PLoS One: Az aberráns CCR4 Expression részt vesz a tumor invázióban nyirokcsomó-negatív humán gyomorkarcinóma

absztrakt katalógusa

Cellular kemotaxis a legismertebb funkciója kemokinreceptorok, amelyek szorosan kötődnek a tumor metasztázis. Tény, hogy a pozitív kifejezése kemokinreceptorok is azonosítható még néhány beteg nem áttétes daganatok, míg a klinikai jelentősége az adatok még nem alakult ki teljesen. A vizsgálatok célja, hogy tisztázza a CCR4 expressziós profilok és tárja potenciális szerepét az szövettanilag nyirokcsomó-negatív (pN0) gyomorrák (GC). Immunhisztokémiai (IHC) vagy immunohistofluorescence (IHF) analízist végeztünk példányok nyert 108 betegek pN0 GC. Azt találtuk, hogy CCR4 volt kórosan overexpresszált inpN0 GC szövetekben, eltérő expressziós mintázatot a tumorsejteken, és van társítva a T-szakasz ( P
= 0,002). A Matrigel in vitro
inváziós vizsgálati eljárás kimutatta, hogy a túlzott expressziója CCR4 GC sejtvonalak jelentősen továbbfejlesztett invazív képességét ezen sejtek. Eredmények a real-time RT-PCR és gelatinzymography jelentős növekedést mutatott a mátrix metalloproteináz (MMP) -9 termelés által indukált erőltetett expressziója CCR4 GC sejtvonalakban. Adataink arra utalnak, hogy az aberrált CCR4 kifejezést játszanak a daganat invázió pN0 GC és elképzelhető, antagonisták CCR4 hasznosak lehetnek jelöltek szabályozására korai események tumor progresszióját. Katalógusa

Citation: Yang Y, Du L, Yang X, Qu A, Zhang X, Zhou C, et al. (2015) Az aberráns CCR4 expresszió játszanak a daganat invázió nyirokcsomó-negatív humán gyomorrákban. PLoS ONE 10 (3): e0120059. doi: 10,1371 /journal.pone.0120059 katalógusa

Akadémiai Kiadó: Chih-Hsin Tang, Kína Orvostudományi Egyetem, Tajvan katalógusa

Beérkezett: szeptember 29, 2014; Elfogadva: február 3, 2015; Megjelent: március 19, 2015 katalógusa

Copyright: © 2015 Yang et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra katalógusa

Az adatok elérhetősége: A szerzők megerősítik hogy az adatok a kézirat és a jelenlegi támogató információs fájl. katalógusa

Forrás: Ez a tanulmány által támogatott Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (Grant számú 81271916 és 81301506), Kutatási Alap a Doktori Program Felsőoktatási Kína (No. 20120131110055), Független innovációs Alapítvány Shandong Egyetem (IIFSDU, 2012TS174), a Shandong technológiai Fejlesztési Projekt (STDP, 2013GSF11859), a Természettudományi Alapítvány Shandong (Grant No. ZR2013HM104) és a Nemzeti Key Klinikai szakrendelés Alapítvány. katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. katalógusa

Bevezető katalógusa

Hasonló a legtöbb rák, gyomorrák (GC) egy rendkívül agresszív rosszindulatú daganat, amely hajlamos arra, hogy megtámadják a környező szöveteket és áttétet távoli szervekben. Bár nyirokcsomó-negatív gyomorrák jobb eredményeket, mint a nyirokcsomó metasztázisok [1, 2], akik közül néhányan még mindig szenvedett a helyi kiújulás, vagy távoli áttét után kuratív rezekció [3-5]. Azonosító hatékony faktorok vagy kulcsfontosságú molekulák tömörítő betegség progresszióját szakaszos nyirokcsomó-negatív gyomor rákos betegek szükséges, figyelembe véve, hogy ezek a betegek számára előnyös lehet az adjuváns terápiákat.

Kemotaxis kulcsszerepet játszik a tumor metasztázis, irányítja a motilitását metasztatikus sejtek révén színátmenetek kemoattraktánsok. Nevezetesen, a kemokin receptorok közvetítik szervspecifikus metasztázis tumorok által kölcsönhatásban áll a megfelelő kemokinekkel a célszervek [6]. Gyomorrák sejtek kifejezik a különböző kemokin receptorokat, mint például a kemokin receptor 4 (CXCR4) és kemokinreceptor 7 (CCR7), és a társ-választhatják ezeknek a molekuláknak a metasztázis [7-12]. Egyéb szerepei kemokinreceptorok a rák kifejlődésének kivéve kemotaxis Ritkán fedetlen. CCR4, a C-C típusú kemokin-receptor, korábban már összpontosított a biológiai funkcióját Immunopathogenesis hematológiai daganatok [13]. Eddig viszonylag kevés figyelmet fordítottak a szerepét CCR4 előmozdításában áttéte néhány szolid tumorok, beleértve a gyomor-rák [14-17]. A csoport kimutatta, hogy a limfocita-gazdag GC általában gyakrabban pozitív CCR4, és találtak egy újszerű szerepe CCR4 tumor-indukált immunszuppresszió [18], jelezve, különböző expressziós profiljait CCR4 GC szövetek és multifunkcionális szerepét ez a molekula GC progresszióját.

Köztudott, hogy invázió az első lépés, ami a rák metasztázis. Bizonyítékok azt mutatják, hogy néhány kemokin receptorok, mint például a CXCR4 [19] és CCR7 [20], elősegíti a B-sejt krónikus limfocitás leukémia sejtek invázióját keresztül up-regulációját az MMP-9. A közelmúltban, Yu és mtsai. azt mutatta, hogy a CXCR4 elősegítheti a sejtmigrációt és invázió keresztül expresszióját indukáljuk MMP-9 és MMP-13 orális laphámrák [21]. Li és munkatársai megállapították, hogy CCR7 részt a humán colon invázió keresztül túlszabályzását MMP-9 [22]. Nem világos azonban, hogy CCR4 is elősegítik a rákos sejtek invázióját.

Tekintettel a széles eloszlása ​​kemokinreceptorok belül tumorok andtheir potenciális szerepét a tumor invázió és metasztázis, feltételeztük, hogy pN0 gyomorrák hordozó betegek bizonyos kemokin receptorok lehetnek nagyobb valószínűséggel tapasztalnak a további fejlődésre. Annak tesztelésére, hipotézisünk, megvizsgáltuk a kifejezés profilok CCR4 gyomorrákban sejtjeiben pN0 betegek és szerepe a gyomorrák sejtek invázióját. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

A betegek és a példányok katalógusa

a szövettani mintákat nyert 108 beteg (75 férfi és 33 nő, idősebb 35-71 éves, átlagos életkor 62 év) pN0 gyomorrák alatt gyógyító eltávolítását a primer tumor Qilu Kórház Shandong Egyetem (Jinan, Kína). Mi fent használt párosított szomszédos normál gyomor szövetek és a szöveteket a 56 gyomor diszplázia beteg (36 férfi és 20 nő, idősebb 35-68 éves, átlagos életkor 48 év) kontrollként. Minden kórszövettani diagnózis és a rosszindulatú osztályozási határoztuk meg vezető patológusok idején diagnózis szerint az Egészségügyi Világszervezet Nemzetközi szövettani osztályozása Daganatok [23], és a posztoperatív patológiai staging alapján határoztuk meg a Nemzetközi Rákellenes Unió (UICC) [24 ]. A tanulmány által jóváhagyott Etikai Bizottsága Qilu Kórház, és írásos beleegyezését adta az összes beteg is kapunk. Katalógusa

immunhisztokémia és immunohistofluorescence katalógusa

IHC vagy IHF végeztünk paraffinos metszeteket elleni antitestek humán CCR4 (LS-A351; LifeSpanBioSciences, Seattle, WA, USA) és az Anti-pan Cytokeratin (CK) ellenanyag (ab80826; ABCAM, Cambridge, MA, USA), a következő utasítások szerint egyes gyártók. Fluoreszcens antitestek közé tartoznak kecske anti-nyúl TRITC-konjugált antitestekkel (E031320; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kína), kecske anti-egér FITC-konjugált antitestekkel (E0312400; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kína). A mintákat láthatóvá és a megfigyelt fluoreszcens mikroszkóp alatti (IX81; Olympus, Tokió, Japán), valamint az IHC eredményeket elemeztük, mint korábban jeleztük [18].

Sejtkultúra

Az emberi gyomor rákos sejtvonalak SGC-7901 és BGC-823 vásároltunk a Culture Collection a kínai Tudományos Akadémia (Shanghai, Kína) és RPMI-1640-ben (Hyclone, Logan, UT, USA), kiegészítve 10% FBS-sel (Gibco, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 37 ℃, nedvesített atmoszférában, 5% CO _2.

Tranziens túlzott expressziója CCR4 a SGC-7901 és BGC-823 sejtek

tranziens transzfekciója a plazmid EGFP-CCR4 (CCR4) vagy egy EGFP expressziós vektorba (MOCK) a gyomor-sejtvonalak alkalmazásával végeztük Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), az azt korábban jeleztük [18]. És a transzfekciós hatékonyságot úgy határoztuk meg, fluoreszcens mikroszkóppal, a valós idejű reverz transzkripciós polimeráz-láncreakció (RT-PCR) és áramlási citometriával (FCM), ill.

számszerűsítése mRNS RT-PCR és a valós idejű RT -PCR

Teljes RNS-t izoláltunk a sejtekből, TRIzol reagenssel (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) és a reverz transzkriptáz reakciókat végeztünk szerinti készlet a gyártó protokollja (Fermentas, St. Leon-Rot, Németország ). Az RT-PCR, a primerek és PCR körülmények amplifikálására CCR4 alkalmaztunk a korábban leírtak [25]. És az emberi gliceraldehid-3-foszfát-dehidrogenáz (GAPDH) (forward primer, 5'-GGTGGTCTC-CTCTGACTTCAACAG-3 '; reverz primer 5'-GTTGTTGTAGCCA-AATTCGTTGT-3') volt usedas belső standardként. A valós idejű RT-PCR-rel, primerként CCR4, MMP-9 és GAPDH és amplifikációs körülményeket alkalmaztuk, mint korábban jeleztük [18, 25, 26].

FCM analízis

A sejteket inkubáltuk egy fikoeritrin (PE) konjugált anti-CCR4 monoklonális antitest (FAB1567P, R &D Systems), vagy egy egér IgG2b-PE izotípus kontroll (IC0041P, R &D Systems) a gyártó utasításai szerint. FCM analízis ezután végezzük, egy FACSCalibur (Becton Dickinson, Heidelberg, Németország), hogy elemezzék CCR4 expresszió SGC-7901 és BGC-823 sejtek, ill.

Matrigel inváziós vizsgálatokban

in vitro
inváziós vizsgálati eljárás alkalmazásával hajtottuk végre 24 sejttenyészet-betétek, amely 8-um membránok (BD Biosciences, San Jose, CA). Mindegyik membránt bevonva Matrigel (30 ug, Becton-Dickinson, San Jose, CA), és inkubáltuk 30 percig. Ezután 0,2 ml transzfektált vagy szülői GC sejteket újraszuszpendáltuk szérummentes RPMI-1640-a koncentráció 1,5 × 10 ^{5 ng /ml és elhelyezni a felső kamrába, és 0,6 ml RPMI-1640 közegben, amely 10% FBS-t volt hozzáadjuk a bazolaterális kamrába. 24 óra múlva az inkubálást 37 ℃, 5% CO _{2, a sejteket fixáltuk és 0,2% eozin Y száma a migrált sejtek a bazális oldalon a membrán mennyiségileg fénymikroszkóp alatt, 200 × nagyítással.}}

életképesség teszt

sejteket oltottunk 96 lyukú lemezekre, 5 × 10 ^{3 sejt /mérőhely és tenyésztjük jelzett időpontokban. A sejtek életképességét alkalmazásával értékeltük CCK8 (Beyotime, Haimen, Kína) a gyártó utasításait követve. Az abszorbanciát mérjük 450 nm-en hullám hosszát. Mindegyik időpontban megismételtük három kutak és az assay-t independentlyperformed három alkalommal.}

Zselatin zimográfia

A felülúszókat centrifugálással gyűjtöttük össze, miután 24 órás transzfekció után, és megoldódott egy SDS-PAGE gél tartalmú 0,1% (tömeg /térfogat) zselatin. Az elektroforézis után a fehérjéket renaturáltuk mosásával a gélt kétszer 40 percig 2,5% Triton X-100, majd inkubálás 18 órán át 37 ° C-on egy keverék, amely Tris-HCl 50 mM (pH = 7,6), CaCI _{2 5mMm és NaCl 200 mm. Ezután a gélt röviden desztillált vízzel öblítjük, és megfestettük 0,25% Coomassie Brilliant Blue R250 /45% metanol /10% -os ecetsav a 4h, majd színtelenítettük 45% metanol, 8% ecetsav. Géleket ezután szkennelt és fényképezett Kodark rendszerekkel.}

Statisztikai analízis

Az adatok legalább három független kísérlet elemeztük kifejezve az átlag ± SD. A kapcsolat a CCR4 expresszió és a T-stádium elemeztük chi-négyzet próba. Egyéb adatok elemeztük Student t-teszt, vagy ANOVA, ahol csak lehetséges. A P katalógusa értéke kisebb, mint 0,05 tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Minden elemzést végeztünk statisztikai szoftver (verzió 13,0, SPSS Inc., Chicago, IL). Katalógusa

Eredmények katalógusa

Túlzott kifejezése CCR4 a különböző expressziós mintázatot pN0 korai gyomorrák szövet

CCR4 kifejezés a rákos sejtekben kimutatható volt, különböző szintű. Közül 108 paraffinba ágyazott szövetekből, 29 esetben (26,9%) mutatott negatív kifejezés (-), 30 esetben (27,8%) mutatott gyenge kifejezés (+), 35 esetben (32,4%) mutatott mérsékelt kifejezés (++), és 14 esetben (13,0%) mutatott erős kifejezés (+++) (1A.-D). Minden szomszédos normál gyomor szövetekben mutatott negatív festéssel a CCR4, és csak 2 (3,6%) esetben a gyomor-dysplasia mutatott gyenge expresszióját membrán CCR4 (ábra. 1E és F).

Mindkét membrán és a citoplazma expresszióját CCR4 voltak figyelték meg leggyakrabban jól differenciált tumor fészkeket a bél típusú, míg a kevésbé differenciált sejtek inkább megjelenítéséhez egy citoplazmatikus mintázata CCR4 expresszió a diffúz típusú gyomorrák (ábra. 2). Egy érdekes jelenség volt, hogy a sejtek rendkívül invazív potenciál, mint például az izom invázió, vaszkuláris penetráció és ideg invázió, is megjelenik egy citoplazmatikus CCR4 expressziós mintázatot (3.).

CCR4 túlzott expressziója elősegíti a gyomor rákos sejt invázió

tipikus szakaszok, azt is kimutatták, hogy az expressziós szintje CCR4 növekedési tendenciát mutat az a mélység a tumor invázió (ábra. 3). Az IHC elemzés egyértelműen kimutatta, hogy a túlzott kifejeződése CCR4 pozitívan kapcsolódó T-stádium ( P katalógusa = 0,002), a vascularis invázió ( P katalógusa = 0,001) és perineurális invázió (P = 0,002) a pN0 GC (1. táblázat). katalógusa

Azt jelentette, hogy a szintek CCR4 protein meglehetősen alacsony valamilyen gyomor sejtvonalak [18], és így kap a további felismerések CCR4 közvetített tumor invázió, túl- expressziója CCR4 gyomor sejtvonalakban végeztük, ahogy korábban leírt [18]. Nagy transzfekciós hatékonyságot úgy határoztuk meg, a valós idejű RT-PCR, FCM és fluoreszcens mikroszkópia, illetőleg (ábra. A 4A-C). Az EGFP fejeztük a sejtmagban, citoplazma és a membrán a vektor kontroll sejtek, amelyek már transzfektálva a mock plazmiddal; és a fluoreszcens fúziós fehérje lokalizálódik a citoplazmában és membrán a CCR4 plazmid transzfektált sejtekben. Matrigel inváziós vizsgálat azt mutatta, hogy a számok a EGFP-CCR4-transzfektált gyomorrák sejtek áthaladó Matrigel szignifikánsan magasabb volt, mint a mock-transzfektált gyomorrák-sejtek (ábra. 4d). A CCK8 vizsgálat azt jelzi, hogy a túlzott mértékű expressziója CCR4 nem volt hatása a gyomor rákos sejtek proliferációját (S1 ábra).

CCR4-szabályozott MMP-9-termelés gyomor rákos sejtekben

A teszt a lehetséges mechanizmusok mögöttes CCR4 közvetített tumor invázió, megvizsgáltuk a hatását CCR4 MMP-9 expressziója és aktivitása. Valós idejű RT-PCR analízis (ábra. 5A) azt mutatta, hogy EGFP-CCR4-transzfektált gyomorrák sejtek expresszálták a magasabb szintű MMP-9 mRNS képest mock-transzfektált sejtek 24 órás transzfekció után. Zselatin zimográfia analízis (ábra. 5B) feltárta, hogy a szekréció és a MMP-9 szignifikánsan felülszabályozott a felülúszóiban EGFP-CCR4-transzfektált sejtekhez képest a mock-transzfektált sejtek 48 óra transzfekció után, vagy anélkül hozzáadásával exogén CCL22. katalógusa

Vita katalógusa

A kölcsönhatások közötti kemokinreceptorok a rákos sejteket, és azok megfelelő kemokinek képviseli kritikus lépések tumormetasztázisban. Azonban a vizsgálat eredményeit a jelenlegi studyshowed, hogy egy bizonyos számú gyomorrákos betegek nélkül nyirok áttét is pozitív CCR4 festés. Ellentétben a legtöbb korábbi tanulmányok funkcióit kemotaxis által közvetített néhány kemokin receptorok, ez a kutatás kimutatta, egy újszerű, invazív viselkedését CCR4.

A kemokinreceptorok tartoznak egy családi hét-transzmembrán G-protein-kapcsolt receptorok, melyek membránnal fehérjék, és a funkcionális következményeit a kemokinreceptor-aktivitás általánosan azt tartják, hogy függ stimuláció által extracelluláris ligandumok [27]. Azonban a szövettani minták A jelen tanulmány azt mutatta, hogy nem volt megkülönböztethető expressziós mintát CCR4. CCR4 a nem daganatos sejtek mutatott negatív festéssel, csak halvány membránfestôdést a gyomor dysplasia elváltozások. Membrán és citoplazmatikus expresszióját CCR4 leggyakrabban megjelent közepesen jól differenciált tumor fészket, míg expresszió kevésbé differenciált sejtek inkább korlátozódhat elsősorban a citoplazmában. És még érdekesebb, ahogy a tipikus szakaszok, tumorsejtek mutató magas invazív kapacitások, mint az izom invázió, vaszkuláris penetráció és ideg invázió, gyakran mutatott fokozott citoplazmatikus expresszióját CCR4. A feltüntetett adatok között szoros kapcsolat citoplazmatikus CCR4 expressziós mintázata és az agresszív viselkedést a gyomor rákos sejteket. Ez a megállapítás ellentétes általános feltételezés, hogy az extracelluláris doménje a kemokinreceptor szükségszerűen kötelező a tumor metasztázis keresztül az interakciót annak ligandum. Hasonló jelenségeket figyeltek meg a kemokinreceptor CXCR4, akinek a nukleáris lokalizációs járt a progresszió különböző tumorok [28-30]. Ezek az adatok indictate, hogy a gyomorrák sejtkenetet támadják meg a közeli szövetek keresztül CCR4 egy ligand-független módon. A másik hipotézis szerint a CCR4 internalizáció okozta a ligand jelenthet egy olyan mechanizmust, amely kialakult a citoplazma CCR4 expressziós mintázat. CCL22, a CCR4 ligandum által termelt humán gyomorrák szövetekben [31], az is ismert, hogy causeCCR4 internalizációját származó membrán citoplazmában [32, 33], azt sugallva, citoplazmatikus festődés mutathatnak aktivált jelátviteli következő CCR4-CCL22 lekötés. További vizsgálatok szükségesek, hogy felfedje a pontos mechanizmusa a kóros minták kemokinreceptor kifejezés játszanak a daganat progresszióját. Ezen túlmenően, a lassan fokozódó expressziója CCR4 premalignus szövetekben, bár statisztikailag jelentéktelenül nagyobb, mint a tumor-szomszédos normális szövetekben, azt javasolta, hogy CCR4 esetleg szintén részt vesznek a preneoplasztikus szakaszaiban korai tumor fejlődését.

A mi korábbi tanulmány azt találtuk, hogy CCR4-t túlzott mértékben GC szövetben, de nem találtunk szignifikáns különbséget a betegek és a nélkül nyirokcsomó-metasztázis [18]. Ezért azt feltételeztük, hogy a kemokin receptorok szintén fontos szerepet játszanak a rák fejlődésének pN0 betegeknél. A jelen vizsgálatban, az eredmények azt mutatták, pozitív korrelációt CCR4 kifejezés és a T-szakasz, amely összhangban volt a immunhisztokémiai megállapításokat CCR4 kifejezés inkább növekszik a mélység tumor invázió haladt. A hatás CCR4 a gyomorrák sejtek invázióját részben megerősítette transzwell sejtek invázióját vizsgálatokban. Ezeket a vizsgálatokat végeztünk olyan körülmények között, ahol nem exogén CCR4 receptor ligandum adunk hozzá. Lehetséges volt, hogy különböző mechanizmusok is létezhetnek, hogy szabályozza a tumorsejtek invázióját által közvetített CCR4 egy ligand-független módon, amely összhangban áll a jelenség a citoplazmatikus mintázata CCR4 amely kapcsolódik a rendkívül invazív viselkedését tumorsejtek GC szövetben. Igazoltuk, hogy a túlzott expressziója CCR4 szoros kapcsolatban állnak a magasabb fokú tumor invazív, így jelezve, hogy a CCR4 túlzott expresszió ruházza metasztatikus potenciálját GC sejtekben és a további előmozdítása a tumor progresszióját. Azt is feltételeztük, hogy a autokrin CCR4 ligandumok is részt vettek a sejtek mozgékonyságát in vitro katalógusa. A koncentrációk CCL22 a kulturális felülúszó GC sejtvonalak transzfektált vagy anélkül CCR4 meglehetősen alacsony, mint értékeltük (az adatokat nem mutatjuk be). Ugyanakkor az a lehetőség sem zárható ki, hogy az autokrin vagy parakrin termelés CCL22 hozzájárulhat a daganatos invázió keresztül CCL22 /CCR4 tengely in vivo katalógusa. CCL17 és CCL22, mint nagy affinitással CCR4 ligandumok, által termelt GC és más rákos szövetekben. Különösen CCL22, amely előállított akár rákos sejtek vagy tumorral kapcsolatos makrofágok, leírták, hogy részt vesz a metasztázis több rákok [15-17]. Ez azt sugallja, egy lehetséges autokrin /parakrin hurkot magában foglaló CCL22 és CCR4 különböző sejttípusokban.

MMP-2 és MMP-9 a leginkább érintett, és jól jellemzett MMP-k erős proteolitikus aktivitás az extracelluláris mátrix (ECM). A konzisztencia közötti valós idejű RT-PCR tesztek és zselatin zimográfiával kísérletek egyértelműen igazolták, hogy a túlzott expressziója CCR4 a gyomorrák sejtek szignifikánsan fokozta az MMP-9-expresszió és az aktivitás. Ezek a kísérletek továbbá hangsúlyozta, és jelezte, hogy tényleges szerepe a tumor invázió bizonyos feltételek mellett, vagy anélkül stimuláció exogén CCL22. Úgy tartják, hogy a mátrix MMP-9 lebontja a IV típusú kollagén, amely a fő alkotórésze az alapmembrán és kapcsolatban van a ráksejtek terjedését és áttétét betegeknél gyomorrák [34]. Itt nyújtottunk új nyomokat a mögöttes mechanizmus CCR4 elősegítheti gyomorrák sejtek invázióját felszabaduláshoz- MMP-9. Hasonló megfigyelések is történtek tekintetében tumor invázió keresztül néhány kemokin receptorok, mint a CXCR4 és CCR7 [19, 20, 22]. És az MMP-2, amelynek szerkezete hasonló volt az MMP-9-ben is beszámoltak, hogy kapcsolatban áll a gyomorrákkal [35]. Ugyanakkor azt találtuk, MMP-9, de nem az MMP-2, kulcsfontosságú volt molekula részt vesz a CCR4-mediált tumor invázió, amely oka lehet a különböző együttes szabályozók, amelyek kölcsönhatásba lépnek CCR4 különböző mikrokörnyezetet. Bár a MMP-2 expresszió CCR4-transzfektált gyomorrák-sejtek is látszott, hogy magasabb, mint a mock-transzfektált sejtekben, a különbség statisztikailag nem volt szignifikáns (az adatokat nem mutatjuk be). Életképesség teszt azt mutatta, hogy overexpressziója CCR4 nem volt hatása a gyomor rákos sejtek növekedését in vitro katalógusa, ami összhangban van a korábbi vizsgálatok, amelyek azt mutatták, a CCR4 ligandumok nem tudta indukálni a sejtproliferációt [14], elkerülve ezzel az esetlegesen amelyek hatással lehetnek invázió index vagy MMP-9 mennyiségét. Ezeket a vizsgálati eljárásokat végeztünk, vagy anélkül exogén CCL22, jelentős különbségek MMP-9 expresszió között CCR4 és MOCK transzfektált sejtekben. Úgy gondoljuk, a lehetséges mechanizmusok fokozott MMP-9 expresszió CCR4-túltermelése lehet részben annak köszönhető, hogy az autokrin vagy parakrin kifejezése CCL22 in vivo katalógusa. Még más MMP-k, amelyek részt ebben a folyamatban, és a pontos jelátviteli maradt tovább kell vizsgálni a jövőben. Katalógusa

Összefoglalva, azt jelentette, az első alkalom, hogy CCR4 volt kórosan overexpresszált pN0 gyomorrák és ez elősegíti a tumor invázió. Továbbá, a mi az adatok azt mutatták, hogy CCR4-indukált MMP-9 termelést lehet legalább részben hátterében az új mechanizmus CCR4 közvetített tumor invázió. Így antagonisták CCR4 hasznosak lehetnek jelöltek szabályozására korai események tumor progresszióját. Katalógusa

alátámasztó információk
S1 ábra. Overexpressziója CCR4 nem volt hatása a gyomor rákos sejtek növekedését in vitro
.
Való transzfekció után CCR4 vagy modelleket plazmid és a stimulálás vagy anélkül exogén CCL22, SGC-7901 és BGC-823 sejteket reseeded a 96 mélyedéses lemezen. A sejtek életképességét értékelte CCK8 vizsgálattal jelzett időpontokban. Katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0120059.s001 katalógusa (TIF) hotelben

• PLoS One: túltermelése eukarióta Translation megindítása Factor 5A2 (EIF5A2) korrelál a Cell agresszivitás és rossz túlélés Gyomor Cancer
• PLoS One: Survival megfelelő máj artéria nyirokcsomó-metasztázis gyomorrákos betegeknél: Következmények D2 Lymphadenectomy