PLOS NËMMEN: Beclin-1 Expression Ass eng remarkabel Estimatioun vun traureg an kennen mat Lymph Node-Positiv Gastric Cancer

Wat VerfÜgung

Background VerfÜgung

Beclin 1 ass en Haaptgrond Schauspiller vun autophagy. Den Ausdrock vun Beclin 1 a seng prognostic Roll an gastric Kriibs ass haaptsächlech onerfuerschten. Den Zweck vun dëser Etude ass den Ausdrock vun beclin 1 zu gastric Kriibs Zellen, Stoffer an seng Relatioun mat Iwwregens hätt ze ermëttelen. VerfÜgung

Method VerfÜgung

den Ausdrock vun Beclin 1 zu 271 uplanzen vun nogewise gouf lymph-Node positive gastric Kriibs Patienten vun immunohistochemistry. D'Korrelatioun vun Beclin 1 Ausdrock ze clinicopathologic Fonctiounen an Iwwerliewe vun gastric Kriibs studéiert. Beclin-1 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen a Krankheete uplanzen ass och ëmgedréint Transkriptiouns-Hinnen alleguer a Western blotting fonnt benotzt. VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Beclin 1 ass weider-reegelen souwuel mRNA an FAQ Niveauen am sechs gastric Kriibs Zell Linnen am Verglach mat deene vun normal gastric mucosa Zell Linn (GES-1). Den Ausdrock vun Beclin-1 zu gastric Medeziner uplanzen ass och méi héich wéi déi vun der bascht noncancerous Stoffer. Vun der 271 Patienten, 229 (84.5%) waren Beclin 1 héich Ausdrock erhéijen vun immunohistochemistry. Beclin 1 Ausdrock ass enk mat intravascular embolus assoziéiert. Kaplan-Meier Analyse zougedréckt héich beclin 1 Ausdrock mat méi allgemeng Iwwerliewe verbonne war. Béid univariate Analyse an multivariate Analyse Teamchef Beclin 1 Ausdrock onofhängeg prognostic Faktoren an der Patienten mat Node-positiv gastric Kriibs huet. VerfÜgung

Konklusiounen VerfÜgung

Eis Conclusiounen proposéiere staark dass Beclin 1 e Potential Roll huet an tumorigenesis vun gastric Kriibs a konnt eng villverspriechend uweist fir en hätt vun Patienten mat lymph Node-positiv gastric Kriibs ginn. Et kéint och e Roman therapeutesch Zil fir gastric Kriibs Behandlung déngen VerfÜgung

Fro:. Geng Q-R, Xu D-Z, Hien L-J, Lu J-B, Zhou Z-W, Zhan Y-Q, et al. (2012) Beclin-1 Expression Ass eng remarkabel Estimatioun vun traureg an kennen mat Lymph Node-Positiv Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 7 (9): e45968. Doi: 10.1371 /journal.pone.0045968 VerfÜgung

Redakter: Alejandro H. Corvalan, Pontificia Universidad Catolica de Chile, Chile VerfÜgung

Arnaque: Abrëll 4, 2012; Akzeptéiert: 23. August 2012; Publizéiert: 27. September 2012 VerfÜgung

Copyright: © Geng et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Aarbecht war vun der Medical Science Foundation vun Guangdong Province (Nr 2010B031600071) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs bleift eng grouss ëffentlech Gesondheet Problem weltwäit, speziell am Osten asiatesch Länner, den Alter-standardiséierte Heefegkeet Taux ass > 20 pro 100.000 [1]. Fir d'fortgeschratt gastric Kriibs, ass seng hätt nach aarm, mat engem geschate globale 5-Joer Iwwerliewe Taux vu 25% oder manner [2], [3]. Lymph Node Metastasen ass de mächtegste prognostic Luucht folgenden curative resection [4] - [7]. Iwwer 75% vun fortgeschratt Patienten hunn Node-positiv gastric Kriibs, dirigéiert hätt sech vill méi schlëmm wéi déi mat Node-negativ Krankheet [4]. VerfÜgung

Am virdrun Etuden, hu mir positiv lymph Node Verhältnis fonnt ass eng onofhängeg prognostic Luucht fir d'Patienten mat Node-positiv gastric Kriibs an intraperitoneal Chimiotherapie kann positiv sinn [8], [9]. Allerdéngs, läit am fräi Versteesdemech vun der entholl biologescher gelooss a sicht fir den méiglech Ziler fir eenzel Therapie [10], eng fundamental Schrëtt a Richtung d 'Iwwerliewe vun Patienten mat lymph Node-positiv gastric Kriibs verbesseren [11]. Zum Beispill, huet de Mënsch epidermal Wuesstem Faktor receptor 2 (HER2) elo eng nei Bewaacher vun gastric Kriibs dëse Beweiser-baséiert Prinzipien ginn [12] .Adding Stad Standard Chimiotherapie konnt den aarme Iwwerliewe vu Patienten mat HER2-positiv metastatic gastric Kriibs änneren [13] - [15] VerfÜgung

Viru Kuerzem, behandelt d'Roll vun autophagy zu Kriibs Entwécklung a Kriibs kritt grouss Suerg ass [16] -. [18]. Beclin 1, e Schlëssel regulator vun autophagy Opstellung, overexpression zu enger Rei vu mënschlechen Cancers fonnt gouf [19] -. [22] VerfÜgung

Mä, do si nach relativ puer Studien, datt de Veräin tëscht Beclin propagéieren hunn 1 a gastric Kriibs. Besonnesch, wat keng Daten hir Auswierkungen op Iwwregens hätt an gastric Kriibs, nach ëmmer ginn. VerfÜgung

Déi heiteg Etude Beclin 1 Ausdrock vun gastric Kriibs Zellen, Stoffer a seng clinicopathologic Bedeitung vun Patienten mat lymph Node-positiv gastric propagéieren Kriibs. Ausserdeem, analyséiert mir d'Relatiounen tëscht de Beclin 1 Ausdrock mat der Iwwregens hätt fir festzestellen, ob Beclin 1 Medeziner Resultat soe kann. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Zell Linnen a Kultur Konditiounen VerfÜgung

Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen HGC-27, MKN803, MGC-803, SGC-7901, MKN-28, BGC-823 huet Spende vu Korea University School of Zukunft (Peking, PR China.) [23], [24]. Déi normal gastric mucosa Zell Linn, GES-1, aus engem Mënsch An et gastric mucosa epithelium ofgeleet, gouf aus dem Éischte laizistesch Hospital Sonn Yat-Sen Universitéit [25] kritt. Dës Zell Strecken an RPMI 1640 mëttelfristeg (Invitrogen) ergänzt mat 10% An et Bovine serum (Hyclone), penicillin (100 Unitéiten /ml) an streptomycin (100 Unitéiten /ml) bei 37 ° C a 5% CO2 an engem humidified incubator haten . VerfÜgung

Transkriptiouns-Hinnen alleguer VerfÜgung

Total RNS andems TRIzol Method ofgebaut gouf Réckproduktioun. D'RNS war mat DNase pretreated a fir cDNA Synthes mat ënnerschiddleche hexamers benotzt. D'Mëschung (25 μL total) fir Hinnen alleguer bestoung vun 0,5 μl cDNA, 0,5 U Taq DNA polymerase, 2,5 μl vun 10 × Hinnen alleguer Prellbock, 2,5 mm dNTP Mëschung, an 50 Auer Sënn an antisense primers all. Beclin 1 sech duerch folgend primers analyséiert: Beclin 1 5'CGTGGAATGGAATGAGAT3 'VerfÜgung

ëmgedréint primer 5' GTAAGGAACAAGTCGGTAT3 '; VerfÜgung

Actin: 5'AGCCATGTACGTAGCCATCC3' VerfÜgung

a 5 'GTGGTGGTGAAGCTGTAGC 3 '. VerfÜgung

Western blot Analyse VerfÜgung

BTS sech zu lysis gefiermt an der Konzentratioun vun FAQ lysed war vun der Bradford Hoerfaarw Method (Bio-Rad Laboratoiren) alles. Gläich Montanten vun Zell Extrait sech ze SDS-PAGE ënnerworf a transferéiert ze PVDF Membran (Bio-Rad). Ausdrock vun Beclin 1 mat enger Kanéngchen monoclonal antibody (1:1000, Novus Biologicals, NB500-249) laut den Hiersteller d'ugeholl Ëmwelt- sech war. VerfÜgung

kennen studéiert VerfÜgung

D'Etude bestoung vun 271 gastric Kriibs Patienten déi radikal resection fir histologically bestätegt gastric carcinoma aus Cancer Center vun Sun Yat-sen University tëscht Januar 1998 an Dezember 2006. Mir kritt Awëllegung vun all Équipe Participanten an dëser Etude mécht. Ethesch averstaane war vum Sun Yat-sen University Cancer Center Fuerschung Ethik Comité kritt. Der Zoulag Kritären agebaut histologically R0 resection confirméiert, wat als keng macroscopic an microscopic Reschtoffall entholl an Thes Iwwerliewe Zäit ≥6 Méint definéiert war. Patienten mat fernen Investitiounen oder preoperative Therapie oder lymph Node-negativ sech aus der Etude ausgeschloss. D'7thTNM Klassifikatioun vun der American Gemeinsam Comité op Cancer an International Unioun Géint Cancer Critèren war fir pathologic Stadium benotzt [26] VerfÜgung

All Patienten hu Suivi an der Chirurgie bei 6 bis 12 Méint resp. Paracetamol Suivi Period war 38 (Gamme 10 bis 145) Méint fir all Patienten. Allgemeng Survival definéiert gouf, wéi den Zäitraum tëscht der Zäit vun Agrëff an Doud oder war censored bei der leschter Suivi definéiert war. VerfÜgung

Immunohistochemistry VerfÜgung

Beclin 1 mat enger Kanéngchen monoclonal antibody fonnt gouf ( 1:100, Novus Biologicals, NB500-249). All entholl uplanzen sech aus surgically resected gastric Cancers virun adjuvant Therapie krut. Formalin-fix, paraffin-Ënnerbewosstsinn Otemschwieregkeeten Bleck sech op Raumtemperatur duerch eng Identifikatioun Zuel identifizéiert gespäichert. D'Prozedure goufen virdrun beschriwwen ähnlech zu der Method gemaach [23]. D'immunostained Rubriken sech bewäert an Stoffer aus mënschlech Aarbecht adenocarcinomas als positive Kontroll. All drënner waren déi zwee onofhängeg Observateuren baséiert op den Undeel vun positif Kierchefënster entholl Zellen an Intensitéit vun staining bewäert. Laut kuerzem beschriwwen Critèrë fir Rating Beclin 1 Ausdrock, d'Intensitéit vun Membran staining aus schwaach bis staark variéiert: 0 (keng staining), 1 (schwaach staining), 2 (moderéiert staining) an an 3 (enorm staining) [27]. , 1 (6% bis 25%), 2 (26% zu 50%), 3 (51% zu 70%) an 4 (> de Prozentsaz vun positive entholl Zellen war den 0 (5% &Si besteet); Faarwen 70% ). Staining index war vun Prognosen der staining Intensitéit Ball an de Prozentsaz vun positive Zellen stoung berechent. Immunoreactive stoung selwecht oder méi wéi 4 ausgenotzt huet erhéijen mat héije Beclin 1 Ausdrock, an engem staining stoung ënnert 4 benotzt gouf zu klassifizéieren niddereg Beclin 1 Ausdrock ze weisen. VerfÜgung

statistique Analysë VerfÜgung

All statistesch Analyse Hëllef SPSS Software (Versioun 18 fir Windows; SPSS, Chicago, IL) goufen higeriicht. Differenzen um P &Si besteet; .05 sech als statistesch relevant ze ginn. D'Associatioun vun Beclin-1 Ausdrock mat verschiddenen clinicalopathologic Fonctiounen war mat der Chi-Feld Test analyséiert. Survival Kéiren sech duerch d'Kaplan-Meier Method an Verglach vun den iwwerkuckte Versiounen-Platz Test opgezeechent. A Cox proportional iwwerschloen Modell (hannen, stepwise) fir multivariable Analyse war fir Facteuren applizéiert dass Bedeitung vun univariable Analyse erreecht. VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Beclin 1 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen VerfÜgung

Overexpression vun Beclin 1 gouf vun villen Cancers gemellt. Seng Ausdrock Status vun gastric Kriibs Zell Linnen, Ee, bleift onkloer. Fir den Ausdrock Niveau vun beclin-1 gët an FAQ, semi-grouss ëmgedréint Transkriptiouns-Hinnen alleguer Analyse a westlech blotting Analyse bestëmmen sech getrennt an normale Mënsch gastric epithelial Zellen gehaal (GES-1) a sechs gastric Kriibs Zell Linnen (HGC-27, MKN803, MGC-803, SGC-7901, MKN-28, BGC-823). Mir hu fonnt, datt Beclin 1 mRNA an FAQ Ausdrock Niveau weider-reglementéiert an all sechs gastric Kriibs Zell Linnen Verglach mat normal gastric epithelial Zellen GES-1. (Figebam. 1 A a B) VerfÜgung

Beclin 1 Ausdrock vun gastric Kriibs Stoffer VerfÜgung

beclin-1 mRNA an FAQ Ausdrock vun gastric Kriibs Stoffer Fir erauszefannen, 4 gastric Kriibs Stoffer an noncancerous Stoffer bascht vläit zu Kriibs lesions sech duerch ëmgedréint Transkriptiouns-Hinnen alleguer Analyse a westlech blotting Analyse, getrennt fonnt. Et gouf festgestallt, dass Beclin-1 an all véier entholl Otemschwieregkeeten uplanzen souwuel mRNA an FAQ Niveauen eng wiesentlech méi héich Ausdrock hu wéi déi vun den normale Otemschwieregkeeten bascht ze erhéijen aus der selwechter Patienten (Figebam. 1 C an D). VerfÜgung

Beclin 1 Ausdrock vun gastric Kriibs VerfÜgung

fir ze kucken, ob beclin-1 klinesch mat gastric Kriibs Werdegang, Ausdrock an subcellular Lokalisatioun vun Beclin 1 FAQ vergläichen konnt sech zu 271 paraffin-Ënnerbewosstsinn gastric Kriibs Stoffer vun immunohistochemistry fonnt. Spezifësch Beclin 1 staining war meeschtens op der dënner-Plasma an Zytoplasma an der Kriibsfuerschung Zellen fonnt, heiansdo ervirgaangen. Figur 2 weist Vertrieder Beispiller vun Beclin 1 immunostaining. Vun der 271 Patienten, 229 (84.5%) waren Beclin 1 héich Ausdrock erhéijen. VerfÜgung

traureg Analyse VerfÜgung

kennen mat Beclin 1 niddereg Ausdrock zougedréckt gastric Kriibs vill méi kuerz 5-Joer Taux global Iwwerliewe (OS , p = .011;. Lalumi 3) an Iwwerliewe gratis Krankheet (DFS, p = .010; Lalumi 4) wéi déi mat Beclin 1 héich Ausdrock gelackelt.. Den Ausdrock vun Beclin 1 ass enk mat intravascular embolus (P = 0.017) assoziéiert. Allerdéngs war et kee groussen Korrelatioun tëschent den Ausdrock Niveau vun Beclin 1 an Alter, Geschlecht, Site, entholl Gréisst, T Klassifikatioun, N klasséieren, oder pathologic Etapp vun gastric Kriibs Patienten (Table 1). Beclin 1 Ausdrock, Site, intravascular embolus, pathologic T Klassifikatioun, pathologic N Klassifikatioun an pathologic Bühn waren onofhängeg prognostic Facteuren zu univariate Analyse (Donnéeën net gewisen) .In multivariable Analyse, Beclin 1 Ausdrock, intravascular embolus, Site an pathologic Etapp huet bedeitend onofhängeg prognostic Faktor fir Iwwerliewe Zäit (Table 2). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Autophagy ass engem Self-ofgeschnidden rechtlechen a mat entholl Werdegang assoziéiert. Beclin 1, enger mammalian orthologue vun Happ Atg6, spillt eng wichteg Roll an der vesicle nucleation Prozess vun autophagy [28]. Et ass eng onverzichtbar Gentherapie fir déi éischt Phas vun autophagy [29] -. [30] VerfÜgung

Déi aktuell Etude huet, fir d'éischte Kéier, zougedréckt Beclin 1 ass weider-reegelen souwuel mRNA an FAQ Niveauen a sechs gastric Kriibs Zell Linnen am Verglach mat deene vun normal gastric epithelial Zellen GES-1. Mir verroden och Beclin 1 Ausdrock am primäre gastric erhéijen Verglach mat véier vläit gastric Kriibs Echantillon bascht ze erhéijen aus der selwechter Patienten vun ëmgedréint Transkriptiouns-Hinnen alleguer a westlech blotting gefördert gëtt. D'Resultater ofwäichen an Liewer Kriibs Zellen an cervical Kriibs Zellen gemellt, déi Beclin 1 Ausdrock awer vill manner am Verglach zu den entspriechende normal Stoffer [31], [32]. Déi méiglech explaination ass dass beclin-1 Ausdrock vun gastric Cancers dem Aféierungs- vun autophagic Zell Doud bäidroen, doduerch selektiv Drock produzéiert Zell Doud während Entwécklung de Kriibs ze z'iwwerschreiwen [27], [33]. VerfÜgung

Am Moment studéieren , mir gesinn, datt 229 (84.5%) Patienten vun héich Ausdrock Beclin 1 zu 271 gastric Kriibs Patienten, am Aklang mat der Opklärung vun der leschter Etude vun On et al.Their Donnéeën awer keen oder ganz schwaach Ausdrock vun Beclin1 zu normal mucosal Zellen Équipe Mo. vun immunohistochemistry [27]. Allerdéngs huet si net d'beclin-1 Ausdrock um mRNA Niveau vun Zell Linnen beschen, nach seng Roll an der Iwwregens hätt ermëttelen. VerfÜgung

Mir analyséieren dann d'Relatioun tëscht dem Wëllen vun beclin-1 a Krankheete Charakteristiken vun de Patienten . Et war kee groussen Korrelatioun tëschent den Ausdrock vun beclin-1 an Alter, Geschlecht, T Klassifikatioun, N klasséieren, oder Etapp vun Patienten mat gastric Kriibs. Interessant, sech an eiser aktueller Etude, et e wesentlechen Relatioun tëscht dem Wëllen vun beclin-1 an intravascular embolus. Et suggeréiert datt beclin-1 konnt als Bewaacher intravascular embolus an de Patiente mat Node-positiv gastric Kriibs benotzt ginn. Dës Observatioune Highlight de wichteg Roll vun beclin-1 an d'Entwécklung vun gastric Kriibs. VerfÜgung

Ausserdeem, mir fonnt niddereg beclin-1 Ausdrock war staark mat ofgeholl Iwwerliewe vun gastric Kriibs Patienten ( P VerfÜgung assoziéiert = 0.011) an der intravascular embolus Ziel ( P VerfÜgung = 0.017). An multivariable Analyse, erëmgewielt Beclin-1 Ausdrock hir Onofhängegkeet als prognostic Faktor ( P VerfÜgung = 0.044). Dës Resultater proposéiere eng potenziell villverspriechend Nëtzlechkeet vun beclin-1 als prognostic an Iwwerliewe Luucht. De Mechanismus ass nach net kloer. D'Alternativ Erklärung fir dës kann dat beclin-1 Ausdrock vun gastric Cancers Limite chromosomal Instabilitéit an der Heefegkeet vu zousätzlech stattfannen Verloschter [34]. VerfÜgung

Fir eist Wëssen, der Etude ass den éischte Rapport datt Beclin 1 enger Équipe däitlech méi héich Ausdrock vun gastric Kriibs Zellen an Stoffer souwuel mRNA an FAQ Niveauen am Verglach zu hire normal ze garantéieren. Desweideren, fonnt mir héich beclin 1 Ausdrock mat méi allgemeng Iwwerliewe verbonne war. Béid univariate Analyse an multivariate Analyse zougedréckt Beclin 1 Ausdrock, Site, intravascular embolus an pathologic Bühn waren onofhängeg prognostic Facteuren. D'Resultater staark hindeit datt Beclin 1 e Potential Roll an tumorigenesis vun gastric Kriibs huet. Et kéint ee villverspriechenden uweist an engem Roman therapeutesch Strategien fir Patiente mat lymph Node-positiv gastric Kriibs ginn. Weider Studien sinn och de Mechanismus ze klären waren déi autophagy Schauspiller Beclin 1 an d'Entwécklung an Werdegang vun gastric Kriibs betraff ass. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: Zesummespill tëschent GSTP1 Val Allele an H. pylori Wonn, fëmmen an Alkohol Konsum an Risk vun Gastric Cancer ënnert d'chinesesch Population
• PLOS NËMMEN: Leitmotiv excellence an Non-Hodgkin d'Lymphoma (Ministeren) Contenu Genen vun enger gemaach Case-Control Sécuritéit fir Gastric Cancer Risk