativno (PN0) karcinoma želuca (GC). Imunohistokemija (IHH) ili immunohistofluorescence (IHF) analiza je izvršena na uzorcima koji su dobiveni od bolesnika s 108 PN0 GC. otkrili smo da CCR4 bilo aberantno overekspresija inpN0 GC tkiva, s različitim putevima ekspresije na tumorske stanice i da su povezane s T-faze ( P pregled = 0,002). Matrigelovu in vitro pregled Test invazije pokazala da prekomjerna ekspresija CCR4 u staničnim linijama GC značajno poboljšana u invazivni kapacitet ovih stanica. Rezultati u realnom vremenu RT-PCR i gelatinzymography pokazali su značajno povećanje u matriks metaloproteinaze (MMP) -9 izazvanoj sa prisilnim ekspresijom CCR4 u staničnim linijama GC. Naši podaci ukazuju na to da je nenormalna CCR4 izraz uključen u tumorske invazije PN0 GC, a ubjedljivo, antagonisti CCR4 mogu biti korisne kandidate za kontrolu rane događaje u progresiji tumora pregled

Izvor:. Yang Y, Du L, Yang X, Qu A, Zhang X, Zhou C, et al. (2015) Aberantna CCR4 Expression je uključen u tumorskoj invaziji limfnog čvora-negativnih ljudskih karcinoma želuca. PLoS ONE 10 (3): e0120059. doi: 10,1371 /journal.pone.0120059 pregled

Akademska Urednik: Chih-Hsin Tang Kina Medicinski fakultet Tajvan pregled

Primljeno: 29. rujna 2014; Prihvaćeno: 3. veljače 2015; Objavljeno: 19. ožujka 2015 pregled

Copyright: © 2015 Yang i sur. Ovo je otvoreno pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Podaci Dostupnost: Autori potvrđuju da su njihovi podaci u rukopisu i trenutne pratećeg informacijskog datoteke pregled

Financiranje:. Ova studija je podržan od strane Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine (Grant br 81271916 i 81301506), u Istraživački fond za doktorskog programa Visoko obrazovanje u Kini (br 20120131110055), Nezavisni inovacije zaklada Sveučilišta Shandong (IIFSDU, 2012TS174), Shandong tehnološki projekt za razvoj (STDP, 2013GSF11859), Natural Science Foundation Shandong (Grant br ZR2013HM104) i Nacionalni ključ Klinička Medicinski Specijaliteti zaklada pregled

suprotstavljenih interesa. autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Kao i većina vrsta raka, rak želuca (GC) je visoko. agresivni zloćudni tumor koji ima tendenciju da napadnu okolnog tkiva i metastaziraju u udaljene organe. Iako bolesnici s čvor-negativnim rakom želuca imaju bolje rezultate od onih s metastazama u limfnim čvorovima [1, 2], od kojih su neki još uvijek patio od lokalnih recidiva ili udaljenih metastaza nakon kurativne resekcije [3-5]. Identificiranje učinkovite faktora ili ključne molekule povezivanje s napredovanjem bolesti u stupili pacijenata oboljelih od raka želuca čvor-negativnim potrebno je, s obzirom da su ti bolesnici mogu imati koristi od adjuvantne terapije. Pregled

kemotaksije igra ključnu ulogu u metastaziranja tumora, usmjeravanje motilitet metastatske stanice kroz gradijentima kemoatraktantima. Značajno je da se kemokin receptori posreduju metastaza organ-specifična tumora u interakciji sa svojim podudarnim kemokina na ciljnim organima [6]. Želučani stanice raka mogu izraziti različite kemokinskih receptora, poput kemokina receptor 4 (CXCR4) i kemokina receptora 7 (CCR7), i asimilirati te molekule za metastaziranje [7-12]. Ostale uloge kemokina receptore u progresiji karcinoma osim kemotaksije rijetko su otkrivene. CCR4, C-C tipa receptora kemokina, već je usmjerena na svoje biološke funkcije u imunopatogenetske hematoloških tumora [13]. Do danas, relativno malo pažnje posvećuje ulozi CCR4 u promicanju metastaziranje nekih solidnih tumora, uključujući rak želuca [14-17]. Naša grupa je pokazala da su limfociti bogate GCS imaju tendenciju da se češće pozitivno za CCR4 i našli novi ulogu CCR4 u tumora izazvanog imunosupresije [18], što ukazuje na različite profile ekspresije CCR4 u GC tkiva i multifunkcionalne uloge ove molekule u GC napredovanje. pregled

to je dobro poznato da je invazija je prvi korak koji dovodi do metastaza raka. Dokazi pokazuju da su neki kemokinski receptori, kao što su CXCR4 [19] i [20] CCR7, potiču kronična limfocitna leukemija invaziju stanica B-stanica kroz doreguliranje MMP-9. Nedavno, Yu i sur. su pokazali da CXCR4 promovirati migraciju i invaziju putem induciranje ekspresije MMP-9 i MMP-13, u oralnoj karcinom skvamoznih stanica [21]. Li i kolege otkrili su da CCR7 je sudjelovao u invaziji ljudskog raka debelog crijeva putem ranijim koracima MMP-9 [22]. Nije jasno, međutim, da li CCR4 također može promovirati invaziju stanica raka. Pregled

S obzirom na široko raspodjela kemokinskih receptora unutar tumora andtheir potencijalne uloge u tumorske invazije i metastaziranja smo pretpostavili da PN0 pacijenata oboljelih od raka želuca nosi određenu kemokina receptori mogu biti više vjerojatno da će doživjeti daljnje napredovanje. Da bi testirali hipotezu, istražuju se profile ekspresije CCR4 u želučanim stanica karcinoma PN0 bolesnika i njegovu ulogu u invaziji želuca stanica karcinoma. Pregled

Materijali i metode pregled

Pacijenti i primjerci pregled

uzorci tkiva dobiveni su od 108 bolesnika (75 muškaraca i 33 žena, u dobi od 35-71 godina, prosječne dobi 62 godina) s PN0 raka želuca prolaze kroz ljekovito resekciju primarnog tumora u Qilu bolnici Sveučilišta Shandong (Jinan, Kina). Koristili smo prethodno uskladiti susjedne normalne želuca tkiva i tkiva od 56 pacijenata želučana displazija (36 muškaraca i 20 žena, u dobi od 35-68 godina, prosječne dobi 48 godina) kao kontrola. Svi tireoidektomija dijagnosticira i maligni klasifikacije određena su viši patologa u vrijeme postavljanja dijagnoze, prema Svjetskoj zdravstvenoj organizaciji Međunarodne histološke klasifikacije tumora [23] i postoperativnog patološki inscenacije se utvrđuje na temelju međunarodnog raka unija protiv (UICC) [24 ]. Istraživanje je odobrilo Etičko povjerenstvo Qilu bolnice, a također je dobiven pismeni informirani pristanak od svih pacijenata. Pregled

Imunohistokem i immunohistofluorescence pregled

IHC ili IHF je provedeno na parafinskim rezovima pomoću protutijela protiv čovjeka CCR4 (LS-A351, LifeSpanBioSciences, Seattle, WA, USA) i anti-pan keratin (CK) protutijela (ab80826; abcam, Cambridge, MA, USA), prema uputama koje svakog proizvođača. Fluorescentne antitijela uključuju koza anti-zec TRITC-konjugirana protutijela (E031320; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kina), anti-mišjim FITC-konjugirana protutijela (E0312400; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kina). Uzorci su vizualizirani i promatraju pod fluorescentnim mikroskopom (IX81, Olympus, Tokyo, Japan), a rezultati IHC su analizirani kako je ranije izvijestili [18]

Kultura Cell pregled

ljudsko želuca. stanične linije raka SGC-7901 i BGC-823 su kupljeni u Culture Collection kineske akademije znanosti (Shanghai, Kina) i održavani u RPMI-1640 (HvClone, Logan, UT, USA), uz dodatak 10% FBS (Gibco, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) na 37 ℃ u vlažnoj atmosferi 5% CO _{2. pregled}

Prolazna prekomjerna ekspresija CCR4 u SGC-7901 i BGC-823 stanicama pregled

Prijelazno transfekcija plazmida EGFP-CCR4 (CCR4) ili EGFP vektora ekspresije (tobožnji) u staničnim linijama želuca provedena je pomoću Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) kao što je prethodno opisano [18]. A efikasnosti transfekcije su određene fluorescentnim mikroskopom, u realnom vremenu reverzne transkripcije-lančana reakcija polimeraze (RT-PCR) i protočne citometrije (FCM), respektivno. Pregled

Kvantifikacija mRNA pomoću RT-PCR i stvarnom vremenu RT -PCR pregled

Ukupna RNA je izolirana iz stanice, je pomoću Trizol reagensa (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) i reverzne transkriptaze reakcije su provedene s kompleta prema uputama proizvođača (Fermantas, St. Leon-Rot, Njemačka ). Za RT-PCR korišteni su primeri i PCR uvjeti za amplifikaciju CCR4, kako je prethodno opisano [25]. I humani gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) (prednji primer, 5'-GGTGGTCTC-CTCTGACTTCAACAG-3 'reverzni primer, 5'-GTTGTTGTAGCCA-AATTCGTTGT-3') bio je usedas interni standard. Za RT-PCR primeri za CCR4, MMP-9 i GAPDH i uvjetima amplifikacije su korišteni kao što je prethodno opisano [18, 25, 26]. Pregled

FCM analiza pregled

Stanice su sakupljene inkubiraju s fikoeritrin (PE), koje je konjugirano anti-CCR4 monoklonskih protutijela (FAB1567P, R &D Systems) ili sa IgG2b-PE izotipska kontrola miša (IC0041P, R &D Systems) u skladu s uputama proizvođača. FCM analiza je tada provedena FACsCalibur (Becton Dickinson, Heidelberg, Njemačka) za analizu ekspresije CCR4 o SGC-7901 i BGC-823 stanicama, respektivno. Pregled

Matrigelove invazije pregled

in vitro pregled invazije ispitivanje se provodi korištenjem umeće 24 stanična kultura sadrži 8 uM membrane (BD Biosciences, San Jose, CA). Svaki membrane je obložena sa Matrigel (30 ug, Becton Dickinson, San Jose, CA) i inkubirane 30 minuta. Zatim, 0,2 ml transfektirana ili roditeljskog GC stanice su ponovno suspendirane u RPMI-1640 bez seruma u koncentraciji od 1,5 x 10 ^{5 /ml i stavi u gornjoj komori i 0,6 ml RPMI-1640 koji je sadržavao 10% FBS je bila doda bazolateralne komoru. Nakon 24 sata inkubacije na 37 ℃ s 5% CO _{2, stanice su fiksirane i obojene s 0.2% eozinska Y. broj stanica koje su migrirale na bazalnoj strani membrane se kvantificira pod svjetlosnim mikroskopom na 200 × povećanje, pregled}}

Stanična održivost test pregled

stanice su nasađene u ploče s 96 jažica na 5 × 10 ^{3 stanica /jažici i uzgajani naznačenim vremenskim točkama. Vijabilnost je procijenjena pomoću CCK8 (Beyotime, Haimen, Kina) u skladu s uputama proizvođača. Apsorbancija je mjerena na 450 nm valne duljine. Svaki vremenska točka je ponovljen tri jamice i pokus je independentlyperformed tri puta. Pregled}

želatinske zimografije pregled

Supernatanti su skupljeni su centrifugiranjem nakon 24 h nakon transfekcije i razdvojeni na SDS-PAGE gela koji sadrži 0,1% (w /v), želatina. Nakon elektroforeze, proteini renaturirani su ispiranjem gela dva puta tijekom 40 min u 2,5% Triton X-100 nakon čega slijedi inkubacija u trajanju od 18 sati na 37 ° C u smjesi koja sadrži Tris-HCl 50 mM (pH 7.6), CaClz _{2 5mMm i NaCl 200 mm. Zatim gel kratko ispran u destiliranoj vodi i zatim su obojene 0,25% Coomassie brilliant blue R250 /45% metanol /10% octene kiseline, a zatim 4 h obezbojena u 45% metanolu, 8% octene kiseline. Gelovi su skenirani i fotografirali s Kodark sustavima. Pregled}

Statistička analiza pregled

Podaci iz najmanje tri neovisna pokusa su analizirani i izraženi kao srednja vrijednost ± SD. Odnos između izražavanja CCR4 i T-fazi analiziran je hi-kvadrat test. Ostali podaci su analizirani Student t-testom ili ANOVA gdje je to prikladno. P pregled vrijednost manja od 0,05 smatrala se statistički značajna. Sve analize su učinili pomoću statističkog programa (verzija 13.0, SPSS Inc., Chicago, IL). Pregled

Rezultati

Prekomjerna ekspresija CCR4 s jasnim izrazom uzoraka u PN0 početkom tkivu karcinoma želuca

CCR4 ekspresija u stanicama raka otkriven je na raznim razinama. Među 108 parafin-ugrađen tkiva, 29 slučajeva (26,9%) su pokazali negativan izraz (-), 30 slučajeva (27,8%) pokazali su slabu ekspresiju (+), 35 slučajeva (32,4%) imali su srednje izraza (++), a 14 slučajeva (13,0%) su pokazali snažnu ekspresiju (+++) (Sl. 1A-D). Sve susjedne normalne želuca tkiva pokazala je negativan bojanje CCR4, a samo 2 (3,6%) slučajeva želučane displazija pokazali slabu ekspresiju membranskog CCR4 (sl. 1 E i F). Pregled

I membrana i citoplazmi izraz CCR4 bili uočeno najčešće u dobro diferenciranih tumora gnijezda crijevne tipa, dok su manje diferencirane stanice liječi prikaz citoplazmatski uzorak CCR4 izražavanja u difuzni tip karcinoma želuca (Sl. 2). Zanimljiva pojava je da su stanice s vrlo invazivni potencijal, poput mišićne invazije, vaskularne penetracije i invazije živaca, također prikazan na citoplazmatski CCR4 izraz uzorak (sl. 3). Pregled

CCR4 prekomjerna ekspresija potiče želučane stanice raka invazija pregled

na tipičnim dijelovima, također je pokazalo da je razina ekspresije CCR4 obično povećava s dubinom tumorske invazije (Sl. 3). IHC Analiza je pokazao da prekomjerno izražavanje CCR4 pozitivno povezane s T stupnju ( P pregled = 0.002), vaskularne invazije ( P pregled = 0,001) i perineuralnu invazije (P = 0.002) u PN0 GC (tablica 1). pregled

Mi smo izvijestili da su razine CCR4 proteina bili su prilično niska u nekim želučanih staničnim linijama [18], i na taj način dobiti daljnji uvid u invaziju tumorskih CCR4 posredovane, nad- ekspresija CCR4 u staničnim linijama želučanim je izveden kao što je ranije opisano [18]. Visoke efikasnosti transfekcije su određeni u realnom vremenu RT-PCR, FCM i fluorescentnim mikroskopom, odnosno (Sl. 4A-C). EGFP je izražen u jezgre, citoplazme i membrane kontrolnih vektora stanice, koje su transfektirane s plazmidom mock; i fluorescentni fuzijski protein lokaliziran u citoplazmi i membrani CCR4 plazmida transfektiranim stanicama. Matrigelovu invaziju analiza pokazala je da je broj EGFP-CCR4 transfektirane želuca stanica raka koji prolaze kroz Matrigel bila je značajno viša od one lažno transfektirane želuca stanica raka (Sl. 4D). Test CCK8 pokazuju da prekomjerna ekspresija CCR4 nije imao učinka na proliferaciju želučane stanice raka (S1 sl). Pregled

CCR4 reguliran MMP-9 proizvodnja u želučanih stanica raka pregled

Kako bi se ispitala moguća mehanizma koji je fundamentalan CCR4 posredovanih tumora, ispitali smo učinak CCR4 na MMP-9 ekspresije i aktivnosti. RT-PCR analiza (Sl. 5A), pokazali su da EGFP-CCR4 transfektirane želučanih stanice raka izražava visoke razine MMP-9 u odnosu na mRNA lažno-transfektiranim stanicama nakon 24 h nakon transfekcije. Želatinske zimografije analiza (Sl. 5B) pokazala je da je izlučivanje i aktivnost MMP-9 značajno je povećana u supernatantima EGFP-CCR4 transficiranih stanica u usporedbi s lažno-transfektiranim stanicama na 48 sati nakon transfekcije, sa ili bez dodatka egzogeni CCL22. pregled

Rasprava pregled

međudjelovanju kemokinskih receptora stanica raka i njihovih podudaranja kemokina predstavljaju ključne korake u metastaza tumora. Međutim, rezultati naših trenutnih studyshowed da određeni broj pacijenata oboljelih od raka želuca, bez limfne metastaze su također bili pozitivni na CCR4 bojenja. Za razliku od većine prethodnih studija o funkcijama kemotaksije posredovan nekim kemokin receptora, ovo istraživanje otkriva roman, invazivno ponašanje od CCR4. Pregled

kemokinskih receptora pripadaju obitelji sa sedam transmembranskih G-protein receptore koji su membranski proteini, te funkcionalne posljedice aktivnosti kemokinskih receptora, za koje se vjeruje da se oslone na stimulaciju staničnih liganada [27]. Međutim, histoloških uzoraka iz ovog istraživanja pokazuju da su postojale različite ekspresije obrasce za CCR4. CCR4 u ne-maligne stanice pokazao negativno obojeni, sa samo slabim membranskog bojanja u želučana displazija lezija. Membrane i citoplazmatski izraz CCR4 najčešće se pojavila u umjerenim i dobro diferenciranih tumora gnijezda, a izraz u manje diferencirane stanice liječi biti ograničena prvenstveno u citoplazmu. I više intrigantno, kao što je prikazano na tipičnim dijelovima, tumorske stanice pokazuju visoku invazivnih kapaciteta, kao što su mišićne invazije, vaskularne penetracije i invazije živaca, često su pokazali povećanu citoplazmatski izraz CCR4. Naši podaci naznačeno usku povezanost između citoplazmatski CCR4 ekspresije i agresivno ponašanje želučane stanice raka. Ovaj nalaz je u suprotnosti sa zajedničkom pretpostavkom da je nužno potrebna, da izvanstanična domena kemokinski receptor, tumorskih metastaza kroz interakciju sa svojim ligandom. Sličan je fenomen zabilježen kod kemokinski receptor CXCR4, čija nuklearnu lokalizaciju je povezana s progresijom različitih tumora [28-30]. Ovi podaci indictate da su želučane stanice raka moglo upasti u blizini tkiva putem CCR4 u ligand neovisan način. Druga hipoteza je da je CCR4 internalizacija uzrokovana svoj ligand može predstavljati mehanizam koji je evoluirao u citoplazmatski CCR4 ekspresije. CCL22 je CCR4 ligand produkciji ljudskog tkiva raka želuca [31], je poznato da causeCCR4 internalizaciju od membrane u citoplazmu [32, 33], što upućuje na citoplazmatski bojenje se može prikazati aktiviranog signala nakon CCR4-CCL22 podvezivanja. Više studija je potrebno da bi se otkrilo točne mehanizme u pozadini tih abnormalnih obrazaca ekspresije receptora kemokina koji su uključeni u progresiji tumora. Osim toga, polako-pojačava ekspresiju CCR4 u premalignih tkiva, iako statistički neznatno veći nego kod tumora susjednih normalnim tkivima, sugerira da CCR4 također mogu sudjelovati u preneoplastic stupnjevima razvoja rane tumora. Pregled

u prethodnoj studija, otkrili smo da CCR4 je izraženo u GC tkivu, ali nismo pronašli značajne razlike između bolesnika sa i bez limfnih čvorova metastaza [18]. Stoga smo pretpostavili da su kemokinskih receptora može također igraju važnu ulogu u razvoju karcinoma i PN0 pacijenata. U ovom istraživanju, naši rezultati pokazuju pozitivnu korelaciju između ekspresije CCR4 i T-fazi, koji su bili u skladu s našim imunohistokemijske nalazima koji CCR4 izraz obično se povećavala kako je dubina invazije tumora napredovala. Učinak CCR4 o invaziji želučane stanice karcinoma djelomično je potvrdio transjažična invazije stanica testovima. Ovi testovi su provedeni pod uvjetima u kojima nije dodan ligand egzogeni CCR4 receptor. Bilo je moguće da mogu postojati različiti mehanizmi za reguliranje invaziju tumorskih stanica posredovano sa CCR4 u ligand neovisan način, u skladu s fenomenom citoplazmatski uzorkom CCR4 koja je u vezi s visoko invazivnog ponašanja tumorskih stanica u GC tkiva. Potvrdili smo da je prekomjerna ekspresija CCR4 je usko povezana s većim stupnjem tumora, što pokazuje da CCR4 prekomjerna ekspresija može se steći metastatski potencijal u GC stanicama i dalje promicati tumorski rast. Također smo pretpostavili da su autokrinc CCR4 ligandi također su bili uključeni u staničnoj pokretljivosti in vitro pregled. Koncentracije CCL22 u kulturnom staničnim linijama supernatant GC transfektiranih sa ili bez CCR4 bila prilično niska kao što smo ocijenili (podaci nisu prikazani). Međutim, mogućnost ne može isključiti da je autokrina ili parakrina proizvodnja CCL22 mogu doprinijeti invazije tumora putem CCL22 /CCR4 os in vivo pregled. CCL17 i CCL22 kao visoki afinitet CCR4 ligandi su proizvedeni pomoću GC i drugim tkivima raka. Posebno, CCL22, koji je proizveden, bilo stanica raka ili tumora povezana makrofaga, objavljeno je da se uključe u metastazi nekoliko vrsta raka [15-17]. To ukazuje na mogući autokrini /parakrinu petlje uključuje CCL22 i CCR4 između različitih tipova stanica. Pregled

MMP-2 i MMP-9 su najviše u pitanju i dobro karakterizirani MMPs s jakim proteolitičke aktivnosti u ekstracelularnog matriksa (ECM). Konzistentnost između realnom vremenu RT-PCR testovi i želatinske zimografije eksperimenata jasno pokazano da prekomjerna ekspresija CCR4 u stanicama raka želuca znatno poboljšana MMP-9 ekspresija i aktivnost. Ti eksperimenti nadalje istaknuo i pokazao svoju stvarnu ulogu u invaziji tumora pod određenim uvjetima, sa ili bez stimulacije egzogeni CCL22. Smatra se da je matrica MMP-9 degradira IV kolagen tipa koji je glavni sastavni dio bazalne membrane i povezana s karcinomom invaziju i metastaziranje stanica u bolesnika s rakom želuca [34]. Ovdje, pod uvjetom da nove tragove na podlozi mehanizam koji CCR4 mogli promovirati invazija želučano stanica raka po ranijim koracima MMP-9. Slična zapažanja također su napravljene s obzirom na invaziju tumorskih preko nekih kemokin receptora, kao što su CXCR4 i CCR7 [19, 20, 22]. I MMP-2, čija je struktura bila slična MMP-9, također je da je to povezano s rakom želuca [35]. Međutim, pronašli smo MMP-9, ali ne i MMP-2, bio je ključni molekula koja je uključena u invaziju tumorskih CCR4 posredovane, što može biti zbog različitih ko-regulatora, koji djeluje na CCR4 u različitim oblicima mikrookoliša. Iako MMP-2 u želučanih stanica raka CCR4 transfektirane također činilo da će biti veći nego u lažno transfektirane stanice, razlika je statistički neznačajan (podaci nisu prikazani). Sposobnost stanica za život analiza je pokazala da je prekomjerna ekspresija CCR4 nije imalo utjecaja na rast želučane stanice raka in vitro pregled, što je u skladu s prethodnim studijama koje su pokazale na CCR4 liganada nije mogao izazvati proliferaciju stanica [14], čime se izbjegava eventualno koje mogu utjecati na indeks invazija ili MMP-9 iznos. Ovi testovi su izvedeni sa i bez egzogenog CCL22, sa značajnim razlikama aktivnosti MMP-9 ekspresije između CCR4 i mock-transficiranim stanicama. Mi nagađaju o mogućim mehanizmima poboljšane MMP-9 ekspresiju CCR4-prekomjerne ekspresije može biti djelomično zbog autokrina ili parakrine ekspresije CCL22 in vivo pregled. Ipak drugi MMP koji bi mogli biti uključeni u ovaj proces i precizne signalni put još treba dodatno istražiti u budućnosti. Pregled

Na kraju, izvijestili smo prvi put da CCR4 je neprirodno prekomjerno izražen u PN0 raka želuca i moglo bi promovirati invazije tumora. Nadalje, naši podaci pokazuju da CCR4 izazvanu MMP-9 proizvodnja mogla barem djelomično temelj novog mehanizma za invaziju tumorskih CCR4 posredovane. Prema tome, antagonisti CCR4 mogu biti korisne kandidate za kontrolu rane događaje u progresiji tumora. Pregled

popratne podatke
S1 sl. Prekomjerna ekspresija CCR4 nije imalo utjecaja na rast želučane stanice raka In vitro pregled. Pregled, nakon transfekcije s CCR4 ili lažno plazmida i stimulacije sa ili bez egzogenog CCL22, SGC-7901 i BGC-823 stanice su reseeded u 96 jažica. Stanice vijabilnost je procijenjena CCK8 testom na naznačenim vremenskim točkama pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0120059.s001 pregled (TIF) pregled