PLoS ONE: Podocalyxin kaip prognostinio Marker skrandžio Cancer

Anotacija

Fonas

Podocalyxin-kaip 1 (PODXL) yra ląstelių sukibimą glikoproteinas susijęs su agresyvaus auglio fenotipo ir prastos prognoze keletas formų vėžio. Šio tyrimo tikslas buvo ištirti PODXL išraišką skrandžio vėžio naudojant dviejų skirtingų antikūnų.

Metodai

naviko audinių mikrogardelių ir imunohistocheminiu Mes įvertinome PODXL išraišką naviko egzempliorių iš 337 pacientų kas buvo atlikta operacija skrandžio adenokarcinoma Helsinkio universiteto ligoninės Santariškių klinikų. Mes naudojome dvi skirtingas antikūnų. HPA2110, kuris yra polikloninį antikūnas ir in-house monokloninis antikūnas, pavadintą HES9, kad tirti PODXL išraiškos su clinicopathologic kintamųjų ir pacientų išgyvenimo asociaciją

Rezultatai

PODXL dažymo buvo teigiamas pagal polikloninio antikūno 153 (57,5%) atvejais ir monokloninio antikūno 212 (76%). Polikloninis antikūnas išraiška buvo susijęs su žarnyno vėžio tipo (p < 0,001). Monokloninis antikūnas dažymo buvo susijęs su amžiumi per 66 (p = 0,001), su žarnyno vėžio (p < 0,001), ir su nedideliu naviko dydis (≤ 5 cm; p = 0,024). Abu antikūnai buvo susijęs su aukštos S-fazės frakcija (p = 0,022; p = 0,010), ir aukštos naviko proliferacijos indeksas (Ki-67; p = 0,003; p = 0,001). PODXL pozityvumo iki polikloninio antikūnų, nurodė sumažinti skrandžio vėžio konkrečiai 5-erių metų išgyvenamumas 24,0% (95% PI 16,9-31,1), palyginti su 43,3% (95% PI 33,7-52,9) pacienčių, kurių PODXL negatyvumo (p = 0,001 ). Rezultatas išliko didelis kintamųjų analizę. (RS = 3,17; 95% PI 1,37-7,34, p = 0,007)

Išvada

skrandžio vėžio, PODXL išraiška pagal polikloninio antikūnų HPA2110 yra nepriklausoma žymeklis prastos prognozės

nurodomoji dalis:. Laitinen A Böckelman C Hagström J Kokola A Fermer C Nilssonas p et al. (2015) Podocalyxin kaip prognostinio žymeklį skrandžio vėžio. PLoS ONE 10 (12): e0145079. Doi: 10,1371 /journal.pone.0145079

redaktorius: Yves St-Pierre, INRS, Kanada

Įstojo: rugsėjo 15, 2015; Priėmė: Lapkričio 29, 2015 m Paskelbta: Lapkritis 16, 2015

Visos teisės saugomos: © 2015 Laitinen ir kt. Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Duomenų Prieinamumas: Visi susiję duomenys yra per popieriaus

finansavimas:. Šis tyrimas parėmė dotacijas iš specialusis Läkaresällskapet, Kurt asmeniniuose Doris Palander fondo, Sigrid Jusélius pamatą, o medicinska understödsföreningen Liv asmeniniuose Halsa. Fujirebio diagnostika AB ir Onson Konsultacijos numatyta parama atlyginimų autoriams CF ir forma, tačiau neturėjo jokių papildomų vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar rengiant rankraštį.

konkuruojančių interesų. autoriai paskelbė, kad konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

per pastaruosius dešimtmečius skrandžio vėžio atvejų sumažėjo, ypač Vakarų šalyse, matyt, dėl to, kad mažėja sergamumas, Helicobacter pylori
, geriau higiena ir mažiau žmonių gyvenimo. Kadangi skrandžio vėžys turi prastą prognozę, tai dar pasaulyje yra antra labiausiai paplitusi priežastis, dėl vėžio susijusių mirties [1]. 5 metų išgyvenamumas, nepaisant chirurginio gydymo, yra tik apie 10-30% [2]. Aukšto mirtingumas yra daugiausia dėl to, vėlyvą diagnozavimą.

UICC Naviko Mazgas Metastazė (TNM) klasifikacija yra bene labiausiai atitinka prognostinį klasifikavimo sistemą šiandien. Tačiau net ir tose pačiose etapas grupės navikų, ligos eiga gali skirtis. Kurti metodus tikslesnį vertinimą neoplazijos agresyvumas būtų vertės, vertinant atskirų pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, prognozė.

Podocalyxin-kaip 1 (PODXL) yra anti-klijai transmembraninis glikoproteinas, priklausanti CD34 šeimos , Jis išreiškiamas paprastai inkstų podocytes [3], kraujodaros kamieninių ląstelių [4], kraujagyslių endothelia [5], ir žindymo epitelio ląstelės [6].

klinikinė reikšmė PODXL vėžio progresavimo buvo tiriamas įvairios karcinomos rūšys, iš pradžių kaip kamieninių ląstelių persekiotoją sėklidžių vėžio [7]. Vėliau išvada yra tai, kad navikas-ląstelei būdinga PODXL išraiška yra susijęs su daugiau agresyvaus fenotipo ir neigiamo rezultato keliose vėžio rūšių, pavyzdžiui, krūties [6], prostatos [8], kiaušidžių [9], gaubtinės ir tiesiosios žarnos [10- 12], urotelio pūslės [13], kasos [14], ir periampullary vėžio [15].

šio tyrimo tikslas buvo ištirti PODXL išraišką skrandžio vėžio atskleisti savo galimą vaidmenį agresyvumo ir prognozės. Mes nusprendėme naudoti du PODXL antikūnus atpažinti įvairių epitopus: monokloninis in-house HES9 antikūnų ir įsigyti polikloninis HPA2110 antikūnų. Neseniai sužinojome, kad šie du antikūnai yra nepriklausomi žymenys, blogos prognozės į gaubtinės žarnos vėžio [12]. Du antikūnai gali atpažinti dvi grupes storosios žarnos vėžiu sergantiems pacientams, kurie abu turi prasta prognozė; kartu naudoti šių antikūnų atskleidė pacientų grupėje su dar blogesne prognoze [16].

Medžiagos ir metodai

Pacientai

tyrimas apėmė 337 pacientų eilės, kuriems buvo atlikta operacija dėl histologiškai patikrinti skrandžio adenokarcinoma tuo chirurgijos departamento, Helsinkio universiteto ligoninė, nuo 1983 iki 1999 m diagnozė ir sustojimo pagal UICC klasifikuojant, jei 100 (29,7%) etapą IA-IB, 41 (12,2%) II etapą, 96 (28,5%) IIIA etapo-III B ir 100 (29,7%) IV stadijos pacientams. Limfos mazgas metastazių įvyko 184 (55%) ir tolimi metastazių 93 (28%) atvejais. Vidutinis amžius buvo 66 metai (diapazonas 30-87) ir 163 (48%) buvo moterys ir 174 (52%) vyrai. Visiškas ar dalinis skrandžio pašalinimas su pratęstas (D2 D2 +) limfadenektomija buvo atlikta 34 (10%) pacientų, bendra pašalintas skrandis su D1-limfadenektomija 161 (48%), ir subtotalinėmis pašalintas skrandis su D1-limfadenektomija 142 (42%). Iš viso 143 (43%) pacientai buvo operuoti su gydomuoju ketinimų, o 176 (52%) buvo atlikta paliatyvios operacijos. Nėra gavo neoadjuvantinės gydymą, bet 32 ​​(9%) pacientai gavo pooperacinį pagalbiniam gydymui (28 chemoterapija, radioterapija 2; 2 gavo abu). Išgyvenimo duomenys ir mirties priežastis iki 2013 lapkričio atėjo iš paciento įrašus, Gyventojų registro centro Suomijos ir Suomijos statistikos.

tyrimas patvirtino Chirurginės etikos komiteto Helsinkio universiteto ligoninės Santariškių klinikų (Dnro HUS 226 /E6 /06, pratęsimo TMK02 §66 2013/04/17) ir Nacionalinė priežiūros institucija gerovės ir sveikatos leido naudotis audinių mėginius be atskiro sutikimo šios retrospektyvinio tyrimo (Valvira Dnro 10041 /06.01.03.01 /2012).

audinių mėginiai

formalinu fiksuotų ir parafino įterptųjų chirurginiai audinio mėginiai atėjo iš patologijos skyriaus archyvuose. Pacientas audiniai buvo de-nustatyti ir anonimiškai analizuojami. Histopathologically buvo apibrėžta ir nurodyta ant haematoxylin- ir eozinas tamsintas skaidres atstovybės sritys naviko egzempliorių. Trys šerdys iš kiekvienos naviko blokas buvo imami su 0,6 mm Punchers ir įdėta į naują parafino bloko pusiau automatinis audinių microarrayer (audinių Arrayer 1, Beecher instrumentai Inc, Silver Spring, MD, JAV). Iš šešių audinių masyvo blokų ruošiamas, kiekvienas pateikta 24-192 navikų mėginiuose. Profiliai 4 pm kiekvieno

antikūnų

Mes palyginome du PODXL antikūnų skirtingų epitopq buvo supjaustyti ir tvarkomi imunohistocheminiu.. Polikloninis antikūnas (HPA2110, Atlas Antikūnai, Stokholmas, Švedija) buvo iškeltas prieš peptidą, kurio aminorūgščių liekanų 278-415 apie PODXL, ir monokloninis vidaus antikūnas HES9 [12] pripažįsta aminorūgščių liekanos 189-192 iš PODXL , Abi epitopai atsirasti ekstratąsteĮinėje dalis PODXL molekulės. Epitopas seka HPA2110 atitinka trijų baltymų kodavimo PODXL sandūros variantus su 100% (PODXL 001, 005, ir 201, The Human Protein Atlas). Ketvirtasis sudurti variantas atitinka 87% (PODXL 202). Epitopui, sekos HES9 atitinka 100% su visais sukirpimo variantų. Antikūnai yra detaliai aprašytas [12,17,18].

imunohistocheminis

Antraštės buvo nustatyti ant skaidrių ir džiovinamas 12 iki 24 valandų, esant 37 ° C, tada buvo deparaffinized ksilene ir rehidrataciją per palaipsniui mažėja koncentracijos etanolio į distiliuoto vandens. Antigeno paieška, skyriai buvo elgiamasi pirminio apdorojimo modulio (Lab Vision Corp., Fremont, CA, JAV) Tris-HCl buferio (pH 8,5) 20 minučių 98 ° C temperatūroje. Skyriai buvo tamsintas į Autostainer 480 (laboratorija matymas), kurį Dako NEKILNOJAMASIS įsivaizduoti aptikimo sistemos, peroksidazės /DAB +, Rabbit /pelė (Dako, Glostrup, Danija). Skaidrės buvo gydomi 5 minutes su 0,3% Dako NEKILNOJAMASIS peroksidazės blokavimo Sprendimas blokuoti endogeninius Peroksidazės. Vėliau, skaidres buvo inkubuojami 1 valandą su polikloninis (skiedimo 1: 250 = 2,5 mikrogramai /ml) arba monokloninis antikūnas (skiedimo 1: 500 = 5 mikrogramai /ml) kambario temperatūroje. Kaip teigiama kontrolė kiekvienam dažymo serijos mes naudojome mėginius iš inkstų audinio.

Balai iš reaktyvumas

HPA2110 ir HES9 immunopositivity buvo skirstomi į visų galimų auglio branduolių. Citoplazmos PODXL ir HES9 immunopositivity pelnytas kaip 0 iki 3 remiantis intensyvumo vėžio ląstelių reaktyvumas ir aukščiausią balą iš trijų branduolių tarnavo tolesnei analizei. Neigiama reaktyvumas pelnytas kaip 0, difuzinis silpna citoplazmos pozityvumo kaip 1, vidutiniškai teigiamas arba iš pagrindų stipriai teigiamas intensyvumas kaip 2 ir vienodai stiprus intensyvumas kaip 3. Visi mėginiai buvo pelnyti nepriklausomai dviejų mokslininkų (AL ir JH) apakinti į klinikinę būklę ir rezultatus duomenys. Mėginiai su prieštaringo balai buvo iš naujo įvertinti, o sutarimo rezultatas tarnavo tolesnei analizei. Mes galėjome apdoroti ir rezultatas HPA2110 dažymą 266 ir HES9 dažymo ir 279 mėginių.

Statistinė analizė

asociacijų tarp HPA2110 ir HES9 pozityvumo ir clinicopathologic kintamųjų buvo vertinami pagal chi-square testą arba tiksli Fišerio testas. Koreliacija tarp dviejų podocalyxin antikūnų buvo vertinami pagal Spearman koreliacijos testą. Ligos konkrečių išgyvenamumas skaičiuojamas nuo dienos chirurgijos mirties nuo skrandžio vėžio.

Išgyvenimo kreivės buvo pastatyti pagal Kaplan-Meier metodu ir, palyginti su Logrank testą. Dėl univariacinį ir kintamųjų išgyvenimo analizę, Cox proporcinės pavojaus modelis turėjo šie kintami dydžiai įvestas: amžius, lytis, etapas, kokybė, Laurens klasifikacija, naviko dydžio, naviko vietą, PODXL išraiška lemia HPA2110 dažymo ir HES9 dažymo, DNR ploidiškumo, S- etapas frakcija, Ki-67 išraiška, ir p53 išraiška. Etapas, kokybė, Laurens klasifikacija, naviko dydis, DNR ploidiškumo S fazių frakcija, ir išraiška PODXL, HES9, Ki-67 ir p53 buvo įvesta kaip kategorinių kintamųjų. DNR ploidiškumo ir S-etapas frakcija buvo įvertintas anksčiau tėkmės citometrijos ir P53, ir Ki-67 audinių išraiška imunohistocheminiu [19,20]. P-vertė < 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas. Visi statistinės analizės buvo padaryta su IBM SPSS statistikos versiją 20,0 for Mac (IBM Corporation ", Armonk, NY, JAV).

Rezultatai

imunohistocheminis

citoplazmos HPA2110 reaktyvumas, įvertintas 266 atvejų, buvo neigiamas 113 (42,5%), silpnai teigiama 120 (45,1%), vidutiniškai teigiami 29 (10,9%), ir tvirtai teigiama 4 (1,5%) atvejais. Iš 279 atvejų sėkmingai tamsintas už citoplazmos išraiška pagal HES9, 67 (24,0%) buvo neigiamas, 137 (49,1%) silpnai teigiama, 54 (19,4%) vidutiniškai teigiami, ir 21 (7,5%) stipriai teigiamas. Į galutinę analizę, silpnas stipriai teigiamas HPA2110 ir HES9 reaktyvumas (balai 1-3) buvo laikomas teigiamu, išraiška. Reprezentacinės vaizdai immunostainings yra 1 pav Tiek HPA2110 ir HES9 tamsintas tolygiai citoplazmą, su branduoline nei ląstelių membraninis immunopositivity pastebimas. Citoplazmos išraiška podocalyxin pagal dviejų skirtingų antikūnų HPA2110 ir HES9 koreliuoja (r _{S = 0,455, p < 0,001, Spirmeno rango koreliacijos testas).}

asociacija HPA2110 ir HES-9 su klinikos kintamųjų ir biologiniai žymenys

apie HPA2110 ir HES9 asociacijų su klinikos kintamųjų ir molekulinių biologinių žymenų buvo taip: teigiamas (balai 1-3) HPA2110 dažymo buvo susijęs su žarnyno vėžio tipo (p < 0,001), teigiama HES9 dažymo buvo susijęs su amžius per 66 (p = 0,001), su žarnyno vėžio (p < 0,001), ir su nedideliu (≤ 5 cm) naviko dydis (p = 0,024). Tiek HPA2110 ir HES9 buvo susijęs su aukštos S-fazės frakcija (SPF, p = 0,022; p = 0,010) ir aukštos proliferacija indeksas naviko (Ki-67, p = 0,003; p = 0,001) (1 ir 2 lentelės).

išgyvenimo analizuoja

Teigiamas HPA2110 išraiška nurodė skrandžio vėžys konkrečiai 5 metų išgyvenamumas 24% (95% PI 16,9-31,1), palyginti su pacientais, kurių neigiamas HPA2110 dažymą su 5 metų išlikimas 43% (95% PI 33,7-52,9) (p = 0,001 log-rank testas) (pav 2 ir 3 lentelė). Skrandžio vėžio specifinis 5 metų išgyvenamumas pacientams, sergantiems HES9-teigiamas naviko dažymo buvo 30% (95% PI 23,1-36,1), ir tiems, kurie su neigiamu dažymo, 40% (95% PI 27,7-52,1; p = 0,130 Prisijungti -rank testas) (2 pav).

pogrupių analizę, HPA2110 buvo reikšmingas žymuo prastos prognozės grupėmis jaunesnių pacientų (amžiaus pagal 66 metų) (p = 0,006), o vyriškos lyties (p = 0,002), o I difuzinis tipo vėžio (p = 0,001), ir etapo pacientai (p = 0,048) (3 pav ir 3 lentelė). Be kitų pogrupių studijavo, HPA2110 netarnavo kaip prognostinis persekiotoją

HPA2110 išraiška išliko didelis kintamųjų analizę. (RS = 3,17; 95% PI 1,37-7,34; p = 0,007; 4 lentelė). Kitos nepriklausomi prognostiniai veiksniai kintamųjų analizei buvo etapas, kokybė, ir DNR ploidiškumo.

Diskusijos

Mes parodome, kad čia vėžys konkrečiai 5 metų išgyvenamumas buvo žymiai geriau už skrandžio vėžiu sergančių pacientų, kurių PODXL neigiamojo navikas. Tiesą sakant, tarp 1 ETAPAS pacientams, sergantiems PODXL neigiami navikų, tik vienas pacientas mirė nuo vėžio. Be kintamųjų analizei, teigiama PODXL išraiška tarnavo kaip nepriklausomas persekiotoją prastos prognozės. Teigiamas PODXL išraiška tiek polikloninio antikūnų HPA2110 ir monokloninių antikūnų HES9 buvo susijęs su dideliu SPF tėkmės citometrijos ir Ki-67 dažymą, kurie abu žymenys aukštos platinimu vėžinių ląstelių ir tokiu būdu iš blogesnė prognozė.

Teigiamas išraiška PODXL abiejų antikūnų buvo susijęs su žarnyno vėžio tipo, bet PODXL-neigiamas navikas įrodė ne būti prognostinė žymeklį ir žarnyno vėžio. Priešingai, vėžys konkrečiai 5 metų išgyvenamumas į pasklidosios tipo vėžio pogrupyje buvo žymiai blogesnė pacientams, kurių PODXL teigiamas naviko. Apskritai, difuzinis tipo vėžys yra susijęs su blogesne prognoze nei turi žarnyno tipas [21].

Kiek mums žinoma, esame pirmieji pranešti prognostinę vertę PODXL skrandžio vėžio. Tai buvo akivaizdi jau keletą kitų vėžio rūšių, pavyzdžiui, krūties [6], prostatos [8], kiaušidžių [9], gaubtinės ir tiesiosios žarnos [10-12], šlapimo trakto šlapimo pūslės [13], kasos [14], ir periampullary vėžys [15] , Tyrimas dėl storosios žarnos vėžio šou nuoseklūs tarp pirminių navikų ir atitinkamų limfmazgis metastazių atskirų pacientų ir PODXL išraiškos pat išlieka nepaveikta neoadjuvantas radioterapija. Šie duomenys paremti klinikinį naudingumą PODXL kaip prastos prognozės [22] persekiotoją. Čia mes nesimokė PODXL išraišką limfmazgių metastazių skrandžio vėžys, ir nė vienas iš šios kohortos pacientų gautą priešoperacinė chemoterapija, nors šiuo metu, o rutina. Šie Priešoperacinės chemoterapijos poveikis PODXL raiškos skrandžio vėžio reikia tolesnio įvertinimo.

Mes naudojome du antikūnus pripažįstama PODXL, atskirai įsigyjamu polikloninį antikūnų HPA2110 ir in-house monokloninių antikūnų HES9 [16]. Immunoexpression pagal monokloninis antikūnas HES9 buvo stipresnis nei polikloninio antikūno. Abu antikūnai tamsintas tolygiai citoplazmoje, ir nei tamsintas branduolius, nei ląstelių membranos. Į dažymo intensyvumo ir paskirstymo įvairovė buvo silpnesnį naudojant polikloninio antikūno, todėl vertinimas balais sunkiau. Iš esmės PODXL yra transmembraninis molekulė, todėl būtų keista, ne jį rasti ląstelių membranų skrandžio vėžio ląsteles arba antikūnų. Iš citoplazmos, ne membrana, išraiškos PODXL, jo vaidmenį ir funkcijas, tai reiškia, reikia papildomai įvertinti.

Šios skirtingos antikūnai, kuriuos mes naudojome pripažinti nevienodų dalių PODXL molekulės, tikriausiai paaiškina, kodėl jų išraiška kai iš egzempliorių skiriasi ir rezultatai nėra tapatūs. Kaprio ir kt. [16], naudojamas tas pačias antikūnų, storosios žarnos vėžio, ir nustatė įdomų skirtumą tarp dažymo modelius. Polikloninis antikūnas pozityvumo buvo membraninis [9,10], bet, monokloninis antikūnas pozityvumo buvo akivaizdu, daugiausia citoplazmoje. Be kolorektalinio vėžio, stiprus pozityvumo tiek monokloninis ir polikloninio antikūno atskleidė pacientų pogrupyje dar blogiau išlikimui. Neradome šį koreliacijos pobūdžio skrandžio vėžio pavyzdžius. Apskritai, pozityvumo tarp skrandžio vėžiu sergantiems pacientams buvo mažesnis nei gaubtinės žarnos vėžio pacientų. Į gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio apie 94% atvejų buvo teigiamas PODXL su šių dviejų antikūnų, kadangi į skrandžio vėžio pozityvumo pasirodė 76% atvejų su monokloninis antikūnas ir į 58% su polikloninio antikūno. Iš PODXL pozityvumo skrandžio vėžio dažnis buvo artima matyti krūties ir kiaušidžių vėžio (40% ir 67%) [6,9].

PODXL yra transmembraninis glikoproteinas. Įrodyta, kad mucino, kurie taip pat glikoproteinai, vaidinti vaidmenį epitelio į mezenchimos perėjimo (EMT) [23,24]. Iš PODXL vaidmuo vėžys yra nežinoma, tačiau ji gali būti spėliojo, kad taip pat PODXL gali turėti vaidmenį EMT. EMT gali paaiškinti, kodėl pacientai, sergantys didelio PODXL išraiškos prasčiau išlikimą.

Šios studijos stiprumas yra didelis ligonis kohortos su skrandžio vėžio ir ilgą tolesnių su patikima klinikinio stebėjimo metu ir išgyvenamumo duomenis. Iki TMA technika, tik nedideli plotai naviko vertinami, palyginti su sveikų audinių skyriuose. Į gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio, Larsson ir kt. [22] nustatė, kad naudojimasis visai skyriuose leidžiama nustatyti didesnį skaičių navikų kaip PODXL teigiamas nei padarė PMA analizę. Kadangi PODXL išraiška yra nevienalytė, naudojimas TMA technika gali sukelti nepakankamą teigiamų atvejų. Balai tiek monokloninių antikūnų ir polikloninis-antikūnų išraiška buvo kai egzempliorių sunkiomis; tokiu būdu atvejai, kurių tik keletą vėžinių ląstelių, ir tų, kurių sudėtyje esančių vėžinių ląstelių vertė buvo neįmanoma nustatyti buvo pašalintos iš analizės. Tai, iš dalies, paaiškina daug išstumtų atvejais. Kita vertus, PMA metodas leidžia analizę didelių Pacientų grupės su vienodomis dažymo metodą.

sudarymo, PODXL imunodažymu tarnauja kaip nepriklausoma žymeklio blogos prognozės skrandžio vėžio. Tai, mūsų žiniomis, pirmąją ataskaitą dėl prognostinę vertę PODXL raiškos skrandžio vėžio. Ateities tyrimai turėtų patvirtinti šią asociaciją ir išspręsti mechanizmus, pagal kuriuos PODXL įtakos plėtrą ir elgesį skrandžio vėžio.

Padėka

Mes dėkojame Paivė Peltokangas ir Elina Aspiala už puikų techninę pagalbą.

• Tipai skrandžio vėžio
• PLoS ONE: DBGC: iš žmogaus skrandžio vėžio duomenų bazė