PLoS ONE: aktyvavimas STAT3 Žmogiškųjų Skrandžio vėžio ląsteles per interleukino (IL) -6-Type citokinų Signalizacijos koreliuoja su klinikinė reikšmė

Anotacija

Fonas

signalo keitikliai ir aktyvatoriai transkripcijos 3 (stat3) signaliniai kelias vaidina svarbų vaidmenį onkogenezėje, angiogenezę, imunitetas, ir naviko ląstelių invaziją. Šiame tyrime mes tyrė interleukino asociaciją (IL) -6 /stat3 signalizacijos kelią su T limfocitų ir klinikinės netiesiogiai pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu.

Metodai

Septyniasdešimt vienas pacientas, kuriems buvo atlikta skrandžio pašalinimas dėl skrandžio adenokarcinoma buvo tirta. Kraujo mėginiai buvo imami prieš ir po chirurginės pašalintas skrandis kiekybiškai įvertinti IL-6, IL-10 ir VEGF lygius naudojant žinutę imunofermentinės tyrimą, taip pat T limfocitų pogrupius (CD3 ^{+ CD4 + + CD8 + CD4 + + /CD8 +), ir gamtos žudikas (NK) ląstelių pagal tėkmės citometrijos metodą. Be to, IL-6, survivin, STAT3, stat3 fosforilinimo (p-stat3), ir VEGF išraiška buvo nustatytas žmogaus skrandžio vėžio ir gretimuose normaliuose gleivinės per Western Blot ir imunohistocheminiu.}

rezultatai

Po operacijos buvo lygiai IL-6, IL-10 ir VEGF serume buvo žymiai mažesnis nei priešoperacinius lygių. Procentinės, T-ląstelių pogrupių ir NK ląstelių kraujyje buvo žymiai didesnis po 1 pooperacinio-savaitę, palyginti su iki operacijos, grupės, kuri buvo daugiau padidintas yra 1 mėnuo po to, kai pašalintas skrandis. Be to, IL-6, survivin, STAT3, p-STAT3, ir VEGF išraiška buvo padidintos į žmogaus skrandžio vėžio audiniuose, palyginti su gretimuose normaliuose gleivinę. Jų išraiška susijusi su TNM etape skrandžio vėžio. Iš stat3 aktyvacijos klinikinius mėginius lygis buvo susietas su IL-6 išraiška. Visi skrandžio navikų mėginiuose, kurie išreikšti p-stat3, taip pat išreiškė IL-6 su silpna išraiška aptikta gretimuose normaliuose gleivinę.

Išvada

Padidėjęs IL-6 sukeltos aktyvavimo STAT3 buvo pastebėtas neoplazminė skrandžio audinio, kuris teigiamai koreliuoja su naviko progresavimo. Be to, IL-6 ir stat3 tolesni signalai, tokių kaip IL-10 ir VEGF buvo sumažinti pacientams, pašalinus skrandžio vėžio, palyginti su iš anksto-operacijos. Todėl slopinimas IL-6 /stat3 signalizacijos keliu gali pateikti naują gydymo strategiją prieš skrandžio vėžio

nurodomoji dalis:. Wangas Z Si x Xu A Meng X Gao S Qi Y ir kt , (2013) aktyvavimas STAT3 Žmogiškųjų Skrandžio vėžio ląsteles per interleukino (IL) -6-Type citokinų Signalizacijos koreliuoja su klinikinė reikšmė. PLoS ONE 8 (10): e75788. Doi: 10,1371 /journal.pone.0075788

redaktorius: Raya Khanin, Memorialinis Sloan Kettering Cancer Center Jungtinės Amerikos Valstijos

Įstojo: spalio 7, 2012; Priimta 21 Rugpjūčio 2013 m Paskelbta: Balandis 7, 2013

Visos teisės saugomos: © 2013 Dong et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Finansavimas:. Šis tyrimas , koncertavo autorių laboratorijoje, parėmė dotacijas iš edukacinės komisijos Anhui provincijoje, Kinija (dotacijos Nr kj2011Z210) .Sriegines finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį .

konkuruojančių interesų. autoriai paskelbė, kad konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

Skrandžio vėžys yra antra labiausiai paplitusi priežastis, dėl vėžio mirčių, ir beveik 1 milijonai naujų ligos atvejų diagnozuojama visame pasaulyje kiekvienais metais [1]. Bendras išgyvenamumas yra ne žymiai pagerėjo, nors ankstyva diagnozė ir gydymo procedūros yra kuriama. Tai yra iš dalies dėl nepilno suprasti mechanizmo, lemiančio tumorigenezei ir metastazes skrandžio vėžio.

Signalo keitiklis ir aktyvatorius transkripcijos 3 (STAT3) yra transkripcijos faktorius, kuriuo gali būti aktyvuojamas tirozino fosforilinimo reaguojant į augimo faktoriais ir citokinais (ty, interleukino [IL] -6). IL-6, kuris iš pradžių buvo apibūdinamas kaip B ląstelių diferenciacija-citokino, yra citokinų, kad vaidina svarbų vaidmenį biologinių funkcijų, įskaitant uždegimą, plazmocitoma genezės gausybė, imunoglobulino gamybą tarpininkauti ląstelių augimą, ląstelių proliferacija ir ląstelių išlikimas [ ,,,0],2-4]. Priklausomai nuo to, ląstelių tipo, IL-6 turi galimybę veikti per skirtingus klasikinių baltymų kinazės būdai, be kita mitogenas aktyvinto proteino kinazės (MAPK) ir phoshatidylinositol-trifosfatas kinazės (PI-3 kinazės) [5]. IL-6 jungiasi prie IL-6 receptorių (IL-6R), kuri asocijuojasi su gp 130, todėl aktyvina transkripcijos faktorius STAT1 ir STAT3, per Janus-susijusio kinazės (JAK), todėl sunkių netikėtų pasekmių neoplastinės augimo [6, 7]. Suveikus, STAT3 greitai translocates į branduolį, o jungiasi prie atpažinimo sekos tikslinių genų promotoriaus (pvz, cikloniniai D1 BCL-2, BCL-XL, matricos metaloproteinazės ir kraujagyslių endotelio augimo faktorius [VEGF]), taip didinant jų transkripciją [8-10]. Visos šios tikslinės genai susijęs reguliavimo ląstelių išlikimas, angiogenezę, imuninės vengimo ir uždegimas auglio microenvionment.

STAT3 aktyvacijos prisideda prie augimo stimuliacijos, anti-apoptozės ir angiogenezę, kuri daro reikšmingą susijęs su uždegimu, imunitetas ir onkogenezėje [7,11,12]. Todėl, sudėtinė aktyvavimo STAT3 yra atsakingas už tam tikrą žmogaus vėžio, įskaitant kiaušidžių vėžio, krūties vėžio, leukemijos, prostatos vėžio, galvos ir kaklo vėžio, ir kasos vėžio [13-17] įvairovė. Blokada JAK /stat3 signalą gali slopinti žmogaus vėžio [17] augimą. Neseniai STAT3 buvo įrodyta, kad vaidinti pagrindinį vaidmenį skrandžio vėžio ląstelių išgyvenimą [18-22] priežiūrai. Steigiamąjį aktyvavimo STAT3 yra prognozavimo prastos prognozės žmonijos skrandžio vėžio [23-25]. Tačiau jis vis dar išlieka nežinoma, kaip aktyvuota stat3 per interleukino (IL) -6 tipo citokino signalizacijos asocijuojasi su T limfocitų pakeitimo metu žmogaus skrandžio vėžio progresavimą. Šio tyrimo tikslas buvo nustatyti, ar IL-6 /STAT3 signalinio kelio asocijuojasi su T limfocitų pokyčių ir koreliuoja su žmogaus skrandžio vėžio progresavimą.

Medžiagos ir metodai

Pacientai, eksperimentinis Dizainas ir gydymas

Šis tyrimas atitinka reglamentų Anhui medicinos universiteto etikos komitetui, kuris seka protokolą išdėstytą WMA deklaracijos Helsinkis-etinių principų medicinos tyrimų su žmonėmis susijusių nustatytų. Visi pacientai buvo patikrintas ir apdorojamos tam, kad tuo filialas ligoninės Anhui medicinos universiteto, Hefei, Kinija tyrimo tikslo ir pasirašė informuoto sutikimo formą. Žmogaus etikos gaires klinikinių tyrimų projekto Nr kj2011Z210 (dotacijas iš Edukacinės komisijos Anhui provincijoje, Kinijoje, PI: dr Zhengguang Wang) buvo aptartas ir patvirtintas Žmogiškųjų etikos komitetui, pirmasis filialas ligoninės Anhui medicinos universiteto kovo 25, 2011. Visos įtraukti pacientai patyrė visišką ar tarpinės sumos pašalintas skrandis. Po operacijos, kiekvienas pacientas gavo keturis ciklus arba daugiau chemoterapijos (chemoterapijos schemų: FOLFOX4 programa).

Tinkami pacientai suaugusiems (18 metų iki 75 metų amžiaus), kurių biopsija patvirtino, skrandžio adenokarcinoma, kurie anksčiau baigė bent keturi chemoterapijos ciklų. Pagal atsitiktinės tvarkos (santykiu 1: 1) į tyrimų, visi pacientai turėjo normalią kepenų, inkstų ir kaulų čiulpų funkciją (aprašyta kaip baltųjų kraujo ląstelių skaičius ≥3.5 × 10 ^{9 ląstelių /l trombocitų ≥80 × 10 9 ląstelių /l, bendro bilirubino ≤ 2 × viršutinė normos riba, hemoglobino ≥9.0 g /dl ir kreatinino ≤170 mkmol /l), o ECOG veiklos statusas tarp 0-2. Pacientai buvo atmesti dėl rimtų sutrikimų, periferinė neuropatija (NVI-CTC1 lygio ir aukščiau), nėštumas, arba žindote kūdikį. Pacientai, kurie buvo patikrinti tolimus metastazes buvo atmesti.}

Klinikinė stebėjimo

atsakymai gydomojo terapija vertino imuninės sistemos funkcijos ne, prieš ir po kiekvieno gydymo. Vėžys paciento gyvenimo kokybė rezultatas iš 60 punktų, kur prastas gyvenimo kokybė buvo mažesnis nei 20 taškų, ir neturtingų už 21 iki 30 minučių, paprastai 31 iki 40 taškų, geras 51 iki 60 minučių.

serumo mėginiai

Periferinė serumas (5 ml) buvo surinkta iki gydymo ir pooperacinio 1 savaitę, taip pat po to, kai per mėnesį. Serumo buvo centrifuguojamas, esant 2000 apsisukimų per minutę per minutę 10 minučių, o viršutinė skystis (serumo) buvo surinkti.

nustatymas serumo citokinų

Visuose kraujo mėginiai be EDTA centrifuguoti iš karto, o po to supernatantų visi buvo laikomi -80 ° C temperatūroje, kol tiriami. Koncentracijos kraujo serume žmogaus IL-10, IL-6 ir VEGF buvo kiekybiškai veikiant fermentais susieti immunosorbant analize (ELISA) pagal gamintojo instrukcijas. IL-10, IL-6 ir VEGF rinkiniai teikė R & D sistemos (R & D Systems, CA).

nustatymas T limfocitų pogrupiuose

T limfocitų sutrumpinti kraujyje buvo nustatomas naudojant tėkmės citometre [26,27]. Ir T-ląstelių pogrupių identifikavimo buvo remiantis CD3, CD4, ir CD8, Trumpai tariant, 100 pL EDTA anti-koaguliacija kraujo buvo inkubuojamas su 20 pL atitinkama monokloninis reagentas, kurių sudėtyje yra anti-CD4-FITC, anti-CD8- išraiškos PE, ir anti-CD3-PE-Cy5 (Beckman Coulter "), o po to pridedant 2 ml eritrocitų irimo tirpalo. Mėginiai buvo apsaugotas nuo šviesos kambario temperatūroje 10 min. Leukocitų ląstelės paviršiaus vientisumas buvo palaikoma švelnus, ne-plovimo eritrocitų lizuoja metodu. Mišinys centrifuguojamas, esant 4 ° C temperatūroje 12000 rpm /min 5 min ir viršutinis sluoksnis buvo pašalintas. Ląstelių granulės buvo plaunamas fosfato-buferinio tirpalo (PBS) tirpalo ir išskiriamos centrifuguojant. Pagaliau, mėginys buvo resuspenduotos 1 ml PBS, ir matuojamas su FACSCalibur ™ srauto citometro. Mėginys įgijimą ir analizę buvo gauti srauto citometro ir visiškai automatizuotą įrangą reagentas derinys.

imunohistocheminis

formalinu fiksuotos, parafino-embedded pirminių skrandžio mėginius, sekcijos (5 mkm storio) skrandžio pašalinimas buvo tamsintas su anti-stat3 antikūnų (STAT3 F-2: SC-8019, Santa Cruz biotechnologijos, Santa Krusas, Kalifornija, JAV) [22,25]. Į VEGF, survivin, ir IL-6 skrandžio mėginius buvo nustatyta lygiai pagal anti-VEGF antikūnas (1: 100 praskiedimo; Santa Cruz Biotechnology), anti-survivin antikūnas (1: 100 praskiedimo; Santa Krusas biotechnologijos), ir anti-IL-6 antikūnas (01:50 atskiedimą; Santa Cruz biotechnologijos), atitinkamai. Neigiami kontroliniai mėginiai buvo audinio skyriai immunostained su nespecifinio IgG antikūnų. Specifinė antikūnų dažymo buvo ryškinamos naudojant diaminobenzidinas substrato rinkinį. Skaidrės buvo stebima ryški lauko mikroskopu. Ir tada analizavo neatsiejama optinis tankis (OT) vertės visų paveikslėlių santykiniai baltymo ekspresija lygis buvo quanti fi kuojamas densitometrically ir išreikštas vidutinis optinis tankis (MOD) vienetų.

Vakarų dėmė analizė

Visas audinio fragmentai buvo paruoštas iš žmogaus skrandžio audinių su Ripa buferio. Imunoblotingu buvo atliekama naudojant anti-IL-6, anti-VEGF, anti-survivin anti-STAT3 ir fosforilinarai STAT3 (Tyr705) antikūnai (Santa Krusas Biotechnologijos, Santa Krusas, Kalifornija) [22]. Baltymai buvo aptikta naudojant sustiprintą chemiliuminescencine sistemą pagal gamintojo nurodymus (Tanon 4500 Shandong Aibo technologijų Co, Kinija). Vienodas pakrovimo mėginio nulėmė kiekybinio baltymų, taip pat reprobing membranos beta-aktino kaip namų ruošos baltymų.

Statistinė analizė

Duomenų buvo išreikštas vidurkis ± SD. Visa statistinė analizė atlikta SPSS 15.0 programiniu paketu. Iš kelių grupių palyginimas buvo analizuojama vieną pusę dispersinė analizė (ANOVA), po LSD testą ir Dunnett testą. P
. ≪ 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas

Rezultatai

Demografinės charakteristikos pacientai

Aštuoni vienas pacientas buvo įdarbinti už tyrimą, o 10 atvejų buvo atšauktas dėl gedimo sekti ir mirties. Kaip parodyta 1 lentelėje, keturiasdešimt šeši pacientai buvo vyrai ir dvidešimt penki pacientai buvo moterys. Iki T vertė, 8 atvejai buvo įtraukti į T1, 12 atvejų T2, 7 atvejai T3, ir 54 atvejai T4. Histopatologiniai stebėjimai parodė 62 atvejai eksponuojami regioninio limfmazgio invazija ir 9 atvejai Hade jokių limfmazgių metastazių. Pasak TNM sustojimo, 5 pacientams buvo klasifikuojamas kaip I etapas, 7 pacientams II etape, 8 pacientams III etape ir 51 pacientams IV stadijos.
N
procentas
SexMale4664.8Female2535.2Age (metai) < 501521.1≥505678.9Primary navikas siteGastric cardia3346.5Gastric antrum1723.9Gastric body1926.8Gastric fundus22.8Diameter naviko < 5 cm2433.8≥5 cm4766.2AdenocarcinomaModerately differentiated2332.4Poorly differentiated4867.6T stageT189.9T21214.8T378.6T45466.7TNM stageI57.0II79.9III811.3IV5171.8Lymph mazgas metastasisPresent6287.3Absent912.7Length pooperacinio gydymo. < 3w5374.6≥3w1825.4Extent iš gastrectomyTotal gastrectomy4969.0Subtotal gastrectomy2231.0Table 1. Demografinės charakteristikos 71 skrandžio pacientų
CSV Parsisiųsti CSV

analizė serumo mėginiai kiekybiškai IL-6, IL-10 ir VEGF

šiame tyrime 71 pacientai buvo tinkamos. Prieš ir po kiekvieno operacijos pabaigoje, dėl to pacientų serumo mėginiai buvo kiekybiškai išreikšti citokinų lygių. Šiame tyrime, IL-6 koncentracija, IL-10 ir VEGF buvo kiekybiškai nustatyti reikšmingo skirtumo tarp citokinų koncentracijos serume iki operacijos ir po operacijos. 2 lentelė parodė, žymiai sumažinti citokinų koncentracijos IL-6, IL-10 ir VEGF Pooperaciniuose serumo mėginiuose, palyginti su priešoperacinius lygių (p < 0,05). Šių citokinų lygius dar labiau sumažėjo pooperacinio mėnesį 1, kai, palyginti su tais, 1 pooperacinio savaitę (2 lentelė). Šie rezultatai rodo, kad IL-6, IL-10 ir VEGF lygiai yra sumažintas po to, kai pašalintas skrandis.
Kintamasis
n
IL-6 (ng /l)
IL-10 (ng /ml )
VEGF (ng/L)
Preoperative23498.9±90.7983.6±212.08347.8±1937.4Postoperative-week123380.2±87.5^{*779.7±166.7*7011.3±2044.8Postoperative-month125312.9±80.2**731.9±144.6*6275.5±2029.6*Table 2. palyginimas serumo citokinų lygių IL-6, IL-10 ir VEGF skrandžio vėžiu sergantiems pacientams.
Duomenys vidurkis ± SD. Palyginti su priešoperaciniu grupės, * * P < 0,01, * P < 0,05. CSV Atsisiųsti CSV}

analizė T-ląstelių pogrupių ligonių ir kontrolė

T-ląstelių pogrupiuose procentai buvo analizuojami kraujo iš skrandžio vėžiu sergančių pacientų kohortos prieš ir po skrandžio pašalinimas naudojant tėkmės citometrijos. Mes nustatėme, kad procentai, T-ląstelių pogrupiuose (CD3 ^{+ CD4 + +), o CD4 + /CD8 + santykis taip pat NK ląstelės buvo žymiai padidėjo po 1 pooperaciniu-per savaitę, kuris buvo daugiau padidintas Pooperaciniuose-mėnesį 1, palyginti su tų, kurie buvo pašalintas skrandis (3 lentelė). Tačiau CD8 + procentinė dalis buvo sumažėjo 1 mėnesį po to, kai pašalinus skrandžio vėžio (3 lentelė). Šie rezultatai rodo, kad imuninė būklė pagerėjo pašalinus skrandžio vėžio.
Variable
N
CD3 + (%)
CD4 + (%)
CD8 + (%)
CD4+/CD8+
NK
Preoperative2350.5±6.431.6±7.227.8±7.31.1±0.626.9±8.1Postoperative-week12354.3±7.636.8±8.1*24.3±8.41.5±0.9*30.4±9.3Postoperative-month12562.6±5.4**42.1±6.3**22.5±7.9*1.9±0.8**34.2±7.9**Table 3. Per skirtingu laiku skrandžio vėžiu sergančių pacientų palyginimas T limfocitų pogrupiuose.
Duomenys vidurkis ± SD. Palyginti su priešoperaciniu grupės, ** P < 0,01, * P < 0,05. CSV Atsisiųsti CSV}

išraiška ir ląstelių pasiskirstymas IL-6, survivin stat3 ir VEGF skrandžio vėžio audiniuose

išraiška ir korinio platinimas IL-6, survivin, STAT3 ir VEGF skrandžio audinių ir greta normalus gleivinė pacientams, sergantiems pašalintas skrandis buvo tiriama naudojant imunohistocheminis dažymas. Buvo nustatyta, kad STAT3 expreesion buvo padidintos tuo atveju, skrandžio vėžio audinių židinių, palyginti su savo silpno išraiška STAT3 gretimuose normaliuose gleivinės (1 pav). STAT3 dažymo daugiausia buvo lokalizuotas skrandžio vėžio ląstelių branduoliuose. Be to, IL-6, išgyventi ir VEGF išraiška buvo taip pat labai padidėjo skrandžio vėžio audiniuose, palyginti su tų, gretimuose normaliuose gleivinės (1 paveikslas).

Jei toliau con fi rm padidėjęs išraiška STAT3, p- STAT3, IL-6, survivin ir VEGF skrandžio vėžio audiniuose, taip pat atlikti Imunoblotingo nustatyti jų lygį, naudojant anti-stat3 anti-fosforilinarai stat3 (Tyr705), anti-IL-6, anti-survivin, anti-VEGF antikūnus , atitinkamai. Kaip ir tikėtasi, vienas juosta buvo stebimas naudojant kiekvieną antikūną (2a paveikslas), ir baltymo kiekis IL-6, survivin, STAT3, p-STAT3 ir VEGF žmogaus skrandžio vėžio audiniuose buvo daug didesnis nei gretimuose normaliuose gleivinės audinių (visais atvejais p < 0,001, 2B pav). Šie rezultatai įpainioti, kad IL-6 /stat3 signalai aktyvuota skrandžio vėžio audiniuose.

IL-6 /STAT3 aktyvacijos koreliuoja su TNM etape skrandžio vėžio

Kaip parodyta 4 lentelėje, padidėjo išraiška STAT3 imunohistocheminiu reikšmingai koreliavo su TNM etape skrandžio vėžio. Panašiai, IL-6, išgyventi, ir VEGF išraiškos procentinė dalis žymiai padidėja, jeigu aukštesnės TNM etape, palyginti su mažo TNM etape skrandžio vėžio (4 lentelė). Šie rezultatai rodo, kad aktyvacija IL-6 /stat3 būdas yra susijęs su TNM etape skrandžio vėžio.
STAT3
P
vertė
Survivin
P
vertė
IL-6
P
vertė
VEGF
P
vertės

+ -

+
- CR.LT +
- CR.LT +
- CR.LT Normalus skrandžio tissue4 (13,3%) 269 (30%) 213 ( 10%) 272 (6,7%) 28Gastric naviko audinyje I2 (40%) 34 (80%) 11 (20%) 43 (60%) 2II5 (71,4%) 2P < 0,057 (100%) 0P < 0,054 (57,1%) 3P < 0,055 (71,4%) 2P < 0.01III7 (87,5) 16 (75%) 27 (87,5%) 17 (87,5%) 1IV46 (90,2%) 551 (100%) 047 (92,2%) 444 (86,2%) 7Table 4. Koreliacija tarp stat3, survivin, IL-6, VEGF saviraiškos ir TNM etapais skrandžio vėžiu sergantiems pacientams.
CSV Parsisiųsti CSV

Diskusijos

IL-6 ir jos paskesnių signalai, kaip antai STAT3, žaisti esminius vaidmenis in fl ammation ir nukrypusiu nuo normos imuniteto procesą, taip pat kancerogenezėje [28-30]. STAT3 aktyvuojamas per kelias sekundes ar valandų, o tada išsijungia išlaikyti homeostazę normaliomis aplinkybėmis. Tačiau STAT3 aktyvacijos tęsiasi, kurio prasideda onkogeno transkripciją Susiklosčius neįprastoms sąlygoms [25,31]. Daugėja įrodymų, rodo padidintą išraišką ir įjungus STAT3 į žmogiškąjį skrandžio karcinoma [18-25,32]. Lieka neaišku, ar padidėjo IL-6 /STAT3 aktyvacijos koreliuoja su nukrypusiu nuo normos imunitetą progresavimo ir invazijos į skrandžio vėžį. Šiame tyrime, mes nustatėme, IL-6, IL-10 ir VEGF lygis serume buvo reikšmingas sumažėjo pašalinus skrandžio vėžio. Tai siejama su padidėjusiu procentinius CD3 ^{+ ir CD4 + T limfocitų, taip pat NK ląstelių. Be to, IL-6 /stat3 signalai įskaitant išgyventi ir VEGF buvo žymiai papildytos į skrandžio karcinoma audinių, palyginti su gretimuose normaliuose gleivinę. Apskritai, mūsų išvados suteikti pirmąją įrodymų, kad padidėję IL-6 /STAT3 aktyvacijos koreliuoja su nukrypusiu nuo normos imuniteto, todėl progresavimo ir invazijos į skrandžio vėžį.}

IL-6 buvo įrodyta, kad padidinti invazija skrandžio vėžio ląsteles darniais aktyvavimo STAT3 [33,34]. Tai atitinka mūsų išvadų matyti, kad IL-6 išraiška buvo žymiai, susijusių su STAT3, ir jie abu per-išreikštas žmogaus skrandžio vėžio. Silpnas išraiška tiek IL-6 ir STAT3 buvo nustatyta, gretimuose normaliuose gleivinę. Padidėjęs VEGF ir survivin išraiška, nes labai aktyvavimo IL-6 /STAT3, padeda skrandžio vėžio ląstelės augti greičiau ir skatinti toli metastazių [22,35-37]. Pašalinimas iš skrandžio vėžio veda prie IL-6 ir VEGF sumažinimo. Tai rodo, kad navikas mikroaplinka taip pat vaidina svarbų vaidmenį aktyvuojant IL-6 /stat3 kelią, kuris sudaro užburtą ratą skatinti tumorigenezei ir invazija.

Vėžys immunesurveillance yra svarbus procesas, siekiant pašalinti vėžines ląsteles [38]. Tai patvirtina, kad didesnis skaičius T lympocytes tik navikų audiniuose yra gerokai koreliuoja su mažesniu dažniu metastazių, pasikartojimo ir ilgą išlikimą, nepaisant prieštaringų ataskaitos egzistuoja [27,39] [34]. Tačiau navikai turi galimybę pabėgti immunesurveillance. IL-10 yra vienas iš imuninę sistemą slopinančiais citokinų, iš pradžių padidėja kraujo išplitusio skrandžio vėžio [40-42]. Tai veda prie nesugebėjimo pašalinti vėžines ląsteles naviko mikroaplinka. Iš tiesų, skrandžio vėžio ląstelės patys gali išskirti IL-10, kuris gali paaiškinti savo mažinti pacientų, pašalinus skrandžio vėžio, palyginti su iš anksto-operacijos šiame tyrime. IL-10 turi dvejopą poveikį T limfocitų ir NK ląstelių [42-44]. Tai atitinka mūsų išvadas, kad ši T limfocitų ir NK ląstelių skaičius yra padidėjo cirkuliacijos sistema pacientų pašalinus skrandžio vėžio, kai, lyginant su pradine operacijos. Mūsų tyrimai taip pat remti idėją, kad skrandžio vėžiu sergantiems pacientams po 1 pooperaciniu savaitės vis dar turės savo T-ląstelių pogrupiuose pusiausvyros, bet beveik normalus po pooperacinio mėn 1. Tačiau IL-10 ir infiltracija T limfocitais išraiška ( pvz, CD3 ^{+ CD4 + + CD8 +), taip pat jų tarpusavio ryšį per navikų audiniuose, nėra žinoma, kuri turi atlikti papildomus tyrimus.}

Tai buvo įrodyta, kad stat3 aktyvavimo naviko ląstelės gali tarpininkauti imuninį atsaką, slopindamas imuninių ląstelių aktyvumą per uždegiminių citokinų tikriausiai išleisti iš užplūsta naviko audinį [12,45]. Mūsų duomenys rodo, kad stat3 signaliniai keliai vaidina svarbų vaidmenį suskubo imunologiniai toleranciją. Dauguma ankstesnių tyrimų, pranešė, kad STAT3 aktyvavimo agresyviai piktybinių navikų ir kitų karcinoma yra neigiamas prognostinis faktorius. Mūsų rezultatai taip pat parodė, kad agresyvesnis klinikinė elgesys skrandžio vėžio aktyvinta STAT3, pavyzdžiui, dažniau didelio laivo invazija, ir mažesnį visiškai rezektabilumą. Į STAT3 vaidmenis imuninio atsako, naviko augimą, bei T ląstelių infiltracija sumažinti vėžinių ląstelių rodo romano mechanizmą šioje ląstelių faktorius [45,46]. Aktyvinimas STAT3 buvo teigiamas klinikinės elgesį žymeklis. Šie rezultatai rodo, kad STAT3 gali funkcionuoti kaip skrandžio vėžio reguliatoriaus dėl jos ryšį su IL-6. Su šiais duomenimis omenyje ir kitus naujus tyrimus dėl stat3 signalinio kelio, verta tyrinėti romaną stat3 orientuojasi gydymo skrandžio vėžio [47-49].

Taigi, IL-6 sukeltos aktyvavimo STAT3 pastebima neoplastinės skrandžio audinio, kuris teigiamai koreliuoja su naviko progresavimo. Be to, IL-6 ir stat3 tolesni signalai, tokių kaip IL-10 ir VEGF buvo sumažinti pacientams, pašalinus skrandžio vėžio, palyginti su iš anksto-veiksmų, šis buvo susijęs su susigrąžinimo T limfocitų ir NK ląstelių skaičiaus sumažėjimą periferiniame cirkuliuoti šių pacientų. Todėl slopinimas IL-6 /stat3 signalizacijos keliu gali pateikti naują gydymo strategiją prieš skrandžio vėžio.

Padėka

padėkoti visiems pacientams ir jų šeimoms. Taip pat dėkojame visiems mūsų laboratorijoje nariams už jų techninę pagalbą, vertingas pastabas ir padrąsinimo. Dėkojame Dr David J. Blake iš Fort Lewis koledžas kritiškai skaityti šio rankraščio.

• PLoS ONE: Glaudesnis išraiška Rimta Ne kodavimo RNR HOTAIR yra susijęs su skrandžio vėžio plėtros
• PLoS ONE: SULF2 Metilinimas yra susijęs su in vitro Cisplatin jautrumas ir klinikinio veiksmingumo skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, gydomiems modifikuotą FOLFOX Regimen