PLOS ONE: c-Met como um marcador de prognóstico no câncer gástrico: uma revisão sistemática e meta-Analysis

Abstract

Fundo

c-Met tem sido reconhecida como um importante alvo terapêutico em câncer gástrico, mas a propriedade de prognóstico do estado de c-Met ainda é incerto. Nós teve como objetivo caracterizar o efeito prognóstico de c-Met por revisão sistemática e meta-análise.

Métodos

Foram identificados 15 estudos que avaliam a sobrevivência no cancro gástrico por status c-Met. medir o efeito de interesse foi hazard ratio (HR) para a sobrevivência. Meta-regressão foi realizada para estimar a relação entre FC e estágio da doença. de efeitos aleatórios meta-análises foram usadas para explicar a heterogeneidade.

Resultados

15 estudos elegíveis fornecidos dados sobre os resultados estratificados por estado de c-Met em 2210 pacientes. Meta-análise dos RHs indicado um sistema operacional significativamente mais pobres em pacientes com alta expressão de c-Met (média HR = 2,112, IC 95%: 1,622-2,748). análise de subgrupo mostraram o efeito prognóstico de c-Met foi idêntico em nível de proteína e metodologia baseada gene-nível. O mesmo efeito também foi visto em análise etnia subgrupo asiática e ocidental. Meta-regressão mostrou HR não foi associada com o estágio da doença.

Conclusões

Os pacientes com tumores que abrigam elevada expressão de c-Met são mais propensos a ter um sistema operativo pior, com este efeito prognóstico independente de estágio da doença. c-Met status deve ser avaliada no prognóstico clínico

Citation:. Yu S, Yu Y, Zhao N, Cui J, Li W, Liu T (2013) c-Met como um marcador de prognóstico no câncer gástrico: Uma revisão sistemática e meta-análise. PLoS ONE 8 (11): e79137. doi: 10.1371 /journal.pone.0079137

editor: Anna Sapino, Universidade de Torino, Itália |

Recebido: 11 de junho de 2013; Aceito: 17 de setembro de 2013; Publicação: 04 de novembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Yu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Esta pesquisa é suportado pelos projetos 30972551 e 81273187 da National Natural Science Foundation da China. (www.nsfc.gov.cn). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer gástrico (GC) é uma das doenças malignas humanas mais comuns e continua a ser a segunda principal causa de morte relacionada ao câncer em todo o mundo [1]. Apesar de recentes avanços diagnósticos e terapêuticos melhoraram os resultados clínicos de pacientes com estágio inicial de câncer gástrico, o prognóstico para a fase avançada permanece extremamente pobre, e as taxas de sobrevida global em 5 anos são aproximados 15% [2,3], para que haja uma necessidade contínua para a compreensão dos mecanismos subjacentes câncer gástrico, bem como a identificação de novos alvos moleculares para o tratamento. Até à data, os oncologistas têm identificado vários fatores que promovem o desenvolvimento de câncer gástrico para segmentação terapêutica, e proeminente entre estes é c-Met.

O receptor tirosina cinase c-Met é codificada por MET oncogene. Este receptor e seu fator de crescimento de hepatócitos ligando (HGF) foram encontrados com freqüência desregulada em carcinomas gástricos [4-7]. c-Met é sobre-expresso em cerca de 20% das linhas celulares de cancro gástrico [8] e 18-82% dos casos de cancro gástrico [7,9-12]. A via de c-Met /HGF estimula a proliferação, invasão, angiogénese, bem como protecção contra a apoptose em células cancerosas [13,14]. Portanto, o c-Met tem sido reconhecido como um importante alvo terapêutico em estratégias anti-neoplásicos, e também tem mostrado possuir propriedades preditivos para o tratamento com o anticorpo monoclonal para o HGF no cancro gástrico localmente avançado ou metastásico [15].

No entanto, quando se trata de propriedades de prognóstico do estado de c-Met, ainda parece não haver consenso, apesar de um número relativamente grande de estudos sobre c-Met em câncer gástrico se debruçaram sobre a associação entre um estado de sobrevivência e de c-Met-positiva. Nesta revisão sistemática atual nós utilizamos a literatura já existente para abordar a questão das propriedades prognósticos de um estatuto c-Met-positivos em câncer gástrico.

Materiais e Métodos

1. Publicação Investigação

sistemáticas pesquisas informatizadas foram realizados utilizando o banco de dados eletrônico Pubmed (até 30 de maio de 2013). A estratégia de busca utilizadas as palavras-chave "c-Met ', ou' MET 'e' câncer gástrico", ou "carcinoma gástrico" ou "neoplasia de estômago '. idioma Inglês estudos publicados eram elegíveis se se verificarem as seguintes critérios: (1) pacientes tiveram o diagnóstico de câncer gástrico; (2) a sobrevida global (OS) ou sobrevida livre de progressão (PFS) foram analisados ​​estratificada por nível c-Met; (3) os resultados foram parte de uma análise original; (4) quando a mesma população de pacientes foi utilizado em várias publicações, somente o estudo mais recente, maior ou completa foi incluído na meta-análise. Os dados de artigos de revisão, resumos e letras não foram incluídos.

2. Extração de dados

características do estudo foram extraídos dos artigos elegíveis e resumidos de forma consistente para auxiliar comparação. Os seguintes dados foram coletados de cada estudo: primeiro nome do autor, ano de publicação, número de pacientes selecionados, estágio da doença, o tratamento clínico, metodologia de análise c-Met incluindo o limiar usado para dicotomizam c-Met como "alta" e "baixa ', a sobrevivência livre de progressão ea sobrevida global estratificada por status e razão de risco c-Met (HR) com intervalos de confiança de 95% (IC) para PFS ou OS. Quando h e os seus intervalos de confiança não foram relatados directamente, eles foram estimados a partir de outros dados, tais como o número de pacientes em cada grupo e as curvas de Kaplan-Meier para a sobrevivência global, utilizando a metodologia publicada [16]. Ambas as estimativas de RH brutas e ajustadas foram procurados para cada estudo. Quando as estimativas de efeitos relevantes não foram obtidos usando os métodos acima, o estudo foi excluído da meta-análise.

3. A análise estatística

Os pontos finais foram PFS e OS. A associação entre nível de c-Met e PFS ou OS foi avaliada utilizando a taxa de risco de pacientes de alto nível c-Met mais pacientes de nível c-Met baixos e 95% de intervalo de confiança de modelos de risco proporcional uni e multivariada de Cox, assim que uma HR de 1 indica uma falta de associação entre nível de c-Met e o risco de morte, uma HR superior a 1 indica um maior risco de morte em pacientes de alto nível c-Met, e uma HR inferior a 1 indica um maior risco de morte em baixo c pacientes de nível Met.

modelo de efeitos fixo foi inicialmente utilizada para calcular as estimativas de RH em pool. Se o ^{2 Estatística I foi mais do que 50% ou o valor p de efeitos fixos para o 2 estatística que foi inferior a 0,10, indicando uma heterogeneidade significativa entre os estudos, um modelo de efeitos aleatórios foi então usada para calcular a estimativa agrupada .}

Para estabelecer o efeito da metodologia de heterogeneidade entre os estudos sobre meta-análises conclusões, as análises de subgrupo foram realizadas por desenhos de estudo. Na análise de subgrupo de c-Met método de apuração expressão, estudos foram classificados como subgrupo método, quer ao nível de proteína que executou imuno-histoquímica (IHQ) para estratificar a expressão de c-Met ou método de nível gene subgrupo, como reacção quantitativa da cadeia polimerase transcriptase reversa ( RT-qPCR), transferência de Southern e hibridação in situ fluorescente (FISH), o que dicotomizam estado de c-Met por amplificação do gene, como relatado na publicação dado. A heterogeneidade clínica foi estabelecida pela análise de subgrupo da etnia, em que os estudos foram classificados como subgrupo asiático ou ocidental. Para demonstrar se HR foi associada com o estágio da doença dos pacientes GC, foi realizada a análise de meta-regressão de logaritmo transformado resultados (HR) contra a percentagem de pacientes em estágio avançado em cada estudo, e HR foi considerado para ser associado com o estágio da doença quando o valor p do modelo era inferior a 0,05.

viés de publicação Potencial foram avaliados através da realização de teste de Egger (p < 0,05 foi considerado representativo de viés de publicação estatisticamente significativo) para meta-análise incluindo 10 ou mais estudos. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando STATA versão 11.0.

Resultados

1. Estudos elegíveis e características Estudos

O fluxograma do nosso estudo é mostrada na Figura 1. A partir de 511 resumos encontramos, 493 foram excluídos com base em nossos critérios de inclusão. Entre os 18 artigos que foram deixados para a avaliação da elegibilidade, 3 artigos foram excluídos desde pontos de dados não eram extraída dos dados que apresentou [8,17,18]. Finalmente, foram identificados 15 estudos elegíveis [4,7,19-31] que forneceram dados sobre os resultados estratificados por estado de c-Met de 7 países, e as suas características estão resumidas na Tabela 1. Em dois estudos [29,30] dados dos resultados foram apresentados separadamente por c-Met método de expressão apuração, e esses conjuntos de dados foram tratados separadamente. Especificamente, Lee et al. [29] dados sobre os resultados estratificados em dois grupos, e um subgrupo que costumavam IHC para marcar a expressão de c-Met foi excluído uma vez que as estimativas de efeito relevantes não pôde ser obtida. Os tamanhos das amostras dos conjuntos de dados analisados ​​para a sobrevida global variou de 35 a 472 (média 107; Tabela 1), com dados de um total de 2210 pacientes disponíveis para as meta-análises. Quatorze desses estudos foram de desenho retrospectivo. Um desses estudos eram de desenho prospectivo. Dos 15 estudos, 11 [4,19,22-24,26-31] incluiu pacientes com doença precoce e avançado (fase I-IV), no entanto, nenhum desses estudos separados seus pacientes em subgrupos. Os quatro estudos restantes [7,20,21,25] incluiu pacientes com estágio I-III. Todos os pacientes em nossa meta-análise foi submetido à ressecção do tumor primário curativo ou noncurative, e nenhum deles recebeu quimioterapia ou radioterapia antes da cirurgia. Em cinco estudos [7,22,27-29], os pacientes com estágio avançado receberam quimioterapia pós-operatória ou quimioradioterapia, enquanto os pacientes em outro estudo não recebeu qualquer tratamento pós-operatório [21]. Nove estudos [4,19,20,23-26,30,31] não mencionou o tratamento pós-operatório. Nenhum destes estudos mencionados tratamento paliativo após recidiva excepto um [20], em que todos os pacientes que sofreram recidiva foram submetidos a quimioterapia baseada-fluorouracilo (Tabela S1). Nenhum do tratamento utilizado nestes estudos foi decidido pelo estado de c-Met. A média de dados de acompanhamento de tempo foram apresentados pela maioria dos investigadores, com uma mediana de 71 meses (variação de 20 a 160 meses). OS foi relatada em todos os estudos, mas a sobrevivência livre de progressão só foi apresentado em um estudo [20]. Nove estudos [4,19-24,28,29] apresentou dados sobre HR, com IC 95% para OS diretamente. Um estudo [30] apresentaram HR sem IC 95% para o OS. H e 95% de cis não foram directamente apresentada nos restantes cinco estudos e foram estimados a partir das curvas de Kaplan-Meier. Os resultados ajustados foram fornecidos em oito estudos [4,19-24,28] enquanto os resultados não ajustados foram fornecidos em apenas dois estudos [29,30].
Study (primeiro autor + data de publicação)
No. dos pacientes
^{um país
doença Stage
Percentagem de estágio avançado (%)
Método para estratificar status de c-Met
alta c-Met expressão (%)
HR
IC 95%
Toiyama 2011100JapanI-IV34.1RT-qPCR242.99 * 1,67-5,35 * Catenacci 201136USAI-IVNSRT-qPCR84.71.31-16.9 * Catenacci 201135USAI-IVNSIHC431.340.93 -1,92 * Lee 2012438KoreaI-IV10.8SISHNS2.271.05-4.93Li 2012114ChinaI-IV64.9IHC820.5780.221-1.513Taniguchi 1998102JapanI-IVNSIHC421.9 * 0,74-4,85 * Tsugawa 199870JapanI-IV44.4Southern Blot109 0,3 * 3,18-27,25 * Nakajima 1999128JapanI-IIINSIHC461.62 * 0,53-4,90 * Huang 200145TaiwanI-IV64.4IHC719.31.22-70.81KUBICKA 200242GermanyI-IIINSIHC263.77 * 1,54-9,24 * Han 200550KoreaI-IV20.0IHCNS0.6510.053-1.493DREBBER 2008112GermanyI-IV31.6IHC731.91.0-3.5Lee 2011472KoreaI-IV22.4RT-qPCR211.6011.078-2.380Zhao 2011136ChinaI-IIINSIHC741.8791.089-3.241Graziano 2011216ItalyII- IIINSFISH102.911.65-5.11Shi 2012114ChinaI-IV4.7RT-qPCR292.11.20-3.69Table 1. Resumo dos estudos relatando c-Met expressão e os resultados em pacientes com câncer gástrico
RTqPCR, transcriptase reação em cadeia da polimerase quantitativa reversa.; IHC, imuno-histoquímica; SISH, prata hibridização in-situ; FISH, hibridação in situ fluorescente; NS, não mostrado; HR, taxa de risco; CI, intervalo de confiança. um número de pacientes avaliáveis ​​para a expressão de c-Met e sobrevivência global. * Resultado estimado a partir dos dados apresentados em papel utilizando metodologia publicada. CSV Baixar CSV}

2. c-Met estado atribuição

c-Met avaliação foi realizada por IHQ em 9 estudos [4,7,21,23-25,27,28,30], e RT-qPCR em 4 estudos [19, 22,30,31]. Outra três estudos FISH utilizada [20], de transferência de Southern [26], e prata hibridização in-situ (SISH) [29], respectivamente, como seu método para estratificar status de c-Met. Nos 9 estudos que avaliaram a expressão de c-Met por IHC, foi observada heterogeneidade marcada entre os limiares utilizados para dichotomise status de c-Met. Um estudo [21] derivado de um composto (H) pontuação multiplicando medida score-coloração de células (0-4; 0 = nenhum, 1 = 1-10%, 2 = 11-50%, 3 = 51-75%, 4 = > 75%) por pontuação intensidade (0-3; 0 = nenhum, 1 = fraco, 2 = moderado, 3 = forte) com H-score menor que 3 designado c-Met baixa. Outro estudo [28] usado marcar a mesma intensidade, mas uma pontuação diferente medida (0-3; 0 = nenhum, 1 = < 35%, 2 = 35-75%, 3 = > 75%) com H-score mais do que 4 designada por C-Met alta. Em cinco estudos, a percentagem de células coradas foi analisada por si só, com amostras ≥5% [4,7], > 10% [25] ou > 30% [23,27] designada por C-Met alta. Nos restantes dois estudos, grau de coloração de intensidade menor do que 2 [30] ou 3 [24] representado baixos níveis de expressão de c-Met.

Em cinco estudos que atribuídos a expressão de c-Met a nível do gene, status elevado c-Met foi definida como a cópia do c-Met 7 vezes [30], 5 vezes [20], 4 vezes [19, 22] ou duas vezes [29] mais do que a da referência interna. Um outro estudo [26], que exerçam Southern blot designado elevado estatuto de c-Met como duas vezes tão elevada como na mucosa normal. O estudo restantes [31] usou o software analisador de imagem para avaliar amostras.

A taxa de elevado estatuto de c-Met variou entre 8% e 82% (média, 36%). A proporção média observada de expressão de c-Met alta foi de 59% (intervalo de 26-82%), e 16% (intervalo de 8-29%), respectivamente, em estudos utilizando IHC e outros métodos. Dois estudos não apresentaram a proporção de alto nível c-Met.

3. Principais resultados de sobrevida global

Os resultados da meta-análise da associação entre o nível de c-Met e sobrevivência global são fornecidos na Figura 2. 16 conjuntos de dados estavam disponíveis para pooling OS, 8 com não ajustado [7,25 -27,29-31] e 8 com pontos de dados ajustados [4,19-24,28]. Meta-análise das estimativas indicavam um sistema operacional significativamente mais pobres em pacientes com alta expressão de c-Met (média HR = 2,112, IC 95%: 1,622-2,748). No entanto, a heterogeneidade foi grande, (p = 0,007, eu ^{2 = 52,4%), indicando intervalos de predição de largura para o efeito prognóstico em um ambiente clínico individual. Não houve evidência de efeitos pequeno estudo utilizando estimativas acima relatados (teste de Egger: p = 0,168).}

O resultado da análise de verificação método subgrupo c-Met é fornecida na Figura 3. Os pacientes com elevada c-Met Os níveis de expressão tinha um OS significativamente mais pobres, tanto subgrupo método de nível do gene e método de nível de proteína subgrupo (HR = 2,661, IC 95% 1,858-3,809 e HR = 1,661, IC 95% 1,171-2,357, respectivamente). Não houve diferença estatística significativa entre os dois subgrupos (p = 0,086).

Em uma análise de subgrupo estratificar pacientes por etnia, houve relação significativa entre a alta expressão de c-Met e pobres OS em ambos os pacientes asiáticos e ocidentais (HR = 2,032, IC 95% 1,433-2,882 e HR = 2,294, IC 95% 1,446-3,640, respectivamente). O resultado é fornecido na Figura 4. Sem significância estatística foi encontrada entre os dois subgrupos (p = 0,696).

Uma análise de meta-regressão foi realizada para testar a relação entre FC e do estágio da doença de pacientes em 9 estudos [4,19,22-24,26,28,29,31], entre os quais "estágio avançado" ressaltou para o estágio IV [19,22-24,26,29,31] ou estágio III e estágio IV [4 , 28]. O lnHR geral não teve associação com ln (percentagem de estágio avançado) (p = 0,853, Figura 5).

Discussão

Esta revisão sistemática foi com base em 15 publicações que cobrem o período de 1998 de Maio de 2012 e compreende um total de 2210 pacientes com câncer gástrico. Os resultados desta meta-análise demonstram o significado prognóstico do nível de expressão de c-Met em pacientes GC em países asiáticos e ocidentais. Na meta-análise global da associação entre nível de c-Met e sobrevida global, os resultados indicaram um aumento estatisticamente significativo na sobrevida global em pacientes com baixa expressão de c-Met em relação a pacientes com alta expressão de c-Met.

A análise de subgrupos mostraram que a resistência da relação entre o nível de c-Met e sobrevivência global foi idêntico com base no método utilizado para determinar estado de c-Met. Ambos método de nível gene subgrupo eo método de nível de proteína subgrupo demonstrou associação estatisticamente significativa entre o estado c-Met e sobrevida global. Em outras palavras, a metodologia utilizada para estimar o estado de c-Met não efeito a propriedade de prognóstico. No entanto, a heterogeneidade estatisticamente significativa foi observada em ambos os subgrupos. A explicação para estes bastante grande variação é susceptível de ser multifactorial, tais como diferentes populações estudadas, mas os aspectos mais importantes são, provavelmente, a utilização de anticorpos variadas para IHC e genes de manutenção para RT-qPCR e a aplicação de critérios diferentes para estratificar com c-Met estado. Num estudo de fase II realizado no último par de anos, que avaliou o efeito do anticorpo HGF e biomarcadores da via MET em pacientes GC avançados [15], os critérios de pontuação desenvolvidos por Kelly et al. Identificou-se elevada expressão de c-Met em percentagem de células staining≥50%, bem como coloração grade≥1 intensidade para as lâminas coradas e o número total de cópia >gene MET; 15 para os peixes. Se este novo critério é amplamente aceite apenas como critérios Her2 pontuação desenvolvido por Hofmann et ai. [32] para o ensaio toga, a variação entre os estudos serão minimizados.

A análise de subgrupo também mostrou que ambos os pacientes asiáticos e ocidentais abrigam alto nível c-Met foram significativamente associados com a sobrevivência mais pobres, que não variam com base na etnia. Embora as diferenças nos resultados têm sido relatados entre as populações asiáticas e ocidentais com câncer gástrico [33,34], nossos resultados fez c-Met um marcador de prognóstico mais amplamente utilizada.

O estágio da doença é um dos fatores mais importantes que influência OS. Nos 15 estudos avaliados em nossa meta-análise, 11 foram incluídos pacientes de fase I-IV. No entanto, nenhum desses estudos separados seus doentes em subgrupos. Com isso em mente, nós aplicamos meta-regressão para detectar se a propriedade prognóstico do c-Met seria impactado pela variação do percentual de pacientes em estágio avançado entre os estudos. Os resultados mostraram que o HR geral não teve associação com a porcentagem de pacientes em estágio avançado em 9 estudos, o que significava o efeito prognóstico de c-Met foi independente ao estágio da doença. Este resultado promoveu ainda mais o valor prognóstico do c-Met no cancro gástrico.

Outro fator importante para o OS é o tratamento clínico, que inclui cirurgia, quimioterapia pós-operatória ou radioterapia e tratamento paliativo após recidiva ou progressão da doença. Em nossa meta-análise, o HR conjunta dos cinco estudos em que pacientes receberam tratamento pós-operatório foi de 1.556, com IC 95% 1,152-2,102 (Figura S1), o mesmo que o HR e 95% CI de um estudo no qual pacientes didn 't receber qualquer tratamento pós-operatório. Devido à variação no tratamento e falta de estudo avaliou, é difícil dizer se o efeito prognóstico de c-Met está associada com o tratamento clínico ou não com base em estudos disponíveis. Novos estudos ainda são necessários para esclarecer melhor esta associação.

Para o nosso conhecimento, esta é a primeira meta-análise que sugere fortemente status elevado c-Met representam biomarcador prognóstico adverso para a sobrevida global em pacientes GC. Pacientes com tumores que abrigam elevada expressão de c-Met são mais propensos a ter um sistema operativo pior, e este efeito prognóstico era independente para o estágio da doença. No entanto, grandes estudos utilizando métodos padronizados imparciais ainda são necessários antes do teste c-Met pode mover em direção a aplicação clínica rotineira como uma ferramenta de prognóstico.

Em conjunto, os resultados globais deste estudo apoiam a hipótese de que o nível de expressão de c-Met está associada com sobrevida global em pacientes GC. Estudos futuros devem tentar bloquear HGF /c-Met percurso, de modo a prolongar a sobrevida global dos pacientes do GC, e o prognóstico dos pacientes portadores alta expressão de c-Met teria de ser alterado com mais e mais ensaios clínicos avaliando agentes direcionados contra HGF ou c Met em pacientes GC.

Informações de Apoio
Tabela S1.
tratamento clínico de estudos relatando c-Met expressão e os resultados em pacientes com câncer gástrico.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s001
(DOC)
Figura S1. plot
Floresta mostrando a meta-análise de estimativas taxa de risco para OS no pós-operatório e não subgrupo tratamento pós-operatório.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s002
(TIF)
Checklist S1.
A seção que contém cada item no PRISMA Checklist.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s003
(DOC)

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