PLoS One: fermentált tej Propionibacterium freudenreichii apoptózist indukál HGT-1 humán gyomorkarcinóma Cells

absztrakt katalógusa

Háttér katalógusa

A gyomorrák egyik leggyakoribb daganatos megbetegedés a világon. A "gazdaságilag fejlett országokban az" életmód, beleértve a diéta, kockázatot jelentene előnyben ezt a rákot. Diet moduláció csökkentheti emésztőrendszer rákos megbetegedések száma. Között ígéretes élelmiszer-összetevők, tejipari Propionibacteria kimutattuk, hogy apoptózist indukálnak humán vastagbél rákos sejteket, keresztül a kibocsátás a rövid szénláncú zsírsavak acetát és propionát.

módszertan /fő eredményei

fermentált tej kizárólag erjesztett szerint P. freudenreichii katalógusa, nemrég tervezték. Ebben a munkában, a pro-apoptotikus potenciálja ezen új erjesztett tej demonstráltuk a HGT-1 humán gyomor rákos sejteket. Tej felülúszó kiváltott tipikus jellemzői apoptózis, beleértve a kromatin kondenzáció kialakulását apoptotikus testek, DNS laddering, sejtciklus leállást és kialakult egy subG1 lakosság, foszfatidil-expozíció a plazmamembrán külső betegtájékoztatót, reaktív oxigéngyökök felhalmozódás, mitokondriális transzmembrán potenciál zavar, kaszpáz aktiválás és a citokróm c felszabadulása. Figyelemre méltó, hogy ez az új tartalmazó fermentált tej P. freudenreichii
fokozott citotoxicitása kamptotecin, egy használt gyógyszer a gyomor rák-kemoterápia.

Következtetések /Jelentősége

Az ilyen új probiotikus erjesztett tej tehát hasznosíthatók részeként megelőző diéta célja, hogy megakadályozása gyomorrák és /vagy étrend-kiegészítőként, hogy fokozza a rák terápiás kezelések. katalógusa

Citation: Cousin FJ, Jouan-Lanhouet S, Dimanche-Boitrel MT, Corcos L, Jan G (2012) Tej erjesztik Propionibacterium freudenreichii katalógusa apoptózist indukál HGT-1 emberi gyomorban a rákos sejteket. PLoS ONE 7 (3): e31892. doi: 10,1371 /journal.pone.0031892 katalógusa

Szerkesztő: Abbes Belkhiri, Vanderbilt University Medical Center, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: november 15, 2011; Elfogadva: január 19, 2012; Megjelent: március 19, 2012 katalógusa

Copyright: © 2012 Cousin et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka finanszírozta Conseil Régional de Bretagne a CBB développement felhívás projektek és a Centre National de l'Interprofessionnel Économie LAITIERE (CNIEL) keresztül a tudományos bizottság által a Syndifrais kiírás. Kutatás a IRSET csoport támogatták a Ligue Nationale rákkontroll (Côte d'Armor, Ille et Vilaine, Morbihan, Vendée és Sarthe Comittees), INSERM, Rennes-i Egyetem 1. és a régió Bretagne. FJC támogatásban részesült CNIEL (doktori ösztöndíj). SJL támogatta az Association pour la Recherche sur le Cancer (doktori ösztöndíj). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

Diet modulálja kialakulásának kockázata gyomorrák katalógusa

a rák a legfőbb halálok a gazdaságilag fejlett országokban a rákos megbetegedésekkel összefüggő életmóddal például a dohányzás, a fizikai inaktivitás és a "nyugatias" diéta [ ,,,0],1]. Valóban, a táplálkozás szerepét a daganatok kialakulásában erősen támogatja a epidemiológiai vizsgálatok, különösen a rák, az emésztőrendszer. Gyomorrák (GC) képviseli a harmadik típusú halálos rákok, a férfiak a világon. 2008-ban 640,600 esetek GC becsülték, ami 464,400 halnak meg világszerte. [1] Ez a betegség különösen gyakori Kelet-Ázsiában, és Közép- és Kelet-Európában. A legfontosabb kóroki tényezők a gyomorrák karcinogenezissel az étrend és a Helicobacter pylori fertőzés katalógusa. Jelentős bizonyíték, főleg eset-kontroll vizsgálatok arra utalnak, hogy a kockázatot a szerződő GC nőtt nagy mennyiségű bevitele sózott, pácolt vagy füstölt hagyományosan élelmiszerek, valamint a szárított hal és hús. Éppen ellenkezőleg, a szálak, a friss zöldség és gyümölcs, talán azért, mert azok a C-vitamin-tartalom, akikről megállapították, hogy fordítottan arányos a GC kockázat [2], [3]. A hatás a természetes /élelmiszer összetevők rákkeltő képességet a gyomor tehát vizsgálták az elmúlt néhány évtizedben [4] - [6]. Ezek közül, probiotikumok és képesek gátolni a rák kialakulása vonzott tudományos érdeklődés [7], [8]. Probiotikus általában úgy definiálják, mint "egy élő mikroorganizmus, amely, ha az alkalmazás megfelelő mennyiségben, előnyhöz egészségügyi előny, hogy a gazda" [9]. Míg egyes mikroorganizmusok, mint a H. pylori katalógusa kedvezhet GC, mások jótékony hatást azáltal, hogy megakadályozza az emésztési rák. Különösen, a kiválasztott törzsek probiotikus baktériumok korlátozhatja a rák fejlődését állatmodellekben a carcinogenesis [10]. Ezt különösen bizonyítja a vastagbélrák mivel kevésbé ismert a lehetséges hatásait probiotikumok GC. Egy lehetséges mechanisztikus magyarázat egy ilyen védő hatása van a in situ
felszabadulását anti-karcinogén metabolitok, mint például a rövid szénláncú zsírsavak (SCFAs).

rövid láncú zsírsavak apoptózist indukálnak a rákos sejtek

SCFA, beleértve acetát, propionát és butirát, fontos anionok a bél tartalom és koncentrációját is modulálja az étrendben. Ezek kimutatták, hogy kulcsfontosságú szerepet játszanak fontos fiziológiás funkcióban, beleértve a moduláció az emésztőrendszer epiteliális sejtek proliferációját /apoptózis egyensúlyát. Ez magában foglalja az SCFA-által közvetített sejt-ciklus leállítását, a hiszton-dezacetiláz-gátlás és apoptózis stimuláció transzformált sejtek, hanem a stimuláció a differenciálódás az egészséges sejtekben [11], [12]. Azt is leírták, hogy a SCFAs butirát és propionát mind apoptózist indukálnak humán gyomorkarcinóma sejtvonalak [13] - [15]. Az apoptózis egy természetes élettani folyamat, amely lehetővé teszi a sejtek száma szabályozás, és ez alkotja a cél a rákellenes kemoterápia [16]. Apoptosis lehetővé teszi kimerülése a rákos sejtek a "tiszta" módon. A rákos sejtek fragmentum összehangolt láncreakció és a maradékok által elnyelt szomszédos szövetek és immunrendszert [17], [18]. Két fő apoptotikus utak írtak le: Az extrinsic útvonal, amely aktiválása közvetíti a halál receptorok és kaszpáz-8, és a intrinsic útvonal, amelyben a mitokondriumok és a kaszpáz 9 részt [16]. Általában a rákos sejtekben, az apoptotikus funkció hiányzik, ami megmagyarázza, hogy a tartós proliferációját, és következésképpen a daganatok kialakulását. Az a képesség, hogy apoptózist indukálnak a rákos sejtek tehát elismert a terápiás potenciálja [16]. Mivel tejipari Propionibacteria képesek jótékony pro-apoptotikus SCFAs, akkor hasznos lehet a rák megelőzésében vagy kezelésében. Katalógusa

Propionibacterium freudenreichii katalógusa kedvezhet apoptotikus kimerülése emésztőrendszer rákos sejtek katalógusa

Ez probiotikus tejtermékek Propionibacterium kimutatták, hogy sejthalált kiváltó különböző humán vastagbélrák sejtvonalak keresztül apoptózis indukció, a co-tenyészetekben [19]. Az aktív vegyületek, a tápközegbe szekretálódik, kiválthatja a intrinsic mitokondriális apoptotikus jeltovábbítási útvonal tenyésztett humán kolorektális rákos sejteket. Különösen a SCFAs acetát és propionát felszabaduló P. freudenreichii katalógusa apoptózist indukál ható mitokondriális adenin nukleotid translocator okozva mitokondrium depolarizáció és permeabilisation, szivárgás a citokróm c és kaszpáz aktivációt [19], [20]. Azonban propionibacterial felülúszókat mindig több pro-apoptotikus, mint a SCFAs acetát és propionát, használt a mért koncentrációk felülúszójában, ami arra utal, hogy más vegyületek is be lehet vonni ezt a hatást. Kiválasztott törzsei P. freudenreichii
marad élő és metabolikusan aktív belül a belekben az emberek és az emberi mikrobióta-kapcsolt patkányokban, ahol azok SCFAs [21], [22]. Ennek megfelelően kimutatták, hogy növelje apoptózist transzformált vastagbél epiteliális sejtjeiben ilyen patkányok táplált a rákkeltő 1,2-dimetil (DMH), de nem a kontroll egészséges is [23]. Propionibacteria jelenthet probiotikumok előnyben vastagbélrák megelőzésére, amennyiben elérik a célt él és aktív anyagcserét. Ebben az összefüggésben, a vektor, vagy probiotikus szállító jármű, kimutatták, hogy meghatározzák Propionibacteria túlélés és aktivitását [21], [24], [25]. Komplex tejtermékek, mint a joghurt és a sajt, különösen, védi Propionibacteria a stressz, de tartalmaz egy komplex keveréke baktériumok. Ezért nem lehet tulajdonítani a jótékony hatása, hogy egy adott törzs. Katalógusa

A fermentált tej értékelték Propionibacteria szállító jármű ebben az összefüggésben katalógusa

Ebben a tanulmányban használt új élelmiszer minőségű tartalmazó fermentált tej csak P. freudenreichii katalógusa mint egyedüli mikroflóra. Mivel ez a termék tartalmaz mind az élő Propionibacteria és azok aktív metabolitjai, meg kell azokat a kapcsolatot a gyomornyálkahártya lenyelés esetén. Ez erjesztett tejet vizsgálták a HGT-1 humán gyomorrák sejtek apoptózis indukció. Valóban, Propionibacteria ismert, hogy megölik az emberi vastagbél rákos sejteket, de ezek hatását a gyomor rákos sejtek ismeretlen. A fermentált tej megölte HGT-1 sejtek egy idő- és dózisfüggő módon. Jellegzetességeinek apoptózis folyamata észleltek, így életképesség csökkenése, kromatin kondenzáció, apoptotikus testek "formáció, DNS laddering, ROS, mitokondriális membránpotenciál perturbáció, kaszpázaktiválással, sejtciklus leállást és kialakult egy subG1 lakosság. Katalógusa

Eredmények katalógusa

P. freudenreichii
erjesztett tej megöli az emberi gyomor és a vastagbél rákos sejteket katalógusa

P. freudenreichii katalógusa ITG P9 nőtt 72 órán át 30 ° C-on kiegészített tej és kiegészített tej ultrafiltrátumban eléri végső lakosságának 9,43 log _{10 kolónia-képző egység (CFU) /ml és 9,35 log 10 CFU /ml volt. Az SCFA-koncentráció 26,21 mM acetát és 54,47 mM propionát (2,08 propionát /acetát arány) a fermentált tej felülúszó mivel ők 24,00 mM és 53,32 mmol (2,22 arány) az erjesztett tej ultrafiltrátumban felülúszót. Ezek az arányok arra várt Propionibacteria, amely általában termelnek kétszer annyi propionát-acetát formájában [26]. Tizenkét más élelmiszer-fokozatú tejtermék Propionibacteria törzseket is teszteltük (lásd a táblázat S1 és ábra S1). Ezen törzsek alkalmazásával, tizenkét fermentált tej kapunk. Propionát koncentrációk 36-67 mM és Propionibacteria népesség 9,0-9,7 log 10 CFU /ml, a kevesebb és a leghatékonyabb törzs, ill. Katalógusa}

A citotoxikus hatás felülúszóiból tejből készültek vagy tej ultrafiltrátumban, mind erjesztik P. freudenreichii katalógusa ITG P9, vizsgálták. HT-29 humán vastagbél rákos sejteket, és HGT-1 humán gyomorrák sejteket kezeltük ezeket felülúszókat. Különböző hígítású kezdve ½ vizsgáltak. Sőt, a citotoxicitás keverékéből 15 mM-acetát és 30 mM-propionát teszteltük, koncentrációkban közel ezek ½ hígított felülúszókat. Pozitív kontrollként az apoptózis indukció, a kemoterápiás szerek -kamptotecin (4 nM) és etopozid (100 jiM) használtunk HGT-1 és HT-29 sejtek, ill. Három különböző módszerek sejthalál megfigyelési hasonlítottuk össze. Ábrán látható S2, metilénkék, MTT és tripánkék kizárási vizsgálati eljárásokban adott kinetikája hasonló a halál. Következésképpen, a metilén-kék assay-t ebben a vizsgálatban alkalmazott további értékelése sejt életképességét. A nem-fermentált tejtermékek (tej vagy tej ultrafiltrátum) nem volt hatással sem a HT-29, sem a HGT-1 sejtek életképességének (ábra. 1 A, B). A felülúszót tej vagy tej ultrafiltrátumban erjesztik P. freudenreichii
indukált hasonló citotoxicitást egy időfüggő módon HT-29 és HGT-1 sejtek, és közel van a citotoxicitás által indukált gyógyszerek vagy az acetát /propionát keveréket. Fél-maximális leölése HGT-1 sejtekben történt 24 óra után és 26 órás kezelés a fermentált tej és erjesztett tej ultrafiltrátum felülúszókat rendre 17 óra eltelte után a kezelés camptothecin és 24 óra elteltével végzett kezelés SCFA keverék (ábra. S3) . Ezen túlmenően, a citotoxicitását fermentált tejtermék felülúszók HGT-1 sejtekben dózisfüggő volt (ábra. 1C). Minden hígítás tesztelt, a csepp a HGT-1 sejtek életképességét által kiváltott erjesztett tej vagy savanyított tej ultrafiltrátumban nagyon hasonló volt (ábra. 1C & ábra. S3). Ezért a következő lépés a tanulmány végeztünk csak az erjesztett tej ultrafiltrátumban felülúszót. Összefoglalva, ezek az adatok azt jelzik, hogy Propionibacteria hatékonyan megölik humán vastagbél és a gyomor rákos sejteket, legalább részben keresztül a termelés a propionát és acetát (ábra. 1). Néhány más fermentált tej, fermentált tejtermékek különböző Propionibacteria törzsek esetében hasonló citotoxikus hatásai a rákos sejtek (táblázat S2). P. freudenreichii katalógusa ITG P9 is ismert metabolikus aktivitása in vivo katalógusa [22], a megfelelő fermentált tej tovább vizsgáltuk. katalógusa

P. freudenreichii
fermentált tej indukálja tipikus jeleket az apoptózis humán gyomorrák sejtek

Nucleus morfológiáját HGT-1-sejtek jelenlétében inkubáljuk az P. freudenreichii
fermentált tej ultrafiltrátum analizáltuk fluoreszcens mikroszkópiával után Hoechst 33342 festéssel (2A.). Mértük a nukleáris fluoreszcenciát a kezeletlen sejtek (kontroll) változatlan maradt az idő folyamán a kísérlet kék normál magok (idő 0 óra, Fig. 2aa). A kezelés során, HGT-1-sejtek megjelenik a kondenzált kromatin és töredékes magok jellemzői apoptotikus sejtmagok (ábra. 2AB, C), majd a megjelenése apoptotikus testek 72 H (ábra. 2Ad). Inter-nukleoszómás DNS fragmentáció ami a DNS laddering, egy tipikus jele az apoptózis [27], szintén alatt monitorozni erjesztett tej ultrafiltrátumban kezelést. DNS-fragmentációs volt megfigyelhető 24 H kezelés fermentált tej ultrafiltrátum (ábra. 2B), és kisebb mértékben a kamptotecin (ábra. S3). DNS-tartalmat is mennyiségileg áramlási citometriával után propidium jodid címkézési hatásainak tanulmányozására, fermentált tejtermékek ultrafiltrátumban a HGT-1 sejtciklus eloszlása ​​(ábra. 2C). Kezeletlen HGT-1 sejtek bemutatott sejtciklus eloszlása ​​(ábra. 2Ca) nélkül subG1 fázis, amely során nem változott az idő folyamán a kísérlet (az adatokat nem mutatjuk). A százalékos sejtek subG1 fázisban, azt jelzi, hogy az apoptotikus folyamat, jelentősen nőtt az idő alatt fermentált tej ultrafiltrátum kezelés (ábra. 2CB, Cc, CD): 24 óra (39,24 ± 4,87%), 48 óra (91,63 ± 0,28 %), és 72 óra (94,79 ± 0,45%). 48 óra és 72 óra kezelés, mind a sejteket a subG1 sejtciklus fázisban, jelezve a teljes halála HGT-1 sejtekben. Kontrollként kamptotecin indukált hasonló apoptotikus fémjelzi a HGT-1 sejtekben (ábra. S4).

-t apoptózis indukció, phosphatdylserine transzlokációja a belső a külső betegtájékoztató a plazmamembrán értékelték festéssel HGT- 1 sejtek kombinációjával Annexin V-FITC (AV) és a 7-AAD, majd áramlási citometriával fluoreszcencia analízis (ábra. 3). Kezeletlen sejtek (0 h) bemutatott nagy arányban élő sejtet (AV ^{- /7AAD -; 92%), és csak 5% -a sejteket megfestettük az annexin-V (ábra. 3B). Ezeket a százalékokat meghatározott kezeletlen sejtekben nem változott az idő folyamán a kísérlet (az adatokat nem mutatjuk). A kezelés során a HGT-1 sejtek ½ hígított fermentált tej ultrafiltrátum a DMEMc az aránya, festett sejtek csak 7-AAD (jelezve nekrózis) nagyon alacsony volt (ábra. 3B). Azonban, a százalékokat festett sejtek Annexin V-tel jelentősen nőtt egy időfüggő módon és elérte a 80% -ot 72 óra (ábra. 3B). Így HGT-1 sejtekben apoptózist ment kezelés után P. freudenreichii
erjesztett tej ultrafiltrátum, azzal jellemezve, hogy először az AV pozitív festődés, jelezve, foszfatidil-expozíció, majd mindkét AV és a 7-AAD pozitív festődés, jelezve egy későbbi elvesztése membrán integritását. Kontrollként kamptotecin indukált hasonló apoptotikus fémjelzi (ábra. S5).}

SCFA közvetlenül hatnak a mitokondriumok, három fontos mitokondriális paramétereket is meghatároztuk: A ΔΨm belső membrán potenciál, és a generációs ROS, hogy a két fluoreszcens próbák, DiOC (6) 3 (ami ΔΨm-érzékeny), és DHE (mely érzékeli O _{2 ^{- szint) és a lokalizáció a citokróm c. Kezeletlen sejtek (0 h) mutatott magas fluoreszcencia (nagy ΔΨm) és egy alacsony DHE fluoreszcenciát (alacsony termelési O 2 -) (4a., B). Kezelés után erjesztett tej ultrafiltrátum, időfüggő csökkenése beépülését DiOC6 (3) fluoreszcens próbához, megfigyelhető volt, felfedve egy veszteség ΔΨm és ezáltal a mitokondriális membrán depolarizációt (ábra. 4A). A százalékokat a kezelt HGT-1 sejtek csökkent belső membránpotenciál növekedett időfüggő módon, hogy elérjük a 96% a sejtek 72 órán át. FCCP kezelés alkalmaztunk pozitív kontrollként a mitokondriális membrán depolarizáció. Ez a veszteség ΔΨm megerősítette a jellegzetes veszteség vörös fluoreszcencia JC-1 festés (ábra. 4B). Ami ROS termelés HGT-1 sejtekben, erjesztett tej ultrafiltrátumban kezelés által indukált felhalmozódását O 2 -, jelentősen 48 óra után, illetve 72 órás kezelés (ábra. 4C). Ez a ROS akkumuláció lehet részlegesen megelőzhető, ha a sejteket előkezeljük az ROS scavenger TEMPOL (ábra. S6). A citokróm c felszabadulása mitokondriumok a citoplazmában kulcsfontosságú celluláris esetén az apoptotikus programot. Immunoblot vizsgálata a citoplazma-dúsított frakciókat a jelenlétét a citokróm c megerősítette változása szubcelluláris lokalizációja (ábra. 4d). A citokróm c kimutatható volt a citoplazmában dús frakciót 24 óra kezelés, jelezve áthelyezése ez a fehérje (ábra. 4d). Ez relokalizációját citokróm c citoplazmájában megerősítette immunhisztokémiai, mutatja diffúz immunfestés az egész sejt kezelés után, míg központozott festés kezelés előtt (ábra. 4E). Katalógusa}}

P. freudenreichii
fermentált tej aktiválja kaszpázok

Annak igazolására, az apoptotikus mechanizmus által indukált erjesztett tej ultrafiltrátum a HGT-1-sejtekben, a feldolgozás a kaszpázok 3., 8. és 9. analizáltuk Western-blottal és a megfelelő enzimatikus aktivitást monitoring HGT -1 sejtkivonatok (ábra. 5). A nem-fermentált tej ultraszűrlet nem indukált kaszpáz aktiváció HGT-1 sejtekben: Csak a proforms a kaszpáz-3 és -9 mutattunk ki Western blot (ábra. 5A) és nem kaszpáz aktivitást mértünk (ábra. 5B). A fermentált tej ultrafiltrátum felülúszót, valamint a kamptotecin vagy a keverék a propionát és acetát egy [2: 1] mólarány, indukált hasítása pro-kaszpáz-3 és a generációs aktív formáinak a kaszpáz-3, az alegységek p17 és p12 (ábra. 5A). A kaszpáz-3, ami egy effektor kaszpáz, megerősítette a apoptózis indukció. Ezen túlmenően, fermentált tej ultrafiltrátum indukált hasítása prokaszpáz-9, ami a 35. és 37. kDa feldolgozott formában. Kaszpáz-8 nem volt detektálható a kontrollsejtekben kezeletlen HGT-1 sejtekben. Azonban a kezelés propionibacterial felülúszókat vagy C2 /C3 keverék vezetett egyértelmű kimutatására a 54 kDa-os Proform, ezt követően a hasítás után 48 órás kezelést.

számszerűsítésére a kaszpáz-3, -8 és - 9 enzimatikus aktivitása megerősítette kaszpázaktiválással mind propionibacterial metabolitok és kamptotecin. Sőt, kaszpázok-9 és -3 aktiváltuk a legkorábbi szakaszában a kezelés, míg a kaszpáz-8 tűnt később aktiválódik (ábra. 5B). Camptothecin és SCFA keverék aktivált mindhárom vizsgált kaszpázok. Ezek az adatok megerősítették az aktiválás a intrinsic útvonal az apoptózis által fermentált tej ultrafiltrátum kezelés egy korai aktiválását a kaszpáz-9, majd a kaszpáz-3 és -8.

P. freudenreichii
fermentált tej növeli kamptotecin citotoxicitás

Campthotecin egy citotoxikus kinolin alkaloid, amely gátolja a DNS-enzim topoizomeráz I (topo I), és széles körben használják a kemoterápiás kezelés a GC. Megmutattuk, hogy a fent propionibacterial metabolitok apoptózist indukálni HGT-1 sejteken keresztül mitokondriális halál útját. Mi következő vizsgáltuk által indukált apoptózis a kettő kombinációja kamptotecin és erjesztett tej ultrafiltrátum a HGT-1 sejtekben. Fokozott koncentrációban -kamptotecin (0, 0,25, 0,5, 1, 2 uM) kombinálva fokozott koncentrációi erjesztett tej ultrafiltrátum (0,, ⅛, ¼) teszteltük HGT-1 sejtek életképességét, és mindkét indukált elvesztése HGT-1 életképesség , dózis-függő módon (ábra. 6). Ezen túlmenően, a mellett a fermentált tej ultrafiltrátum jelentősen növelhető a citotoxicitás kamptotecin HGT-1 sejtekben (ábra. 6). Például, 0,25

• PLoS One: E-Cadherint destabilizációja számlák a patogenitását missense mutáció örökletes diffúz Gyomor Cancer
• PLoS One: azonosítása szérum mikroRNS as Novel nem invazív biomarkerek korai felismerése és a Gyomor Cancer