G503 är en antrakinon Föreningen isolerades från de sekundära metaboliter av en mangrove endofytisk svamp från Sydkinesiska havet. Föreliggande studie belyser den antitumöraktivitet och den underliggande mekanismen för G503. Cellviabiliteten analys utförs i nio cancercellinjer och två normala cellinjer visade att den magcancer-cellinjen SGC7901 är den mest G503-känsliga cancerceller. G503 inducerad SGC7901 celldöd via apoptos. G503 exponering aktiverade kaspaser-3, -8 och -9. Förbehandling med den pan-kaspas-inhibitor Z-VAD-FMK och kaspas-9-hämmare Z-LEHD-FMK, men inte kaspas-8 inbibitor Z-IETD-FMK försvagat effekten av G503. Dessa resultat antydde att den inneboende mitokondriell apoptos pathway, snarare än den yttre vägen, var involverad i G503-inducerad apoptos. Vidare ökade G503 förhållandet mellan Bax till Bcl-2 i mitokondrierna och minskade förhållandet i cytosolen. G503 behandling resulterade i mitokondriell depolarisation, cytokrom c meddelandet och efterföljande klyvning av kaspas -9 och -3. Dessutom har det rapporterats att det endoplasmatiska retiklet apoptos väg även kan aktiveras av G503 genom att inducera Capase-4 klyvning. Med hänsyn till den lägre 50% hämmande koncentration för gastric cancerceller, kan G503 fungera som en lovande kandidat för magcancer kemoterapi
Citation. Huang L, Zhang T, Li S, Duan J, Ye F, Li H, et al. (2014) Antrakinon G503 inducerar apoptos i Gastric cancerceller genom Mitochondrial Pathway. PLoS ONE 9 (9): e108286. doi: 10.1371 /journal.pone.0108286
Redaktör: Javier S. Castresana, University of Navarra, Spanien
Mottagna: 19 april, 2014. Accepteras: 19 Augusti 2014; Publicerad: 30 september 2014
Copyright: © 2014 Huang et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit
datatillgänglighet. Det författarna bekräftar att all data som ligger till grund resultaten är helt utan begränsning. Alla relevanta uppgifter finns inom pappers- och dess stödjande information filer
Finansiering: Denna studie stöddes av National Nature Science Foundation i Kina, licensnummer:. 30973449, 81172163, 81272515, 81272338, 81200706; Nationalnyckeln Sci-Tech Special Project of China, Grant Antal: 2009ZX09103-642, 2013ZX09102053; Program för forskarstationen i University, Grant Antal: 20120171110053, 20130171110053; Key Project of Nature Science Foundation i provinsen Guangdong, Kina, licensnummer: 10251008901000009; Key Sci-Tech Research Project i provinsen Guangdong, Kina, licensnummer: 2011B031200006; Guandong Naturvetenskap Fund, Grant Antal: S2012010009250, S2012040006986; Key Sci-Tech Research Project i Guangzhou kommun, Kina, licensnummer: 2011Y1-00017-8, 12A52061519; Program för unga lärare i universitet, licensnummer: 10YKPY28; Changjiang Forskare och innovativ forskargrupp i University, antal:. 985 projekt PCSIRT 0947. Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet
Konkurrerande intressen: författare har förklarat att inga konkurrerande intressen finns.
Introduktion
kirurgi, strålbehandling och kemoterapi är de primära kliniska tumörbehandlingar. Men kirurgi och strålbehandling är ineffektiva i metastaserande cancer; Om kemoterapi används på rätt sätt, kan metastaser hämmas [1]. När det gäller läkemedel mot cancer utveckling, antracykliner är de mest effektiva anti-cancerläkemedel [2]. Naturliga produkter från haven är viktiga källor till nya läkemedel mot cancer [3]. Marina mikroorganism metaboliter med unika strukturer och farmakologiska aktiviteter normalt används som ledande antitumörföreningar [4]. Antrakinonföreningar, såsom daunorubicin, doxorubicin, epirubicin och mitoxantron, är de mest effektiva kliniska anticancerläkemedel [2]. Den marina antrakinon SZ-685C dämpar spridningen av human bröstcancer [5] - [6] och humant nasofarynxcancer (NPC) celler [7]. Huang et al. visade att antrakinoner från rabarber, såsom emodin, aloe-emodin och rhein, inhibera tillväxten och proliferationen av olika cancerceller, såsom lungadenokarcinom, myelogen leukemi, neuroblastom, hepatocellulärt karcinom, blåscancer och andra [8].
mekanismen för antitumöraktiviteten hos antrakinoner förs främst i följande avseenden [9] - [10]: DNA-interaktioner genom att binda, inskjutande och störande separation av DNA-dubbelsträng; direkta membran effekter; DNA-skada som svar på topoisomeras II hämning eller genereringen av fria radikaler, såsom reaktiva syrespecies (ROS), och induktion av apoptos via topoisomeras II-hämning, funktionellt p53 eller ROS generation. Dessutom antrakinoner utlösa också apoptos genom JNK (c-Jun N-terminal kinas) [11], Akt /PKB (proteinkinas B) [5], [12] och mitokondriella vägar [13] - [14].
G503 är en antrakinon föreningen~~POS=HEADCOMP isolerades från de sekundära metaboliter av mangrove endofytisk svampen nr 1403 från Sydkinesiska havet [15] .Men om G503 besitter cancer potential som en antrakinonförening har inte undersökts. Därför var denna studie utformad för att belysa den anti-tumöraktiviteten hos G503 och den bakomliggande mekanismen inblandade.
Kemikalier och reagenser
3- (4 , 5-dimetyltiazol-2-yl) -2,5-diphenylterazolium bromid (MTT) och ROS renhållare N-acetyl-cystein (NAC) köptes från Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Hochest 33342, karboxi-H2DCFDA, MitoProbe DiOC2 (3) Assay Kit och MitoProbe Transition Pore Assay Kit (M34153) erhölls från Invitrogen (USA). Annexin V-FITC (fluoresceinisotiocyanat) /PI (propidiumjodid) Apoptos Detection Kit köptes från Keygen (Nanjing, Jiangsu, Kina). RPMI1640-medium och fetalt bovint serum (FBS) var från Hyclon (Logan, UT, USA ) Review Caspase-8 inhibitor Z-IETD-FMK, kaspas-9 inhibitor Z-LEHD-FMK och kaspas-familjen inhibitor. Z-VAD-FMK var från Calbiochem (Gibbstown, NJ, USA) och Beyotime (China). Antikroppar mot kaspas-3, kaspas-4, kaspas-8, kaspas-9 och COXIV antikropp var från Cell Signa Technology (Beverly, MA, USA). Antikroppar mot cytokrom c fermentering och isolering av G503 från Nigrospora NO.1403 isolerades från murken ved av Kandeliacandel Kulturerna (150 L) filtrerades genom ostduk. Filtratet koncentrerades till 5 L under 50 ° C och extraheras tre gånger genom skakning med en lika stor volym av etylacetat. De kombinerade organiska extrakten utsattes för en silikagelkolonn och eluerades med en gradient av petroleumeter till etylacetat för att ge föreningen. Föreningen löstes i dimetylsulfoxid (DMSO) vid en förrådskoncentration av 50 mmol /L och späddes till specifika koncentrationer före användning Cellodling HUVEC isolerades från humana navel ven sladdar normala parturitions och odlades efter ett protokoll som beskrivits tidigare [16] -. [ ,,,0],17]. Chang leverceller och tumörcellinjer Hone-1, CNE-2, 5-8F, HepG2, B7402, Rb, PC3, A549 och SGC7901, AGS upprätthölls genom vårt laboratorium och odlades i RPMI1640-medium kompletterat med 10% FBS, 100 U /ml streptomycin och 100 U /ml penicillin (Gibco) vid 37 ° C i en fuktad atmosfär av 5% CO 2. Denna studie överensstämmer med de principer som anges i Helsingforsdeklarationen, godkänd av den medicinska etikkommitté Sun Yat-Sen universitetet, och skriftligt informerat samtycke erhölls från donatorn. celler såddes vid en densitet av 2 x 10 4 celler /ml i 24-brunnsplattor (HUVEC ympades i gelatinbelagda 24-brunnars plattor). När cellerna uppnådde en densitet av 60% -70%, behandlades de med olika koncentrationer av G503 under 48 h i RPMI1640-medium (1 ml /brunn) utan FBS; de negativa kontrollgrupperna behandlades med PBS. Därefter tillsattes 100
, Bax, Bcl-2, p38, p-p38 och anti-get IgG-HRP var från Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). Mus-anti-β-aktin och anti-GAPDH primära antibodywere från Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Anti-kanin IgG-peroxidas och anti-mus-IgG-peroxidas var från Vector (Burlingame, CA, USA) .Mitochondria isoleringskit köptes från Pierce (Pierce, IL, USA), var proteinanalyssats inköpt från Bio-Rad (Hercules , CA, USA), och ECL detektionskit var från Applygen Technologies Inc (Beijing, Kina).
sp. Nr 1403
(L.) Druce och reidentified som Nigrospora
sp. (Genebank åtkomstnummer: HQ891110), som samlats in från Mai Po, Hong Kong, och en saltsjö i Bahamas. G503 isolerades och renades från de sekundära metaboliter av NO. 1403 [15]. Starterkulturer upprätthölls på majsmjöl havsvatten agar. Pluggar av agar som stöder mycelietillväxt skars och överfördes aseptiskt till en 250 ml Erlenmeyer-kolv innehållande 100 ml flytande medium (glukos 10 g /L, pepton 2 g /L, jästextrakt 1 g /L, NaCl 2 g /L, pH D 7,0). Kolven inkuberades vid 28 ° C. Efter skakning på en roterande skakanordning under 3-5 dagar, var mycelet aseptiskt till en 500 ml Erlenmeyer-kolv innehållande odlingsvätskan (200 ml). Kolven inkuberades därefter vid 28 ° C under 25 dagar.
Cellviabilitet analys
Matematisk modell avslöjar risken för SARS-CoV-2-infektion efter fekal mikrobiotatransplantation
Mikrobiotmodulering och återupprättande av eubios kan hjälpa till att begränsa COVID-19-komplikationer
Gasdetekterande elektroniskt piller för diagnos av gastrointestinala besvär
Detaljerad karta över mikrobiom för mänsklig tunga
Upptäckten av 100 nya gener kan hjälpa forskning om pigmenteringssjukdomar
Bakteriofager kan behandla E. coli utan att skada tarmen,
Irritabel tarmsjukdom ökar risken för demens
Forskare har länge undersökt sambandet mellan tarmen och hjärnan. Nu, en ny studie visar att äldre vuxna med kronisk inflammation i matsmältningskanalen kan utveckla demens mer än sju år tidigare än d
Forskare hittar nya sätt att skydda sig mot sjukdomar i MS -modellen
Forskare vid Brigham och Womens Hospital har hittat ett nytt och oväntat sätt att förebygga sjukdomar i en preklinisk modell av multipel skleros (MS). Bildkredit:Lightspring / Shutterstock.
RNA -sekvensering ger nya insikter i mikrobiomet
Forskare vid University of Chicago har kommit med en revolutionerande strategi för att studera tarmmikrobiomets aktivitet-med hjälp av hög genomströmningssekvensering av tRNA. Alpha Tauri